At 90% confluence, the Caco-2 cells were detached with trypsin-EDTA treatment (final concentration of 0.005 g/L), followed by seeding the cells on 12-well millicell cell culture inserts (0.4 μm pore size, 12 mm diameter, Millipore Corporation, Billerica, MA, USA) with a cell density of 1.2 × 105 cells/ml and 21-day incubation. The volume of culture medium was 1.95 ml in the basolateral side and 0.4 ml in the apical side. Transepithelial electrical resistance (TEER) values were checked every 2 days by using Millicell-ERS system (Millipore, Billerica, MA, USA) in order to evaluate the tight junction permeability of the Caco-2 cell monolayers.
90% บรรจบ เซลล์ caco-2 เป็นเดี่ยวกับเอนไซม์บำบัด ( EDTA ความเข้มข้นสุดท้าย 0.005 กรัม / ลิตร ) รองลงมา คือ การเพาะเซลล์ในเซลล์เพาะเลี้ยงดี millicell แทรก 12 ( 0.4 μ M รูขุมขนขนาด 12 มม. เส้นผ่าศูนย์กลางมิลลิ Corporation , โตเกียว , MA , USA ) มีความหนาแน่นเซลล์ 1.2 × 105 เซลล์ / มิลลิลิตรและฟักไข่ 21 วัน ปริมาตรของอาหารเลี้ยงเชื้อเท่ากับ 1.40 กรัม ในด้าน basolateral และ 0.4 มล. ในด้านยอด . ต้านทานไฟฟ้า transepithelial ( เตี้ย ) ค่าตรวจทุก 2 วัน โดยใช้ระบบ ERS millicell ( มิลลิ , โตเกียว , MA , USA ) เพื่อประเมินแน่นชุมทางการซึมผ่านของ monolayers เซลล์ caco-2 .
การแปล กรุณารอสักครู่..
