Approximately 1 g fresh weight of f

Approximately 1 g fresh weight of frozen tomato tissue was ground in extraction buffer (50 mmol L-1 Hepes (pH7.5), 1 mmol L-1 EDTA, 10 mmol L-1 MgCl2, 2.5 mmol L-1 DTT, 10 mmol L-1 ascorbate) according to the method of Wang and Zhang (2000). Nought point five gram of insoluble polyvinylpolypyrrolidone (PVPP) and three times sample volume buffer were used for each extraction. Homogenates were centrifuged at 12 000×g for 20 min at 4°C and the pellets were discarded. Ammonia sulphate was gradually added to the supernatant to 80% saturation and the solution was again centrifuged at 12 000×g for 30 min at 4°C. The supernatant was discarded and the pellet was dissolved in 2-5 mL of extraction buffer, then dialyzed against a ten-fold volume of extraction buffer for 20 h. All steps were carried out at 0-4°C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ประมาณ 1 g สดน้ำหนักของมะเขือเทศแช่แข็งเนื้อเยื่อพื้นในบัฟเฟอร์สกัด (50 mmol L 1 Hepes (pH7.5), 1 mmol EDTA L 1, 10 mmol MgCl2 L 1, L 1 DTT, 2.5 mmol ascorbate L 1 mmol 10) ตามวิธีของวังและเตียว (2000) ได้ Nought จุดห้ากรัมขึ้น polyvinylpolypyrrolidone (PVPP) และ ครั้งที่สามใช้สำหรับแยกแต่ละตัวอย่างปริมาตรบัฟเฟอร์ Homogenates ถูก centrifuged ที่ 12 × 1000 กรัมสำหรับ 20 นาทีที่ 4° C และเกล็ดถูกละทิ้งไว้ แอมโมเนียมซัลเฟตได้ค่อย ๆ เพิ่ม supernatant ไปความเข้ม 80% และอีกมี centrifuged โซลูชันที่ 12 × 1000 กรัมสำหรับ 30 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส Supernatant ถูกละทิ้ง และเม็ดถูกละลายใน 2-5 mL สกัดบัฟเฟอร์ แล้ว dialyzed กับไดรฟ์ข้อมูลแบบ ten-fold แยกบัฟเฟอร์สำหรับ 20 h ขั้นตอนทั้งหมดได้ดำเนินการที่ 0-4 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ประมาณ 1 กรัมน้ำหนักสดของเนื้อเยื่อมะเขือเทศแช่แข็งเป็นพื้นดินในบัฟเฟอร์สกัด (50 มิลลิโมล L-1 HEPES (pH7.5) 1 มิลลิโมล L-1 EDTA, 10 มิลลิโมล L-1 MgCl2 2.5 มิลลิโมล L-1 DTT 10 มิลลิโมล L-1 ascorbate) ตามวิธีการของวังและเหวย (2000) จุด Nought ห้ากรัม polyvinylpolypyrrolidone ที่ไม่ละลายน้ำ (PVPP) และสามครั้งบัฟเฟอร์ปริมาณตัวอย่างที่ใช้ในการสกัดแต่ละ homogenates ถูกหมุนเหวี่ยงที่ 12 000 ×กรัมเป็นเวลา 20 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียสและเม็ดถูกโยนทิ้ง แอมโมเนียมซัลเฟตถูกบันทึกค่อยๆใสถึง 80% ความอิ่มตัวของสีและการแก้ปัญหาที่ได้รับการหมุนเหวี่ยงอีกครั้งที่ 000 × 12 กรัมเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียส สารละลายทิ้งและเม็ดที่ถูกกลืนหายไปใน 2-5 มิลลิลิตรของบัฟเฟอร์สกัด dialyzed แล้วกับปริมาณสิบเท่าของบัฟเฟอร์สกัดเป็นเวลา 20 ชั่วโมง ทุกขั้นตอนได้ดำเนินการที่ 0-4 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ประมาณ 1 กรัมต่อน้ำหนักสดของมะเขือเทศแช่แข็งเป็นเนื้อเยื่อพื้นในบัฟเฟอร์สกัด ( 50 มิลลิโมล L-1 ฮีเปส ( ph7.5 ) 1 มิลลิโมล L-1 EDTA 10 mmol L-1 MgCl2 2.5 mmol L-1 ส่วน mmol L-1 ascorbate 10 ) ตามวิธีการของวัง และจาง ( 2000 ) ศูนย์จุดห้ากรัมของ polyvinylpolypyrrolidone ไม่ละลาย ( pvpp ) และครั้งที่สามตัวอย่างปริมาณบัฟเฟอร์ที่ใช้ในการสกัดhomogenates เป็นระดับที่ 12 000 × G สำหรับ 20 นาทีที่ 4 ° C และอัตราการปฏิเสธ แอมโมเนียซัลเฟต คือค่อย ๆเพิ่มให้สูงถึง 80% และเป็นอีกครั้งที่ระดับความอิ่มตัวของโซลูชันที่ 12 000 × G สำหรับ 30 นาทีที่ 4 ° C ในน่านถูกทิ้งและเม็ดละลายใน 2-5 มิลลิลิตรของบัฟเฟอร์ที่ผ่านการสกัดแล้วกับปริมาณเท่าสิบของบัฟเฟอร์การสกัด 20 ชั่วโมงทุกขั้นตอนทดลองที่ 0-4 องศา