During the fermentation, the culture samples were withdrawn at 24
h intervals. The cultures were centrifuged at 15,000 rpm at 4°C for
15 min using a refrigerated ultracentrifuge (SORVALL RT7 PLUS).
The supernatant was used for the determination of soluble protein
and all the three main component of cellulase activities. The cell
pellet was used for the estimation of cell concentration.
The physical separation of mycelium from the OPEFB fibres for
measurement of mycelium concentration was not possible. Thus,
the chemical method based on the measurement of glucosamine
was adopted for the estimation of mycelium concentration (Khan
and Strange, 1975). This method involved the production of
chitosan from fungal chitin and liberation of glucosamine from
chitosan through a chemical reaction. Chitin is an insoluble liner
polymer of α-1, 4-linked-N-acetylglucosamine units produced by
most fungi but not found in plant tissues. Absorbance of the colour
developed from the reaction was measured with spectrophotometer
(Model Shimadzu, UV-1601 PC) at 650 nm. Glucosamine
concentration in the mycelia of A. terreus was found to be proportional
to the mycelial weight and remained constant throughout the
growth phases.
Endoglucanase or carboxymethylcellulase (CMCase) activity was
determined by measuring spectrophotometrically the reducing
sugars produced from 2% (w/v) carboxymethylcellulose, while filterpaper-hydrolysing
(FPase) activity was determined by estimating
the reducing sugars liberated from the filter paper (Wood and Bhat,
1988). Both reactions were carried out in 0.05 M sodium acetate
buffered at pH 5 and incubated at 50°C. The reaction time was 30
and 60 min for CMCase and FPase, respectively. One unit of
CMCase or FPase activity is defined as 1 µmol reducing sugar
released/ml enzyme/min. Meanwhile, β-glucosidase was determined
using the method described by Wood and Bhat (1988). In
this method, p-nitrophenol released from p-nitrophenyl-β-Dglucopyranoside
(Fluka) was measured using a spectrophotometer
ในระหว่างการหมัก วัฒนธรรมจำนวนถอนที่ 24( ช่วงเวลา วัฒนธรรม คือ ที่ระดับ 15 , 000 รอบต่อนาทีที่ 4 ° C สำหรับ15 นาทีใช้ตู้เย็น Ultracentrifuge ( sorvall rt7 Plus )ที่นำมาใช้เพื่อหาปริมาณโปรตีนที่ละลายได้ทั้งสามองค์ประกอบหลักของกิจกรรมเอนไซม์ . เซลล์อาหารเม็ดที่ใช้ประมาณเซลล์ความเข้มข้นการแยกทางกายภาพของเส้นใยจาก opefb เส้นใยสำหรับการวัดการเจริญสมาธิไม่ได้ ดังนั้นโดยวิธีทางเคมีขึ้นอยู่กับการวัดกลูใช้สำหรับการเจริญสมาธิ ( ข่านและแปลก , 1975 ) วิธีนี้เกี่ยวข้องกับการผลิตไคโตซานจากไคตินกลูโคซามีนและเชื้อราปลดปล่อยของไคโตซานที่ผ่านปฏิกิริยาทางเคมี ไคตินเป็นซับที่ไม่ละลายน้ำพอลิเมอร์ของแอลฟา 1 , 4-linked-n-acetylglucosamine หน่วยผลิตโดยส่วนใหญ่เชื้อราแต่ไม่พบในเนื้อเยื่อพืช การดูดกลืนแสงของสีพัฒนาขึ้นจากปฏิกิริยาที่ถูกวัดด้วยเครื่อง( รุ่น Shimadzu uv-1601 , PC ) ที่ 650 nm . กลูโคซามีนพบในเส้นใยของ A . terreus ที่พบว่ามีสัดส่วนกับน้ำหนักของเส้นใยและคงที่ตลอดระยะการเจริญเติบโตendoglucanase หรือ carboxymethylcellulase ( CMCase ) กิจกรรมโดยการกำหนดนี้วัดน้ำตาลที่ผลิตจาก 2 % ( w / v ) ผู้ป่วยในขณะที่ filterpaper hydrolysing( fpase ) กิจกรรมที่กำหนดโดยประมาณการลดน้ำตาลได้หลุดพ้นจากกระดาษกรอง และใช้สอน ( ไม้ ,1988 ) ทั้งปฏิกิริยาออกมาใน 0.05 M โซเดียมอะซิเตทกรดที่ pH 5 และบ่มที่อุณหภูมิ 50 องศา เวลาปฏิกิริยา คือ 3060 นาที และ fpase และ 23 ตามลำดับ หนึ่งหน่วยของfpase กิจกรรม CMCase หรือกำหนดเป็น 1 µโมล ลดน้ำตาลเปิดตัว / มิลลิลิตร / นาที โดยเอนไซม์บีตา - กลูโคซิเดส , มุ่งมั่นการใช้วิธีสอนแบบบรรยาย โดยไม้และภัต ( 1988 ) ในวิธีนี้ p-nitrophenol ออกจาก p-nitrophenyl - บีตา - dglucopyranoside( fluka ) คือการวัดโดยใช้วัสดุ
การแปล กรุณารอสักครู่..
