Rapid detection of low numbers of p

Rapid detection of low numbers of pathogens (101–102 cells mL1) in blood is necessary to detect bloodstream infection. Since the collected blood sample volumes usually range between 10 and 20mL, around 100–2000 bacterial cells are present in a whole blood sample. In the following experiments, we intend to demonstrate the feasibility of direct injection of nL-sample volumes [52] of the microbial suspensions containing clinically significant number of S. aureus cells per 1 mL, and their subsequent CZE separation and detection. First, a representative standard sample was prepared from the first five strains of S. aureus cultivated on MH agar or purified, blood-incubated cells listed in Table 1. The sample was injected into the capillary by syringe pump and separated as described in the Experimental section. The resultant electropherogram from the sample mixture composed of the MSSA and MRSA (1 107 cell mL1 each) and MSSA-B and MRSA-B (2 107 cell mL1 each) strains is presented in Fig. 2A. Only four narrow peaks were detected, i.e., the migration velocities of MSSA, MRSA, MSSA-B, and MRSA-B cells are characteristic for each group of the examined strains.
The dependence of peak areas of the examined strains on the number of injected cells is shown in Fig. 2Ai and Bi. A linear calibration was obtained for all test groups of MSSA or MRSA strains cultivated on MH agar or purified, blood-incubated staphylococci throughout the cell concentration range covered. Very good quantitative responses (coefficient of determination R2 = 0.99) were achieved. The peak areas of MSSA and MRSA (circle) or MSSA-B and MRSA-B (triangle) were not significantly different (full vs. empty circle or triangle, respectively). However, the peak areas of MSSA-B and MRSA-B were approximately twice higher than those of MSSA and MRSA, respectively. The dotted lines in Fig. 2Ai show the numbers of cells injected into the capillary by the syringe pump: 5 103 cells of MSSA and MRSA and 104 cells of MSSA-B and MRSA-B. The number of injected cells approximately corresponds to the peak areas in the electropherogram presented in Fig. 2A. We performed repetitive 100-nL injections of different microbial suspensions mentioned above by the syringe pump. RSDs of the migration time for all tested strains were below 1.8% whereas the peak area RSDs were within 5%.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ตรวจสอบอย่างรวดเร็วของจำนวนโรค (101 – 102 เซลล์ mL 1) ในเลือดต่ำจำเป็นต้องตรวจหาการติดเชื้อในกระแสเลือด เนื่องจากปริมาณตัวอย่างเลือดที่เก็บปกติช่วงระหว่าง 10 และ 20 มล. รอบ 100 – 2000 แบคทีเรียเซลล์มีอยู่ในตัวอย่างเลือดทั้งหมด ในการทดลองต่อไปนี้ เราต้องแสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ของการฉีดโดยตรงของ nL-ตัวอย่างจำนวนมาก [52] บริการจุลินทรีย์ที่ประกอบด้วยจำนวนเซลล์หมอเทศข้างลาย S. ต่อ 1 mL และต่อมาแยก CZE และตรวจสอบอย่างมีนัยสำคัญทางคลินิก ครั้งแรก มีเตรียมตัวอย่างมาตรฐานพนักงานจากสายพันธุ์แรกห้าของหมอเทศข้างลาย S. cultivated ใน MH agar หรือบริสุทธิ์ incubated เลือดเซลล์แสดงในตารางที่ 1 ตัวอย่างถูกฉีดเข้าไปในหลอดเลือดฝอยที่ โดยปั๊มเข็ม และแยกตามที่อธิบายไว้ในส่วนทดลอง Electropherogram ผลแก่จากส่วนผสมตัวอย่างประกอบด้วย MSSA MRSA (มล 1 107 เซลล์ละ 1) และ MSSA B และสายพันธุ์ MRSA-B (มล 2 107 เซลล์ละ 1) นำเสนอใน Fig. 2A พีคส์เฉพาะสี่แคบพบ เช่น ตะกอนโยกย้าย MSSA, MRSA, MSSA B และ MRSA-บีเซลล์เป็นลักษณะเฉพาะสำหรับแต่ละกลุ่มของสายพันธุ์กล่าวถึงการการพึ่งพาของพื้นที่สูงสุดของสายพันธุ์กล่าวถึงจำนวนเซลล์ดังจะแสดงใน Fig. 2Ai และ Bi เทียบเชิงกล่าวสำหรับกลุ่มของ MSSA หรือ MRSA สายพันธุ์ cultivated ใน MH agar หรือ บริสุทธิ์ ทดสอบทั้งหมดครอบคลุม staphylococci incubated เลือดตลอดช่วงความเข้มข้นของเซลล์ คำตอบเชิงปริมาณมาก (สัมประสิทธิ์ของการกำหนด R2 = 0.99) สำเร็จ พื้นที่สูงสุด MSSA MRSA (วงกลม) หรือ MSSA B และ MRSA-B (สามเหลี่ยม) ไม่แตกต่างกันอย่างมีนัยสำคัญ (เต็มรูปแบบเทียบกับว่างวงกลมหรือสามเหลี่ยม ตามลำดับ) อย่างไรก็ตาม พื้นที่สูงสุดของ MSSA-บีแอนด์บี MRSA ได้ประมาณสองสูงกว่าบรรดา MSSA และ MRSA ตามลำดับ จำนวนเซลล์ที่ฉีดเข้าไปในหลอดเลือดฝอยที่ โดยปั๊มเข็มแสดงเส้นประสีใน Fig. 2Ai: 5 103 เซลล์ MSSA MRSA และเซลล์ MSSA B และ MRSA b 104 จำนวนเซลล์ที่ฉีดประมาณสอดคล้องกับพื้นที่สูงสุดใน electropherogram ใน Fig. 2A เราทำซ้ำ 100-nL ฉีดของบริการจุลินทรีย์ต่าง ๆ ดังกล่าวข้างต้น โดยปั๊มเข็ม RSDs เวลาโยกย้ายสำหรับสายพันธุ์ที่ผ่านการทดสอบทั้งหมดช้ากว่า 1.8% ในขณะที่ตั้งสูงสุด RSDs ได้ภายใน 5%

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ตรวจสอบอย่างรวดเร็วของตัวเลขต่ำของเชื้อโรค (101-102 มิลลิลิตรเซลล์? 1) ในเลือดเป็นสิ่งที่จำเป็นในการตรวจสอบการติดเชื้อในกระแสเลือด เนื่องจากปริมาณตัวอย่างเลือดที่เก็บรวบรวมโดยปกติในช่วงระหว่างวันที่ 10 และ 20 มลประมาณ 100-2,000 เซลล์แบคทีเรียที่มีอยู่ในตัวอย่างเลือด ในการทดลองต่อไปนี้เราตั้งใจที่จะแสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ของการฉีดโดยตรงของปริมาณ NL-ตัวอย่าง [52] ของสารแขวนลอยเชื้อจุลินทรีย์ที่มีความสำคัญทางคลินิกของเซลล์เชื้อ S. aureus ต่อ 1 มิลลิลิตรและแยก CZE ที่ตามมาของพวกเขาและการตรวจสอบ ครั้งแรกที่กลุ่มตัวอย่างที่เป็นตัวแทนมาตรฐานได้รับการจัดทำขึ้นจากครั้งแรกห้าสายพันธุ์ของเชื้อ S. aureus ที่ปลูกบนวุ้น MH หรือบริสุทธิ์เซลล์เม็ดเลือดบ่มระบุไว้ในตารางที่ 1 ตัวอย่างที่ได้รับการฉีดเข้าไปในเส้นเลือดฝอยโดยปั๊มหลอดฉีดยาและแยกที่อธิบายไว้ในการทดลอง ส่วน electropherogram ผลลัพธ์จากส่วนผสมตัวอย่างประกอบด้วย MSSA และ MRSA (1 เซลล์ 107 มิลลิลิตร 1) และ MSSA-B และเชื้อ MRSA-B (2 107 มิลลิลิตรเซลล์? ละ 1) สายพันธุ์ที่จะนำเสนอในรูป 2A เพียงสี่ยอดแคบตรวจพบคือความเร็วการย้ายถิ่นของ MSSA, เชื้อ MRSA, MSSA-B และเซลล์เชื้อ MRSA-B เป็นลักษณะเฉพาะสำหรับกลุ่มของสายพันธุ์ที่ตรวจสอบแต่ละ.
พึ่งพาอาศัยกันของพื้นที่จุดสูงสุดของสายพันธุ์ที่ตรวจสอบกับจำนวนของการฉีด เซลล์จะแสดงในรูปที่ 2Ai และ Bi การสอบเทียบเชิงเส้นที่ได้รับสำหรับทุกกลุ่มการทดสอบของ MSSA หรือสายพันธุ์เชื้อ MRSA ที่ปลูกบนวุ้น MH หรือบริสุทธิ์เชื้อเลือดบ่มตลอดช่วงความเข้มข้นของเซลล์ที่ครอบคลุม การตอบสนองเชิงปริมาณดีมาก (ค่าสัมประสิทธิ์การตัดสินใจ R2 = 0.99) กำลังประสบความสำเร็จ พื้นที่จุดสูงสุดของ MSSA และ MRSA (วงกลม) หรือ MSSA-B และเชื้อ MRSA-B (สามเหลี่ยม) ไม่แตกต่างกัน (เต็มกับวงกลมว่างหรือสามเหลี่ยมตามลำดับ) อย่างไรก็ตามพื้นที่จุดสูงสุดของ MSSA-B และเชื้อ MRSA-B ประมาณสองเท่าสูงกว่า MSSA และ MRSA ตามลำดับ เส้นประในรูป 2Ai แสดงตัวเลขของเซลล์ที่ฉีดเข้าไปในเส้นเลือดฝอยโดยปั๊มหลอดฉีดยา: 5 103 เซลล์ของ MSSA และ MRSA และ 104 เซลล์ของ MSSA-B และเชื้อ MRSA-B จำนวนของเซลล์ที่ฉีดประมาณสอดคล้องกับพื้นที่สูงสุดใน electropherogram ที่นำเสนอในรูป 2A เราดำเนินการซ้ำการฉีด 100 nL ของจุลินทรีย์แขวนลอยที่แตกต่างกันดังกล่าวข้างต้นโดยปั๊มหลอดฉีดยา RSDs ของเวลาการย้ายถิ่นสำหรับสายพันธุ์ที่ผ่านการทดสอบทุกด้านล่าง 1.8% ในขณะที่ยอด RSDs พื้นที่ได้ภายใน 5%

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การตรวจหาเชื้อโรคที่ตัวเลขต่ำอย่างรวดเร็ว ( 101 – 102 เซลล์  1 มิลลิลิตร ) ในเลือดเป็นสิ่งที่จำเป็นเพื่อตรวจสอบการติดเชื้อในกระแสเลือด ตั้งแต่ช่วงการเก็บตัวอย่างเลือด ปริมาณ มักจะอยู่ระหว่าง 10 และหลอด ประมาณ 100 – 2000 เซลล์แบคทีเรียที่มีอยู่ในตัวอย่างเลือดทั้งหมด ในการทดลองต่อไปนี้เราตั้งใจที่จะแสดงให้เห็นถึงความเป็นไปได้ในการฉีดโดยตรงมั้ยครับ [ 52 ] ตัวอย่าง ปริมาณของจุลินทรีย์แขวนลอยที่มีอาการอย่างมีนัยสำคัญจำนวนของ S . aureus เซลล์ต่อ 1 มิลลิลิตร และการแยกของ CYP ตามมาและการตรวจสอบ แรก , ตัวอย่างมาตรฐานตัวแทนเตรียมจาก 5 สายพันธุ์แรกของ S . aureus บนอาหารวุ้น MH หรือบริสุทธิ์เลือดเลี้ยงเซลล์ที่ระบุไว้ในตารางที่ 1 ตัวอย่างที่ถูกฉีดเข้าไปในเส้นเลือดฝอย โดยปั๊มเข็มฉีดยาและแยกตามที่อธิบายไว้ในส่วนของการทดลอง เล็กโทรฟีโรแกรมที่เป็นผลจากตัวอย่างส่วนผสมประกอบด้วย mssa และเชื้อ MRSA ( เซลล์ 1 107 ml  คนละ 1 ) และ ( 2 mssa-b mrsa-b เซลล์ 107 ml  คนละ 1 ) สายพันธุ์ที่แสดงในรูปที่ 2A เพียงสี่แคบ ยอดที่ถูกตรวจพบ ได้แก่การย้ายถิ่นของความเร็ว mssa MRSA , mssa-b และ mrsa-b เซลล์มีลักษณะของแต่ละกลุ่มในการตรวจสอบสายพันธุ์
พึ่งพาของยอดพื้นที่ของการตรวจสอบสายพันธุ์ จำนวนการฉีดเซลล์จะแสดงในรูปที่ 2ai และบี การสอบเทียบเชิงเส้นได้ทุกกลุ่มทดสอบ mssa หรือ MRSA สายพันธุ์บนอาหารวุ้น MH หรือบริสุทธิ์เลือดและเซลล์ของเชื้อตลอดช่วงที่ครอบคลุม ที่ดีมากปริมาณการตอบสนอง ( ค่าสัมประสิทธิ์การตัดสินใจ R2 = 0.99 ) มีความ จุดสูงสุดของพื้นที่และ mssa MRSA ( วงกลม ) หรือ mssa-b และ mrsa-b ( สามเหลี่ยม ) ไม่มีความแตกต่างกันทางสถิติ ( เต็มและว่างเปล่า วงกลม หรือ สามเหลี่ยม ตามลำดับ ) อย่างไรก็ตามจุดสูงสุดของพื้นที่ mssa-b mrsa-b ประมาณสองเท่า และสูงกว่า mssa และ 1 ตามลำดับ เส้นประในรูปที่ 2ai แสดงจำนวนเซลล์ที่ฉีดเข้าไปในเส้นเลือดฝอย โดยเครื่องฉีดยา : 5 103 และ 104 และเซลล์ของ mssa MRSA และเซลล์ของ mssa-b mrsa-b. จำนวนการฉีดเซลล์ประมาณสอดคล้องกับจุดสูงสุดในพื้นที่เล็กโทรฟีโรแกรมนำเสนอในรูปที่ 2A .เราดำเนินการซ้ำ 100 n1 ฉีดจุลินทรีย์แขวนลอยต่างๆที่กล่าวถึงข้างต้น โดยเครื่องฉีดยา เทคโนโลยีของเวลาการโยกย้ายสำหรับการทดสอบทั้งหมดสายพันธุ์ต่ำกว่า 1.8% ในขณะที่พื้นที่สูงสุดเทคโนโลยีได้ภายใน 5 %