Antimicrobial assayThree bacterial

Antimicrobial assay
Three bacterial strains of P. larvae were isolated from
the honeycombs of hives undergoing clinical symptoms
of American Foulbrood. These hives were located in
Mechongué, Cobo and Chapadmalal cities in Buenos
Aires province. Isolation and strains identification were
made according standard biochemical tests (Alippi,
1992). The pure strains were maintained on MYPGP
agar with 15% v/v glycerol until used.
Vegetative cells of P. larvae were grown on MYPGP
agar for 48 h at 35 ± 0.5 °C, and then suspended in double
distilled sterile water. To measure antimicrobial activity
with serial dilution method, the concentration was
adjusted to 0.5 of Mac Farland scale, and to 1 of Mac
Farland scale when applying the bioautography method.
The minimal inhibitory concentration (MIC) was directly
assessed by turbidity observation. Essential oil
was emulsified with 8% v/v propylene glycol (1-2 propanediol).
One millilitre of each stock solution was added
to MYT (Mueller-Hinton, yeast extract and thiamine)
broth [2.0 g/l extract meat; 17.5 g/l hydrolyzed
casein, 1.5 g/l starch, 1.5 % yeast extract and 0.1 mg/l
thiamine (autoclaved separately)] and serially diluted
(final range 12,5-2000 μg/ml). Microbial biomass suspension
was then added to each serial dilution tube with
agitation, at room temperature, using a Vortex dispersing
tool (Fbr® by Decalab SRL). All sample tubes (as
well as positive and negative controls) were incubated at
35 ± 0.5 ºC for 48 h in order to determine MIC values
under microaerobic conditions (5-10% of CO2).
Minimal bactericide concentration (MBC) was specified.
To that end, known volumes were transferred from
MIC negative tubes to MYPGP solid agar (Dingman
and Stahly, 1983), and incubated at 35 ± 0.5 ºC under
microaerobic conditions for 48 h in order to delimit
MBC values. The antimicrobial activities were determined
by quintupled analyses for oil and strains.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิเคราะห์จุลินทรีย์สายพันธุ์แบคทีเรียที่สามของตัวอ่อน P. ถูกแยกต่างหากจากhoneycombs ของลมพิษตามอาการทางคลินิกของ Foulbrood อเมริกัน กลุ่มเหล่านี้มีอยู่ในเมือง Mechongué นิทรรศการ และ Chapadmalal ในบัวโนสไอเรสจ.โนสไอเรส การแยกและระบุสายพันธุ์ได้ทำตามมาตรฐานทดสอบชีวเคมี (Alippi1992) สายพันธุ์บริสุทธิ์ที่อยู่ใน MYPGPagar กับ 15% v/v กลีเซอรจนใช้มีปลูกผักเรื้อรังเซลล์ของตัวอ่อน P. ใน MYPGPagar สำหรับ h 48 ที่ 35 ± 0.5 ° C และหยุดชั่วคราวในห้องกลั่นน้ำฆ่าเชื้อ การวัดกิจกรรมจุลินทรีย์ด้วยวิธีการเจือจางประจำ มีความเข้มข้นปรับปรุงของ Mac Farland ขนาด 0.5 และ 1 ของ Macมาตราส่วน Farland เมื่อใช้เมธอด bioautographyความเข้มข้นลิปกลอสไขต่ำสุด (MIC) ได้โดยตรงประเมิน โดยการสังเกตความขุ่นของน้ำ น้ำมันหอมระเหยถูก emulsified กับ 8% v/v รพิ glycol (propanediol 1-2)เพิ่ม millilitre หนึ่งของแต่ละหุ้นกับ MYT (Mueller Hinton สารสกัดจากยีสต์ และไทอามีน)ซุป [2.0 g/l สารสกัดจากเนื้อ hydrolyzed 17.5 g/lเคซีน แป้ง 1.5 g/l สารสกัดจากยีสต์ 1.5% และ 0.1 mg/lไทอามีน (autoclaved ต่างหาก)] และแตกออก serially(ช่วงสุดท้าย 12,5 2000 μg/ml) ชีวมวลจุลินทรีย์ระงับถูกเพิ่มเข้าไปแต่ละหลอดอนุกรมเจือจางด้วยอาการกังวลต่อ อุณหภูมิห้อง ใช้ Vortex สลายเครื่องมือ (Fbr ® โดย Decalab SRL) ท่อตัวอย่างทั้งหมด (เป็นรวมทั้งควบคุมบวก และลบ) ที่ incubated ที่35 ± 0.5 ºC สำหรับ 48 h เพื่อกำหนดค่า MICภายใต้เงื่อนไข microaerobic (5-10% ของ CO2)ระบุความเข้มข้นน้อย bactericide (ช่อง MBC)เมื่อตอน ไดรฟ์ข้อมูลรู้จักถูกโอนย้ายจากหลอดลบ MIC เพื่อ MYPGP แข็ง agar (Dingmanและ Stahly, 1983), และ incubated ที่ 35 ± 0.5 ºC ภายใต้เงื่อนไข microaerobic h 48 เพื่อกำหนดเขตค่าช่อง MBC กิจกรรมจุลินทรีย์ถูกกำหนดโดยวิเคราะห์ quintupled สำหรับน้ำมันและสายพันธุ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทดสอบยาต้านจุลชีพ
สามสายพันธุ์ของแบคทีเรีย P. ตัวอ่อนที่แยกได้จาก
honeycombs ของลมพิษได้รับอาการทางคลินิก
อเมริกัน Foulbrood ลมพิษเหล่านี้ตั้งอยู่ใน
Mechongué, Cobo และ Chapadmalal เมืองใน Buenos
Aires จังหวัด การแยกและการระบุสายพันธุ์ได้รับการ
ทำตามมาตรฐานการทดสอบทางชีวเคมี (Alippi,
1992) สายพันธุ์ที่บริสุทธิ์ถูกเก็บรักษาไว้ใน MYPGP
วุ้นกับกลีเซอรอล 15% v / v จนใช้
เซลล์พืชของพีตัวอ่อนได้รับการปลูกใน MYPGP
อาหารเลี้ยงเชื้อเป็นเวลา 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 35 ± 0.5 ° C และจากนั้นลอยอยู่ในคู่
น้ำกลั่นปลอดเชื้อ การวัดฤทธิ์ต้านจุลชีพ
ด้วยวิธีเจือจางอนุกรมเข้มข้นได้รับการ
ปรับให้ 0.5 จากขนาด Mac Farland และถึง 1 จาก Mac
ขนาด Farland เมื่อใช้วิธีการ bioautography
ที่ขัดขวางความเข้มข้นน้อยที่สุด (MIC) ได้โดยตรง
การประเมินโดยการสังเกตความขุ่น น้ำมันหอมระเหย
เป็น emulsified กับ 8% คอล v / v โพรพิลีน (1-2 โพรเพน)
หนึ่งมิลลิลิตรของการแก้ปัญหาแต่ละหุ้นถูกเพิ่มเข้ามา
เพื่อ MYT (Mueller-ฮินตัน, สารสกัดจากยีสต์และวิตามินบี)
น้ำซุป [2.0 g / l สารสกัดจากเนื้อ; 17.5 กรัม / ลิตรไฮโดรไลซ์
เคซีน 1.5 กรัมแป้ง / ลิตร, 1.5% สารสกัดจากยีสต์และ 0.1 mg / l
วิตามินบี (อบไอน้ำแยกต่างหาก)] และปรับลดลำดับ
(ช่วงสุดท้าย 12,5-2000 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) ระงับปริมาณจุลินทรีย์ที่
ถูกเพิ่มเข้ามาจากนั้นก็จะเจือจางหลอดแต่ละอนุกรมกับ
กวนที่อุณหภูมิห้องโดยใช้ Vortex กระจาย
เครื่องมือ (Fbr®โดย Decalab SRL) ทุกหลอดตัวอย่าง (เช่น
เดียวกับการควบคุมการบวกและลบ) ได้รับการบ่มที่อุณหภูมิ
35 ± 0.5 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมงเพื่อที่จะกำหนดค่า MIC
ภายใต้เงื่อนไขที่เซลล์มี (5-10% ของ CO2)
ความเข้มข้น bactericide น้อยที่สุด (MBC) ระบุ
ในการ ท้ายเล่มที่รู้จักกันถูกย้ายจากที่
MIC หลอดลบ MYPGP วุ้นแข็ง (Dingman
และ Stahly, 1983) และบ่มที่อุณหภูมิ 35 ± 0.5 องศาเซลเซียสภายใต้
เงื่อนไขที่เซลล์มีเวลา 48 ชั่วโมงเพื่อคั่น
ค่า MBC กิจกรรมต้านจุลชีพถูกกำหนด
โดยการวิเคราะห์ quintupled สำหรับน้ำมันและสายพันธุ์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ยาต้านจุลชีพในแบคทีเรีย P .
3 สายพันธุ์ที่แยกได้จาก ~ i )
,
honeycombs ลมพิษอาการทางคลินิกของอเมริกันฟาวล์บรูด . กลุ่มเหล่านี้อยู่ใน mechongu )
, chapadmalal โคโบและเมืองใน Buenos Aires
) การแยกและจำแนกสายพันธุ์ตามมาตรฐานการทดสอบทางชีวเคมี (
( alippi
, 1992 ) สายพันธุ์บริสุทธิ์ ถูกเก็บรักษาไว้ใน mypgp
วุ้นกับ 15 เปอร์เซ็นต์โดยปริมาตรโตจนใช้ เซลล์เจริญเติบโตของ P . ~ i )

อาหารที่ปลูกใน mypgp 48 ชั่วโมง 35 ± 0.5 ° C และแขวนลอยในคู่
น้ำกลั่นปราศจากเชื้อ วัด
ฤทธิ์ต้านจุลชีพด้วยวิธี dilution อนุกรม , ความเข้มข้น 0.5
ปรับขนาดฟาร์เลิน Mac , และ 1 ขนาดฟาร์เลิน Mac

bioautography เมื่อใช้วิธีการความเข้มข้นของสารน้อย ( MIC ) โดยตรง
ประเมินโดยการสังเกตความขุ่น
น้ำมันหอมระเหยคือที่มี 8 % v / v โพรไพลีนไกลคอล ( 1-2 propanediol )
1 มิลลิลิตรของสารละลายแต่ละหุ้นเพิ่ม
เพื่อ MYS ( มุลเลอร์ ฮินตัน , ยีสต์และสารสกัดจากวิตามินบี )
[ 2.0 กรัมต่อลิตรน้ำสกัดเนื้อ ; 17.5 กรัม / ลิตร
เคซีนไฮโดร 1.5 กรัม / ลิตร สำหรับแป้ง % ยีสต์สกัด 0.1 mg / l
วิตามินบี ( สังเคราะห์แยก ) ] และเป็นเจือจาง
สุดท้าย ( ช่วง 12,5-2000 μ g / ml ) มวลชีวภาพจุลินทรีย์แขวนลอย
จากนั้นเพิ่มแต่ละอุทิศถวายหลอด
การกวนที่อุณหภูมิห้องใช้ Vortex กระจาย
เครื่องมือ ( FBR ®โดย decalab เป็นต้น ) หลอดตัวอย่างทั้งหมด (
ดีเป็นตัวควบคุมบวกและลบ ) อุณหภูมิ
3 ± 0.5 ºองศาเซลเซียสเป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อหาค่า
ไมค์ภายใต้เงื่อนไข microaerobic ( 5-10% ของ CO2 )
bactericide ความเข้มข้นน้อยที่สุด ( MBC ) ที่ระบุ
ไปสิ้นสุดที่ ไดรฟ์จักถูกย้ายจากหลอดลบไมค์เพื่อ mypgp
แข็ง ( และดิ่งเมิ่น
stahly , 1983 ) และบ่มที่อุณหภูมิ 35 องศาเซลเซียส ภายใต้เงื่อนไข± 0.5 º
microaerobic 48 ชั่วโมงเพื่อ การจำกัดจำนวน
MBC ค่า กิจกรรมการยับยั้งคำนวณ
โดย quintupled วิเคราะห์น้ำมันและสายพันธุ์