High prevalence of large trematode

High prevalence of large trematode eggs in schoolchildren in Cambodia
a b s t r a c t
Large trematode eggs(LTE)resembling Fasciola spp. eggs were reportedly found in the stools of schoolchildren in Kandal province, Cambodia. This study aimed to assess the prevalence of LTE in the stools of children attending the affected school, identify potential risk factors for infection and ascertain the trematode species. We performed a cross-sectional study involving an in-depth questionnaire admin- istered to schoolchildren at the affected school, and examined cattle droppings in the surrounding area and the livers of slaughtered cattle. Three stool samples were examined per child, using Kato–Katz and formalin–ether concentration techniques .In addition, blood serum enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and coprological polymerase chain reaction(PCR) was conducted for species clarification.Cattle droppings were examined by cup sedimentation and coprological ELISA. LTE were observed in the stools of 106 schoolchildren(46.5%).Two blood serum samples from schoolchildren were positive for Fasciola hepatica in afirst ELISA but were negative in a confirmation immunofluorescence antibody test.Out of 221 PCR samples, only one tested positive for Fasciola spp. and none for Fasciolopsis buski. The consumption of raw aquatic plants (oddsratio(OR)=3.3) and fermented fish sauce(OR=2.1) were significantly associ-ated with LTE in the stool. Fasciola spp. flukes were observed in 18.3% of 191 cattle livers. The prevalence of fascioliasis in cattle droppings was 88.8%.The low prevalence of schoolchildren that tested positive for Fasciola spp. with specific molecular diagnostics and who had no diagnostic evidence of F. buski strongly indicates that the majority of microscopically observed LTE are from Echinostoma spp. Fasciola spp. transmission from cattle to human is possible and public health services need to be alerted accordingly.
1. Introduction
In low-and middle-income countries, intestinal multipara-sitism is the rule rather than the exception(McKenzie, 2005; Petney and Andrews,1998;Steinmannetal.,2010). In South-
east Asia, intestinal helminth and protozoa multiparasitism is well known and has been documented(Lee etal.,2002;Parketal.,2004;Sayasoneetal.,2011,2009;Sinuonetal.,2003;Schäretal.,
2014). Several endemic species of food-borne trematodes (FBT) have been identified, such as liver flukes(Opisthorchis viverrini and Fasciola spp.) and intestinal flukes(Fasciolopsis buski and Echinos- toma spp.) (Hien etal.,2001;KeiserandUtzinger,2005;Quang etal.,2008;Sayasoneetal.,2011;Sohnetal.,2011a,b). Helminthic multiparasitism poses a serious challenge for parasitological diag-nosis, as eggs from different species may morphologically resemble one another. For example, the size, oval shape and presence of small and inconspicuous operculum of Fasciola spp. Eggs are indis-tinguishable from F. buski and some Echinostoma spp. eggs.The average egg size of all three parasite egenera is similar in terms
of length and width: Fasciola hepatica 106.5–171.5/63.9–95.4m, Fasciola gigantica 150.9–182.2/85.1–106.2m (Valero etal.,2009), Echinostoma revolutum 97–117/61–65m (Sohn etal.,2011a); Echinostoma ilocanum 89–99/52–58m (Sohn etal.,2011b) and
F. buski 130-140/80-85m (Garcia andBruckner,1988). They canbe characterized as Fasciola-like eggs or large trematode eggs(LTE). In 2009,LTE were observed in the stools of 27/150 schoolchil-
dren (18.0%) in the Damrei Chhlang village primary school, Kandal province, Cambodia, during a standard parasiteological survey using
the Kato–Katz technique(Khieu etal.,2013). Given the high preva-lence of Fasciola spp. Infection among cattle in southern Cambodia
(Tum etal.,2007), LTE could have been attributable to Fasciola spp. infections. However, other trematode species could also have been responsible. The aim of this study was to assess the prevalence of LTE in the stools of schoolchildren, identify risk factors for infection and ascertain the trematode species, all with a focus on Fasciola spp. We performed across-sectional study among the schoolchildren,examined cattle droppings in and around Damrei Chhlang village and inspected cattle livers in a local slaughterhouse.
2. Materials and methods
2.1. Ethical considerations
Ethical clearance for this study was obtained from the Ethics
Commission of Basel-Stadtand Basel-Land, Switzerland(EKBB;
reference no.159/11) and from the National Ethics Commit-tee for Health Research(NECHR), Ministry of Health(MOH)in
Phnom Penh, Cambodia(referenceno.30/NECHR). Before field work started, the provincial and district health authorities, village and school authorities and parents were informed of the study and, in turn, working permission was granted. Prior to enrolling each participant, written informed consent was obtained from the par-ents, legal guardian or the participant him/herself if they were of legal age. In cases of illiteracy, the informed consent was signed by fingerprint before the village chief, who signed as a witness.
2.2.Study design, population and area
The study was carried out in Central Kandal province, which surrounds the capital Phnom Penh. It is in habited by 1.2 mil- lion people and divided into 11 districts. Between May and June 2011, across-sectional study was carried out among schoolchil- dren at the Damrei Chhlang village primary school, S’ang district (11◦21_29.43__ N, 104◦59_18.05__ E), a district of 1831 people. Another cross-sectional study aimed to estimate the prevalence of Fasciola spp. Eggs in cattle droppings in the villages surrounding the Damrei Chhlang primary school(S’ang district). The sevil- lages included Damrei Chhlang and Preaek Khmer(11◦21_21.70__ N, 104◦58_59.33__ E), both located in S’ang Phnom commune; and Preaek Run(11◦21_16.30__ N, 104◦59_46.54__ E), located in Preaek Koy commune. Additionally, an abattoir study of a small facility that is slaughtering local cattle was conducted in Preaek Koy commune.
2.3. Procedures in the field
On day 1,enrolled study participants assembled at the commu- nity hall next to the school. A trained interviewer questioned each child about potential risk factors for infection and about experi- ences of ill-health. Subsequently, a physician assessed participants’ general health status and clinical symptoms by using a standard- ized assessment form. Additionally, a nurse drew a venous blood sample of 5 ml from each child. The blood samples were stored in a cooling box at about 5–10 ◦C until they reached the laboratory of the National Center for Parasitology, Entomology and Malaria Control (CNM), Ministry of Health in Phnom Penh.
A pre-labeled stool container was given to each child, along with instructions on how to fill it. Children were asked to collect morn- ing stools to ensure freshness of the stool samples. The following morning, the filled container was collected and a new pre-labeled container was provided. Three stool samples were collected from each child over 4 consecutive days. Each day after collection, con- tainers were directly transported to the laboratory of the CNM for analysis.
The stool containers for cattle droppings were distributed among randomly selected cattle owners, each of whom collected one fresh stool sample from every one of their cattle. Contain- ers were collected In the morning, the day after distribution, and directly transported to the laboratory of the CNM.
The butcher at the study abattoir examined the livers of slaugh- tered cattle on a continuous basis for meat quality assurance. For study purposes, he recorded in a diary the total number of slaugh- tered cattle and of Fasciola spp. Infected livers.
2.4. Laboratory procedures
For each of the three stool samples per child, one Kato–Katz thick smear (Katz etal.,1972) was prepared directly after the samples arrived in the laboratory. After a half an hour clearance time, the smears were examined under a light microscope (magnification 400×) for intestinal helminth eggs. The number of eggs per parasite species was counted and recorded.
From each of the three stool samples per child, approximately1 g was preserved in 15 ml sodium acetate–acetic acid–formalin (SAF) fixative for analysis by formalin–ether concentration tech-nique (FECT)(Marti andEscher,1990). Four weeks after collection, the fixed samples were processed and examined under a light
microscope (magnification1000×) for intestinal helminthes and protozoa.
From the first stool sample per child, approximately 0.5 g of fresh stool was preserved in 70% ethanol for later molecular analy-sis using real-time quantitative polymerase chain reaction(PCR) to diagnose Fasciola spp. (Alasaad etal.,2011) and F. buski infections (unpublished, developed by Dr. med. Stefanie Kramme, Swiss TPH).The preserved samples were sent to the Swiss TPH laboratory in
Basel, Switzerland, where molecular analysis was carried-out about 2 months later. First, from each preserved stool sample,200_g was
washed twice with phosphate buffered saline(PBS)to eliminate the ethanol. Subsequently, DNA was extracted with the QIAamp DNA Stool Mini Kit(QIAGEN,USA).The extracted DNA was frozen at−20 _C until PCR was performed,1week later. On 0.5 g of the first stool samples from each child, a commercially available F. hepatica coproantigen enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)(Bio-X, Belgium) was performed at the CNM laboratory.
Upon arrival, blood samples were stored at room tempera-ture to clot. Subsequently, the blood samples were centrifuged and the serum was frozen and stored at −20 _C at the CNM laboratory. The frozen samples were sent to the Diagnostic Center of the Swiss TPH, Switzerland, where an ELISA for F. hepatica-antibodies was performed 2 months after sample col-lection. Sera samples with a positive result were retested with an immunofluorescence antibody test(IFAT)for confirmation. All sera samples with a positive or critical(close to posit

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ส่วนสูงไข่ใหญ่ trematode ใน schoolchildren ในประเทศกัมพูชาแบบ b s t r c tLarge trematode eggs(LTE)resembling Fasciola spp. eggs were reportedly found in the stools of schoolchildren in Kandal province, Cambodia. This study aimed to assess the prevalence of LTE in the stools of children attending the affected school, identify potential risk factors for infection and ascertain the trematode species. We performed a cross-sectional study involving an in-depth questionnaire admin- istered to schoolchildren at the affected school, and examined cattle droppings in the surrounding area and the livers of slaughtered cattle. Three stool samples were examined per child, using Kato–Katz and formalin–ether concentration techniques .In addition, blood serum enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and coprological polymerase chain reaction(PCR) was conducted for species clarification.Cattle droppings were examined by cup sedimentation and coprological ELISA. LTE were observed in the stools of 106 schoolchildren(46.5%).Two blood serum samples from schoolchildren were positive for Fasciola hepatica in afirst ELISA but were negative in a confirmation immunofluorescence antibody test.Out of 221 PCR samples, only one tested positive for Fasciola spp. and none for Fasciolopsis buski. The consumption of raw aquatic plants (oddsratio(OR)=3.3) and fermented fish sauce(OR=2.1) were significantly associ-ated with LTE in the stool. Fasciola spp. flukes were observed in 18.3% of 191 cattle livers. The prevalence of fascioliasis in cattle droppings was 88.8%.The low prevalence of schoolchildren that tested positive for Fasciola spp. with specific molecular diagnostics and who had no diagnostic evidence of F. buski strongly indicates that the majority of microscopically observed LTE are from Echinostoma spp. Fasciola spp. transmission from cattle to human is possible and public health services need to be alerted accordingly.1. IntroductionIn low-and middle-income countries, intestinal multipara-sitism is the rule rather than the exception(McKenzie, 2005; Petney and Andrews,1998;Steinmannetal.,2010). In South-east Asia, intestinal helminth and protozoa multiparasitism is well known and has been documented(Lee etal.,2002;Parketal.,2004;Sayasoneetal.,2011,2009;Sinuonetal.,2003;Schäretal.,2014). Several endemic species of food-borne trematodes (FBT) have been identified, such as liver flukes(Opisthorchis viverrini and Fasciola spp.) and intestinal flukes(Fasciolopsis buski and Echinos- toma spp.) (Hien etal.,2001;KeiserandUtzinger,2005;Quang etal.,2008;Sayasoneetal.,2011;Sohnetal.,2011a,b). Helminthic multiparasitism poses a serious challenge for parasitological diag-nosis, as eggs from different species may morphologically resemble one another. For example, the size, oval shape and presence of small and inconspicuous operculum of Fasciola spp. Eggs are indis-tinguishable from F. buski and some Echinostoma spp. eggs.The average egg size of all three parasite egenera is similar in termsof length and width: Fasciola hepatica 106.5–171.5/63.9–95.4m, Fasciola gigantica 150.9–182.2/85.1–106.2m (Valero etal.,2009), Echinostoma revolutum 97–117/61–65m (Sohn etal.,2011a); Echinostoma ilocanum 89–99/52–58m (Sohn etal.,2011b) andF. buski 130-140/80-85m (Garcia andBruckner,1988). They canbe characterized as Fasciola-like eggs or large trematode eggs(LTE). In 2009,LTE were observed in the stools of 27/150 schoolchil-dren (18.0%) ในการ Damrei Chhlang หมู่บ้านโรงเรียน กันดาล กัมพูชา ในระหว่างการสำรวจมาตรฐาน parasiteological โดยใช้เทคนิคนายกาโต – ทซ (Khieu etal., 2013) รับ preva-lence สูงของโอ Fasciola ติดเชื้อระหว่างวัวในประเทศกัมพูชา(ตูม etal., 2007), LTE มีรวม Fasciola โอติดเชื้อได้ อย่างไรก็ตาม สปีชีส์อื่น ๆ trematode สามารถยังได้รับผิดชอบ จุดมุ่งหมายของการศึกษานี้เป็นการ ประเมินความชุกของ LTE ในอุจจาระของ schoolchildren ระบุปัจจัยเสี่ยงต่อการติดเชื้อ และตรวจชนิด trematode ความ Fasciola โอทั้งหมด เราทำการศึกษาในขนาดระหว่าง schoolchildren มูลวัวที่กล่าวถึงใน และ รอบ ๆ หมู่บ้าน Damrei Chhlang และปศุสัตว์ตรวจสอบ livers ในบิดาท้องถิ่น2. วัสดุและวิธีการ2.1. จริยธรรมพิจารณาเคลียร์ด้านจริยธรรมสำหรับการศึกษานี้ได้รับจากมารยาทในนาย Stadtand เซิลที่ดินบาเซิล สวิตเซอร์แลนด์ (EKBBอ้างอิง no.159/11) และยอมรับทีชาติจริยธรรมสำหรับสุขภาพ Research(NECHR) กระทรวงของสุขภาพ (MOH) ในPhnom Penh, Cambodia(referenceno.30/NECHR). Before field work started, the provincial and district health authorities, village and school authorities and parents were informed of the study and, in turn, working permission was granted. Prior to enrolling each participant, written informed consent was obtained from the par-ents, legal guardian or the participant him/herself if they were of legal age. In cases of illiteracy, the informed consent was signed by fingerprint before the village chief, who signed as a witness.2.2.Study design, population and area
The study was carried out in Central Kandal province, which surrounds the capital Phnom Penh. It is in habited by 1.2 mil- lion people and divided into 11 districts. Between May and June 2011, across-sectional study was carried out among schoolchil- dren at the Damrei Chhlang village primary school, S’ang district (11◦21_29.43__ N, 104◦59_18.05__ E), a district of 1831 people. Another cross-sectional study aimed to estimate the prevalence of Fasciola spp. Eggs in cattle droppings in the villages surrounding the Damrei Chhlang primary school(S’ang district). The sevil- lages included Damrei Chhlang and Preaek Khmer(11◦21_21.70__ N, 104◦58_59.33__ E), both located in S’ang Phnom commune; and Preaek Run(11◦21_16.30__ N, 104◦59_46.54__ E), located in Preaek Koy commune. Additionally, an abattoir study of a small facility that is slaughtering local cattle was conducted in Preaek Koy commune.
2.3. Procedures in the field
On day 1,enrolled study participants assembled at the commu- nity hall next to the school. A trained interviewer questioned each child about potential risk factors for infection and about experi- ences of ill-health. Subsequently, a physician assessed participants’ general health status and clinical symptoms by using a standard- ized assessment form. Additionally, a nurse drew a venous blood sample of 5 ml from each child. The blood samples were stored in a cooling box at about 5–10 ◦C until they reached the laboratory of the National Center for Parasitology, Entomology and Malaria Control (CNM), Ministry of Health in Phnom Penh.
A pre-labeled stool container was given to each child, along with instructions on how to fill it. Children were asked to collect morn- ing stools to ensure freshness of the stool samples. The following morning, the filled container was collected and a new pre-labeled container was provided. Three stool samples were collected from each child over 4 consecutive days. Each day after collection, con- tainers were directly transported to the laboratory of the CNM for analysis.
The stool containers for cattle droppings were distributed among randomly selected cattle owners, each of whom collected one fresh stool sample from every one of their cattle. Contain- ers were collected In the morning, the day after distribution, and directly transported to the laboratory of the CNM.
The butcher at the study abattoir examined the livers of slaugh- tered cattle on a continuous basis for meat quality assurance. For study purposes, he recorded in a diary the total number of slaugh- tered cattle and of Fasciola spp. Infected livers.
2.4. Laboratory procedures
For each of the three stool samples per child, one Kato–Katz thick smear (Katz etal.,1972) was prepared directly after the samples arrived in the laboratory. After a half an hour clearance time, the smears were examined under a light microscope (magnification 400×) for intestinal helminth eggs. The number of eggs per parasite species was counted and recorded.
From each of the three stool samples per child, approximately1 g was preserved in 15 ml sodium acetate–acetic acid–formalin (SAF) fixative for analysis by formalin–ether concentration tech-nique (FECT)(Marti andEscher,1990). Four weeks after collection, the fixed samples were processed and examined under a light
microscope (magnification1000×) for intestinal helminthes and protozoa.
From the first stool sample per child, approximately 0.5 g of fresh stool was preserved in 70% ethanol for later molecular analy-sis using real-time quantitative polymerase chain reaction(PCR) to diagnose Fasciola spp. (Alasaad etal.,2011) and F. buski infections (unpublished, developed by Dr. med. Stefanie Kramme, Swiss TPH).The preserved samples were sent to the Swiss TPH laboratory in
Basel, Switzerland, where molecular analysis was carried-out about 2 months later. First, from each preserved stool sample,200_g was
washed twice with phosphate buffered saline(PBS)to eliminate the ethanol. Subsequently, DNA was extracted with the QIAamp DNA Stool Mini Kit(QIAGEN,USA).The extracted DNA was frozen at−20 _C until PCR was performed,1week later. On 0.5 g of the first stool samples from each child, a commercially available F. hepatica coproantigen enzyme-linked immunosorbent assay(ELISA)(Bio-X, Belgium) was performed at the CNM laboratory.
Upon arrival, blood samples were stored at room tempera-ture to clot. Subsequently, the blood samples were centrifuged and the serum was frozen and stored at −20 _C at the CNM laboratory. The frozen samples were sent to the Diagnostic Center of the Swiss TPH, Switzerland, where an ELISA for F. hepatica-antibodies was performed 2 months after sample col-lection. Sera samples with a positive result were retested with an immunofluorescence antibody test(IFAT)for confirmation. All sera samples with a positive or critical(close to posit

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความชุกสูงของไข่พยาธิตัวแบนขนาดใหญ่ในเด็กนักเรียนในประเทศกัมพูชา
bstract
ไข่พยาธิตัวแบนขนาดใหญ่ (LTE) คล้ายเอสพีพี Fasciola ไข่ที่ได้รับรายงานว่าพบในอุจจาระของเด็กนักเรียนในจังหวัดกันดาลกัมพูชา การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อประเมินความชุกของ LTE ในอุจจาระของเด็กที่เข้าร่วมการโรงเรียนได้รับผลกระทบระบุปัจจัยเสี่ยงที่มีศักยภาพสำหรับการติดเชื้อและตรวจสอบสายพันธุ์ trematode เราดำเนินการศึกษาแบบตัดขวางที่เกี่ยวข้องกับแบบสอบถามในเชิงลึก admin- istered เพื่อเด็กนักเรียนที่โรงเรียนได้รับผลกระทบและตรวจสอบมูลวัวในพื้นที่โดยรอบและตับวัวฆ่า สามอุจจาระมีการตรวจสอบต่อเด็กโดยใช้ Kato-แคทซ์และฟอร์มาลินอีเทอร์เทคนิคเข้มข้นนอกจากนี้การเลือดซีรั่มเอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโน (ELISA) และโพลีเมอ coprological ปฏิกิริยาลูกโซ่ (PCR) ได้ดำเนินการสำหรับการขยายพันธุ์มูล clarification.Cattle มีการตรวจสอบ โดยการตกตะกอนถ้วยและวิธี ELISA coprological LTE พบในอุจจาระของเด็กนักเรียน 106 (46.5%). สองตัวอย่างซีรั่มเลือดจากเด็กนักเรียนเป็นบวกสำหรับ Fasciola น้ำหมึกในวิธี ELISA afirst แต่เป็นลบในแอนติบอดีอิมมูโนยืนยัน test.Out 221 ตัวอย่าง PCR เพียงคนเดียวที่ผ่านการทดสอบในเชิงบวกสำหรับ Fasciola เอสพีพี และไม่มีใครสำหรับ Fasciolopsis buski การบริโภคพืชน้ำดิบ (oddsratio (OR) = 3.3) และน้ำปลาที่หมัก (OR = 2.1) อย่างมีนัยสำคัญ Associ-ated กับ LTE ในอุจจาระ เอสพีพี Fasciola พยาธิใบไม้พบใน 18.3% ของ 191 ตับวัว ความชุกของ fascioliasis ในมูลวัวเป็น 88.8% ได้โดยเริ่มต้นที่ต่ำชุกของเด็กนักเรียนที่ได้รับการทดสอบในเชิงบวกสำหรับเอสพีพี Fasciola กับการวินิจฉัยระดับโมเลกุลที่เฉพาะเจาะจงและที่ไม่มีหลักฐานการวินิจฉัยของเอฟ buski อย่างยิ่งแสดงให้เห็นว่าส่วนใหญ่ตั้งข้อสังเกตกล้องจุลทรรศน์ LTE มาจากเอสพีพี Echinostoma เอสพีพี Fasciola การส่งผ่านจากวัวมนุษย์เป็นไปได้และการบริการสุขภาพของประชาชนจะต้องมีการแจ้งเตือนตาม.
1 บทนำในประเทศที่ต่ำและรายได้ปานกลางในลำไส้ Multipara-sitism กฎมากกว่าเป็นข้อยกเว้นที่ (แมคเคนซี่, 2005; Petney และแอนดรู, 1998;. Steinmannetal 2010)
ในเฉียงใต้เอเชียตะวันออกเฉียงพยาธิลำไส้และโปรโตซัว multiparasitism เป็นที่รู้จักกันดีและได้รับการรับรอง (ลี etal., 2002;. Parketal 2004. Sayasoneetal, 2011,2009. Sinuonetal, 2003. Schäretal, 2014) สายพันธุ์ถิ่นหลายที่เกิดจากอาหาร trematodes (เอฟบีที) ได้รับการระบุเช่นพยาธิใบไม้ตับ (Opisthorchis viverrini และเอสพีพี Fasciola.) และพยาธิใบไม้ลำไส้ (Hien etal 2001 (Fasciolopsis buski และ Echinos- toma spp.). KeiserandUtzinger 2005 ; Quang etal 2008. Sayasoneetal 2011.. Sohnetal, 2011a b) helminthic multiparasitism ท้าทายที่ร้ายแรงสำหรับปรสิตวิทยา diag-nosis เป็นไข่จากสายพันธุ์ที่แตกต่างกันอาจมีลักษณะสัณฐานอีกคนหนึ่ง ตัวอย่างเช่นขนาดรูปร่างรูปไข่และการปรากฏตัวของเพอคิวลัขนาดเล็กและไม่เด่นของเอสพีพี Fasciola ไข่เป็น indis-tinguishable จากเอฟ buski และบาง spp Echinostoma eggs.The ขนาดไข่เฉลี่ยของทั้งสามปรสิตอีเจเนราจะคล้ายกันในแง่ของยาวและความกว้าง: Fasciola หมึก 106.5-171.5 / 63.9-95.4m, Fasciola gigantica 150.9-182.2 / 85.1-106.2m, Echinostoma (Valero etal, 2009.) Revolutum 97-117 / 61-65m (Sohn etal, 2011a.); Echinostoma ilocanum 89-99 / 52-58m (Sohn etal., 2011b) และเอฟ buski 130-140 / 80-85m (การ์เซีย andBruckner, 1988) พวกเขา canbe ลักษณะเป็นไข่ Fasciola เหมือนหรือไข่พยาธิตัวแบนขนาดใหญ่ (LTE) ในปี 2009 LTE พบในอุจจาระของ 27/150 schoolchil- ลูก (18.0%) ในหมู่บ้าน Damrei Chhlang โรงเรียนประถมศึกษาจังหวัดกันดาลกัมพูชาในระหว่างการสำรวจ parasiteological มาตรฐานโดยใช้เทคนิค Kato-แคทซ์ (Khieu etal. 2013 ) ได้รับการ preva-lence สูงของเอสพีพี Fasciola การติดเชื้อในหมู่สัตว์เลี้ยงในภาคใต้ของประเทศกัมพูชา(Tum etal., 2007), LTE จะได้รับส่วนที่เป็นเอสพีพี Fasciola การติดเชื้อ แต่สายพันธุ์ trematode อื่น ๆ ยังจะได้รับความรับผิดชอบ จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้คือการประเมินความชุกของ LTE ในอุจจาระของเด็กนักเรียนที่ระบุปัจจัยเสี่ยงต่อการติดเชื้อและการตรวจสอบสายพันธุ์ trematode ทั้งหมดให้ความสำคัญกับเอสพีพี Fasciola เราดำเนินการศึกษาทั่วขวางในหมู่เด็กนักเรียนตรวจสอบมูลวัวในและรอบ ๆ หมู่บ้าน Damrei Chhlang และการตรวจสอบตับวัวในโรงฆ่าสัตว์ในท้องถิ่น. 2 วัสดุและวิธีการ2.1 การพิจารณาจริยธรรมการกวาดล้างจริยธรรมสำหรับการศึกษานี้ได้รับมาจากจริยธรรมของคณะกรรมการบาเซิล-Stadtand บาเซิลแลนด์วิตเซอร์แลนด์ (EKBB; no.159 อ้างอิง / 11) และจากจริยธรรมแห่งชาติกระทำทีเพื่อการวิจัยสุขภาพ (NECHR) กระทรวงสาธารณสุข (กระทรวงสาธารณสุข) ในกรุงพนมเปญประเทศกัมพูชา(referenceno.30 / NECHR) ก่อนที่จะเริ่มต้นการทำงานภาคสนามที่จังหวัดและเจ้าหน้าที่สาธารณสุขอำเภอหมู่บ้านและหน่วยงานโรงเรียนและผู้ปกครองได้รับแจ้งจากการศึกษาและในทางกลับได้รับอนุญาตการทำงานที่ได้รับ ก่อนที่จะมีการลงทะเบียนผู้เข้าร่วมแต่ละยินยอมเป็นลายลักษณ์อักษรที่ได้รับจากตราไว้หุ้นละ ents ผู้ปกครองตามกฎหมายหรือมีส่วนร่วมเขา / เธอว่าพวกเขาบรรลุนิติภาวะ ในกรณีของการไม่รู้หนังสือยินยอมลงนามจากลายนิ้วมือก่อนที่หัวหน้าหมู่บ้านที่ลงนามเป็นพยาน. ออกแบบ 2.2.Study ประชากรและพื้นที่การศึกษาได้ดำเนินการในจังหวัดกันดาลกลางซึ่งล้อมรอบเมืองหลวงกรุงพนมเปญ มันเป็นใน habited 1.2 mil- คนสิงโตและแบ่งออกเป็น 11 อำเภอ ระหว่างเดือนพฤษภาคมและเดือนมิถุนายน 2011, ข้ามขวางการศึกษาได้ดำเนินการในหมู่ลูก schoolchil- ที่หมู่บ้าน Damrei Chhlang โรงเรียนประถมศึกษาอำเภอ S'ang (11◦21_29.43__ N, 104◦59_18.05__ E), อำเภอ 1,831 คน . อีกการศึกษาภาคตัดขวางมีวัตถุประสงค์เพื่อประเมินความชุกของเอสพีพี Fasciola ไข่ในมูลวัวในหมู่บ้านรอบ Damrei Chhlang โรงเรียนประถม (อำเภอ S'ang) ลาเจส sevil- รวม Damrei Chhlang และ Preaek เขมร (11◦21_21.70__ N, 104◦58_59.33__ E) ทั้งสองอยู่ในชุมชน S'ang กรุง; และ Preaek Run (11◦21_16.30__ N, 104◦59_46.54__ E) ที่ตั้งอยู่ในจังหวัด Preaek Koy นอกจากนี้การศึกษาโรงฆ่าสัตว์ของสิ่งอำนวยความสะดวกเล็ก ๆ ที่มีการฆ่าวัวในท้องถิ่นได้ดำเนินการในชุมชน Preaek Koy. 2.3 ขั้นตอนในสนามในวันที่ 1, การลงทะเบียนเข้าร่วมการศึกษาประกอบที่ห้องโถง nity แล้วแต่ที่อยู่ติดกับโรงเรียน สัมภาษณ์ผ่านการฝึกอบรมเด็กแต่ละคนถามเกี่ยวกับปัจจัยเสี่ยงที่มีศักยภาพสำหรับการติดเชื้อและเกี่ยวกับความแตกประสบการณ์ของสุขภาพไม่ดี ต่อมาแพทย์ประเมินสถานะสุขภาพของผู้เข้าร่วมทั่วไปและอาการทางคลินิกโดยใช้รูปแบบการประเมิน ized ระดับมาตรฐาน นอกจากนี้พยาบาลดึงตัวอย่างเลือดดำ 5 มล. จากเด็กแต่ละคน กลุ่มตัวอย่างเลือดที่เก็บไว้ในช่องระบายความร้อนที่ประมาณ 5-10 ◦Cจนกว่าพวกเขาจะมาถึงในห้องปฏิบัติการของศูนย์แห่งชาติสำหรับปรสิตวิทยากีฏวิทยาและมาลาเรียควบคุม (CNM) กระทรวงสาธารณสุขในกรุงพนมเปญ. ภาชนะอุจจาระก่อนที่มีข้อความเป็น มอบให้กับเด็กแต่ละคนพร้อมกับคำแนะนำในการกรอก เด็กถูกถามในการเก็บรวบรวมอุจจาระไอเอ็นจีเช้าวันเพื่อให้แน่ใจว่าความสดของตัวอย่างอุจจาระ เช้าวันต่อมาภาชนะที่เต็มไปเก็บและภาชนะก่อนที่มีข้อความใหม่ที่ถูกจัดให้ สามตัวอย่างอุจจาระที่ถูกเก็บรวบรวมจากเด็กแต่ละคนกว่า 4 วันติดต่อกัน วันรุ่งขึ้นหลังจากคอลเลกชันแต่ละ tainers ทำาถูกส่งตรงไปยังห้องปฏิบัติการของ CNM สำหรับการวิเคราะห์. ภาชนะบรรจุอุจจาระสำหรับมูลวัวกระจายในหมู่สุ่มเลือกเจ้าของวัวแต่ละคนเก็บรวบรวมตัวอย่างหนึ่งอุจจาระสดจากทุกคนของสัตว์เลี้ยงของเขา ภาชนะที่ถูกเก็บรวบรวมในตอนเช้าวันรุ่งขึ้นหลังจากการจัดจำหน่ายและส่งโดยตรงไปยังห้องปฏิบัติการของ CNM. the เขียงที่โรงฆ่าสัตว์การศึกษาตรวจสอบตับวัวอกไว้ slaugh- บนพื้นฐานอย่างต่อเนื่องสำหรับการประกันคุณภาพเนื้อ เพื่อประโยชน์ในการศึกษาเขาบันทึกไว้ในไดอารี่จำนวนวัวอกไว้ slaugh- และเอสพีพี Fasciola ตับติดเชื้อ. 2.4 ขั้นตอนการตรวจทางห้องปฏิบัติการสำหรับแต่ละสามอุจจาระต่อเด็กหนึ่ง Kato-แคทซ์ smear หนา (แคทซ์ etal., 1972) ถูกจัดทำขึ้นโดยตรงหลังจากกลุ่มตัวอย่างที่เข้ามาในห้องปฏิบัติการ หลังจากที่ครึ่งเวลากวาดล้างชั่วโมงรอยเปื้อนได้รับการตรวจสอบภายใต้กล้องจุลทรรศน์แสง (400 ×ขยาย) ไข่พยาธิในลำไส้ จำนวนไข่ต่อชนิดพยาธินับและบันทึก. จากแต่ละสามอุจจาระต่อเด็ก approximately1 กรัมได้รับการเก็บรักษาไว้ใน 15 มลโซเดียมอะซิเตท-อะซิติกกรดฟอร์มาลิน (SAF) ตรึงสำหรับการวิเคราะห์โดยความเข้มข้นของฟอร์มาลินอีเทอร์เทคโนโลยี nique (ส่) (Marti andEscher, 1990) สี่สัปดาห์หลังจากเก็บตัวอย่างคงที่ได้รับการประมวลผลและการตรวจสอบภายใต้แสงกล้องจุลทรรศน์ (magnification1000 ×) สำหรับหนอนพยาธิลำไส้และโปรโตซัว. จากตัวอย่างอุจจาระครั้งแรกต่อเด็กประมาณ 0.5 กรัมของอุจจาระสดเก็บรักษาไว้ในเอทานอล 70% สำหรับมีส่วนโมเลกุลในภายหลัง -sis ใช้เวลาจริงลูกโซ่โพลิเมอร์ปฏิกิริยาเชิงปริมาณ (PCR) ในการวินิจฉัย Fasciola เอสพีพี (Alasaad etal., 2011) และการติดเชื้อเอฟ buski (ไม่ได้เผยแพร่การพัฒนาโดยดร. med. Stefanie Kramme สวิส TPH) ตัวอย่างที่เก็บรักษาไว้ได้โดยเริ่มต้นที่ถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการ TPH สวิสในบาเซิลวิตเซอร์แลนด์ที่วิเคราะห์โมเลกุลได้ดำเนินการออกประมาณ 2 เดือนต่อมา ครั้งแรกจากตัวอย่างอุจจาระแต่ละดอง 200_g ได้รับการล้างครั้งที่สองที่มีฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ(พีบีเอส) ที่จะกำจัดเอทานอล ต่อมาดีเอ็นเอถูกสกัดด้วยดีเอ็นเอ QIAamp สตูลมินิ Kit (QIAGEN สหรัฐอเมริกา) ได้โดยเริ่มต้นที่สกัดดีเอ็นเอถูกแช่แข็งที่ 20 _C จนกว่า PCR ได้ดำเนินการ 1week ภายหลัง ใน 0.5 กรัมของอุจจาระแรกจากเด็กแต่ละคนเป็นเชิงพาณิชย์ที่มีเอฟหมึก coproantigen เอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโน (ELISA) (Bio-X เบลเยียม) ได้รับการดำเนินการที่ห้องปฏิบัติการ CNM. เมื่อมาถึงตัวอย่างเลือดถูกเก็บไว้ที่ห้องพัก อุณหภูมิ-ture ก้อน ต่อจากนั้นตัวอย่างเลือดที่ถูกปั่นและซีรั่มที่ถูกแช่แข็งและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 _C ที่ห้องปฏิบัติการ CNM กลุ่มตัวอย่างที่แช่แข็งที่ถูกส่งไปยังศูนย์การวินิจฉัยของสวิส TPH วิตเซอร์แลนด์โดยที่วิธี ELISA สำหรับเอฟแอนติบอดีหมึกได้ดำเนินการ 2 เดือนหลังจากที่ตัวอย่างเทือกเขา-Lection ตัวอย่างซีรั่มที่มีผลบวกครั้งแล้วครั้งเล่ากับการทดสอบแอนติบอดีอิมมูโน (IFAT) เพื่อยืนยัน ทั้งหมดตัวอย่างซีรั่มที่มีความสำคัญเชิงบวกหรือ (ใกล้เคียงกับวางตัว

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สูงการศึกษาความชุกของไข่พยาธิตัวแบนใหญ่ในเด็กนักเรียนในกัมพูชา
B S T R A C T
ใหญ่ไข่พยาธิตัวแบน ( LTE ) ตาก ( คล้ายไข่รายงานพบในอุจจาระของเด็กวัยเรียนในเขตกันดาล , กัมพูชา การศึกษานี้มีวัตถุประสงค์เพื่อประเมินความชุกของ LTE ในอุจจาระของเด็กเรียนจากโรงเรียนระบุปัจจัยความเสี่ยงสำหรับการติดเชื้อ และวินิจฉัยพยาธิตัวแบนชนิด เราได้ทำการศึกษาในเชิงลึกแบบที่เกี่ยวข้องกับแบบสอบถาม admin - istered ให้เด็กนักเรียนที่ได้รับผลกระทบ จากโรงเรียน และตรวจสอบพื้นที่โดยรอบและมูลวัวในตับของการฆ่าวัว 3 แป้นจำนวนตรวจสอบต่อเด็กการใช้เค– Katz และฟอร์มาลินความเข้มข้นและอีเทอร์เทคนิค นอกจากนี้ เลือด enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA ) และ coprological Polymerase chain reaction ( PCR ) คือ 1 ) เพื่อศึกษาชนิด ชี้แจง วัวมูลถูกวินิจฉัยโดยการตกตะกอนและคัพ coprological วิธีอีไลซ่า LTE ที่พบในอุจจาระของ 106 เด็กนักเรียน ( 46.5 % )สองเลือดตัวอย่างจากเด็กนักเรียนที่เป็นบวกสำหรับการตากใน afirst ELISA แต่ถูกลบในการยืนยันโดยวิธีทดสอบ จาก 221 PCR ตัวอย่างเพียงหนึ่งทดสอบบวกสำหรับ spp . ที่ตากไม่มี fasciolopsis buski . การบริโภคพืชผักดิบ ( oddsratio ( หรือ ) = 3.3 ) และน้ำปลาร้า ( OR = 21 ) อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ ( พ่อพันธุ์ ated กับ LTE ในอุจจาระ ฟลุคตาก spp . พบว่าใน 1 % ของ 191 วัว ตับ ความชุกของสัตว์ที่มีมูลเป็น 88.8 เปอร์เซ็นต์ ความชุกต่ำของเด็กนักเรียนที่ผ่านการทดสอบบวกสำหรับการวินิจฉัยระดับโมเลกุลที่เฉพาะเจาะจงและตาก ( กับผู้ที่ไม่มีหลักฐานในการวินิจฉัย .buski อย่างมาก พบว่า ส่วนใหญ่ของกล้องจุลทรรศน์พบ LTE จากตาสีตาสา spp . จากตากส่งโคให้มนุษย์ได้ และการให้บริการสาธารณสุขต้องแจ้งตาม .
1 ในประเทศรายได้ปานกลางและต่ำเบื้องต้น
, multipara sitism ลำไส้เป็นกฎมากกว่าเป็นข้อยกเว้น ( McKenzie , 2005 ; petney และ Andrews , 1998 ; steinmannetal .2010 ) ในภาคใต้ -
เอเชียตะวันออก พยาธิลำไส้ และโปรโตซัว multiparasitism เป็นที่รู้จักกันดีและได้รับการบันทึกไว้ ( ลี คณะ , 2002 ; parketal . , 2004 ; sayasoneetal . 20112009 ; sinuonetal . , 2003 ; ขอราคาและ retal .
2014 ) สายพันธุ์ถิ่นหลายของอาหาร borne ใบไม้ ( FBT ) ได้ระบุไว้ เช่น พยาธิใบไม้ตับ ( Opisthorchis viverrini และ ตาก .) และพยาธิใบไม้ลำไส้ ( fasciolopsis buski และ echinos - โทมะ spp . ) ( เ ยนคณะ . , 2001 ; keiserandutzinger , 2005 ; กวางคณะ , 2551 ; sayasoneetal , 2011 ; sohnetal . 2011a , B ) พยาธิ multiparasitism poses ท้าทายสำหรับ nosis diag ปรสิตวิทยา เป็นไข่จากสายพันธุ์ที่แตกต่างกันอาจจากคล้ายกัน ตัวอย่างเช่น ขนาดรูปร่างรูปไข่และการแสดงตนของโอเพอร์คูลัมขนาดเล็กและไม่เด่นของตากและไข่ tinguishable indis จาก F buski ตาสีตาสา spp . และบางไข่ โดยไข่ของปรสิตทั้งหมดสามขนาด egenera จะคล้ายกันในแง่
ของความยาวและความกว้าง : ตาก การ 106.5 – 171.5 / 63.9 – 95.4m ตาก 1 , 150.9 – 182.2 / ขวาง 106.2m ( จำกัด คณะ Valero , 2009 )ตาสีตาสา revolutum 97 – 117 / 61 – 65m ( ซอน คณะ . 2011a ) ; ตาสีตาสา ilocanum 89 และ 99 / 52 – 58m ( ซอน คณะ . 2011b ) และดังนั้นจึง buski
F / 80-85m ( การ์เซีย andbruckner , 1988 ) พวกเขาสามารถมีลักษณะ เป็นเหมือนไข่หรือไข่พยาธิตัวแบนใหญ่ตาก ( LTE ) ใน 2009 , LTE ที่พบในอุจจาระของ 27 / 150 schoolchil -
มากขึ้น ( ร้อยละ 18.7 ) ใน damrei chhlang หมู่บ้านหลักโรงเรียนกันดาลจังหวัดกัมพูชาในมาตรฐาน parasiteological สำรวจโดยใช้เทคนิคเค
Katz ( เขียวและคณะ . 2556 ) ให้สูง preva ตาก lence ของการติดเชื้อ spp . ในหมู่สัตว์เลี้ยงในภาคใต้ของกัมพูชา
( ตั้ม คณะ , 2550 ) , LTE อาจได้รับเชื้อจากตาก . . อย่างไรก็ตาม ชนิดอื่น ๆสามารถมีพยาธิตัวแบนรับผิดชอบจุดมุ่งหมายของการศึกษานี้เพื่อประเมินความชุกของ LTE ในอุจจาระของเด็กวัยเรียน ระบุปัจจัยเสี่ยงต่อการติดเชื้อ และวินิจฉัยพยาธิตัวแบนชนิดต่างๆเน้นตาก spp . เราแสดงในการศึกษากลุ่มของเด็กนักเรียน , ตรวจสอบวัวมูลใน และ รอบ ๆหมู่บ้าน และตรวจสอบ damrei chhlang ตับวัวในโรงฆ่าสัตว์ในท้องถิ่น .
2 .