2. Materials and methods2.1. Subjec

2. Materials and methods
2.1. Subject selection
Our first requirement was to be able to carry out the research on
a large number of domestic refrigerators. To achieve this goal we
decided to launch a campaign to recruit volunteers that would put
at our disposal their home refrigerators. The campaign mainly
involved people who work or study on the Agripolis campus of the
University of Padua (Legnaro, Italy), asking the cooperation of individual
households, both among students and teachers and technical
staff.
2.2. Kit preparation and utilization
Participation was voluntary and individuals were fully informed
and asked to complete adherence forms. Once we received these
forms by e-mail we delivered to each person a specific sampling kit
and a questionnaire on the habits of the use of their appliance. The
kit consisted of 2 sterile adhesive area delimiters with an overall
indoor sampling area of 100 cm2
, 2 sponge-bags already moistened
with sterile buffered saline, 2 sterile bags for collecting and storing
the sponges after having gathered the samples and a pair of sterile,
disposable gloves.
The volunteers were taught in person how to collect the sample
sterilely and how to properly store the sponge-bag until the time of
delivery. The kit included a leaflet with instructions for use.
We suggested taking the surface samples from two distinct
places in the refrigerator, specifically one of the two vertical side
walls and one of the bottom of the lowest shelf where vegetables
are usually placed.
2.3. Data collection
Between July 2011 and April 2012, 293 domestic refrigerators
were sampled, for a total of 586 samples. The samples were
transported to the laboratory in a maximum time of 2 h and were
analyzed immediately after their arrival.
2.4. Microbiological analyses
For each bag containing a sponge, 90 ml of sterile saline solution
were added to obtain 100 ml (10
1
); the sponge thus soaked was
pressed several times in a Colworth Stomacher 400 at a low pressure
to ensure the highest possible recovery of microorganisms.
After scale dilution on a base of 10, we proceeded to the inoculation
of 1 ml or 0.1 ml of the suspensions on Plate Count Agar
(Oxoid), Oxytetracycline Glucose Yeast Agar (Merck), Baird Parker
Agar (Biolife), Bacillus cereus Selective Agar (Oxoid), GSP Agar
(Merck). For each sample, the total viable count (TVC) was determined
as well as the count of moulds and yeasts, CPS, Bacillus spp.
and presumed B. cereus, Pseudomonas and Aeromonas spp.
Furthermore, we conducted qualitative research of Salmonella spp.
and L. monocytogenes using ISO analytical methods for both pathogens.
The research of Y. enterocolitica was carried out using CIN
Agar (Biolife).
The determination of microbial counts (expressed in CFU cm
2
)
was conducted by applying the formula given in ISO 18593:2004.
Some suspect colonies grown on the respective culture media were
transplanted on Nutrient Agar (Oxoid) and identified using macromethod
tests (oxidase, catalase, etc.), Gram staining and
biochemical tests (API System Biomérieux). The moulds were
cultivated on potato agar (Biolife) and identified phenotypically

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. เรื่องเลือกความต้องการแรกของเราคือเพื่อ ให้สามารถดำเนินการวิจัยในของตู้เย็นในประเทศจำนวนมาก เพื่อให้บรรลุเป้าหมายนี้เราตัดสินใจที่จะเปิดตัวแคมเปญรับสมัครอาสาสมัครที่จะทำให้ที่พร้อมตู้เย็นที่บ้านของพวกเขา แคมเปญส่วนใหญ่คนที่ทำงาน หรือเรียนใน Agripolis ของที่เกี่ยวข้องกับการมหาวิทยาลัยของปาดัว (Legnaro อิตาลี), ขอความร่วมมือของแต่ละบุคคลครัวเรือน ทั้งใน หมู่นักเรียน และครู และเทคนิคพนักงาน2.2. ชุดการเตรียมและการใช้ประโยชน์มีส่วนร่วมได้โดยสมัครใจ และบุคคลที่ได้รับแจ้งอย่างเต็มที่และถูกขอให้กรอกแบบฟอร์มหนึ่ง เมื่อเรารับเหล่านี้ฟอร์มอีเมลที่เราส่งให้แต่ละคนชุดสุ่มตัวอย่างเฉพาะเจาะจงและแบบสอบถามเกี่ยวกับพฤติกรรมการใช้อุปกรณ์ของพวกเขา การชุดประกอบด้วย 2 พื้นที่กาวเป็นหมันคั่นด้วยโดยรวมพื้นที่สุ่มในร่ม 100 cm2, 2 ฟองน้ำถุงชื้นอยู่แล้วกับเกลือบัฟเฟอร์ปลอดเชื้อ ถุงปลอดเชื้อ 2 การรวบรวม และจัดเก็บฟองน้ำหลังจากมีการรวบรวมตัวอย่างและคู่เป็นหมันถุงมือใช้แล้วทิ้งอาสาสมัครได้รับการสอนคนวิธีการรวบรวมตัวอย่างsterilely และวิธีการที่ถูกต้องเก็บฟองน้ำถุงจนถึงเวลาจัดส่งสินค้า ชุดรวมแผ่นพับคำแนะนำสำหรับการใช้งานเราแนะนำใช้ตัวอย่างพื้นผิวสองอย่างสถานที่ในตู้เย็น โดยเฉพาะหนึ่งในสองแนวตั้งด้านข้างผนังและด้านล่างของชั้นต่ำสุดอย่างใดอย่างหนึ่งที่ผักมักจะวาง2.3. ข้อมูลชุด2554 กรกฎาคมและ 2555 เมษายน ตู้เย็นในประเทศที่ 293ถูก ตัวอย่างรวมตัวอย่าง 586 ตัวอย่างถูกขนส่งไปห้องปฏิบัติการในเวลาที่สูงสุดของ 2 h และได้วิเคราะห์ทันทีหลังจากเดินทางมาถึง2.4. จุลินทรีย์วิเคราะห์สำหรับแต่ละถุงประกอบด้วยฟองน้ำ เกลือฆ่าเชื้อ 90 มล.เพิ่มการรับ 100 มิลลิลิตร (10 1); มีฟองน้ำจึง แช่กดหลายครั้งเป็น 400 แผงประดับหน้าอก Colworth ที่ความดันต่ำให้กู้ได้สูงสุดของจุลินทรีย์หลังจากเจือจางขนาดบนฐาน 10 เราก็เดินไปที่ inoculation1 มิลลิลิตรหรือสารแขวนลอยบนอาหารจานจำนวน 0.1 มล.(Oxoid), ยีสต์ของกลูโคสออกซิเตตราไซคลีน Agar (Merck), ปาร์คเกอร์ Bairdอาหาร (Biolife), cereus บาซิลลัส (Oxoid), Selective Agar GSP Agar(Merck) กำหนดนับได้รวม (TVC) อย่างเช่นเดียวกับจำนวนของออกซิเจนแบคทีเรีย moulds และ yeasts, CPSและสันนิษฐานว่า B. cereus, Aeromonas และ Pseudomonas ออกซิเจนนอกจากนี้ เราดำเนินการวิจัยเชิงคุณภาพของซัลและ L. monocytogenes ใช้ ISO วิธีการวิเคราะห์เชื้อทั้งสองการวิจัยของ enterocolitica ประกันศูนย์ปีดำเนินการโดยใช้ CINอาหาร (Biolife)กำหนดตรวจนับจุลินทรีย์ (แสดงในอาหรับซม. 2)ดำเนินการ โดยใช้สูตรที่กำหนดใน ISO 18593:2004บางอาณานิคมสงสัยว่าปลูกบนสื่อวัฒนธรรมเกี่ยวข้องได้มาบนสารอาหาร (Oxoid) และระบุการใช้ macromethodทดสอบ (oxidase, catalase ฯลฯ), การย้อมสีกรัม และทดสอบทางชีวเคมี (Biomérieux ระบบ API) แม่พิมพ์ถูกปลูกบนอาหารฝรั่ง (Biolife) และระบุ phenotypically

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 เลือกเรื่องที่ต้องการแรกของเราคือเพื่อให้สามารถดำเนินการวิจัยเกี่ยวกับการเป็นจำนวนมากของตู้เย็นในประเทศ เพื่อให้บรรลุเป้าหมายนี้เราตัดสินใจที่จะเปิดตัวแคมเปญที่จะรับสมัครอาสาสมัครที่จะใส่ในตู้เย็นจำหน่ายของเราบ้านของพวกเขา แคมเปญส่วนใหญ่คนที่เกี่ยวข้องที่ทำงานหรือการศึกษาในมหาวิทยาลัย Agripolis ของมหาวิทยาลัยปาดัว(Legnaro, อิตาลี) ขอความร่วมมือของบุคคลที่ผู้ประกอบการทั้งในหมู่นักเรียนและครูด้านเทคนิคและพนักงาน. 2.2 การเตรียมความพร้อมและการใช้ชุดการมีส่วนร่วมเป็นความสมัครใจและบุคคลที่ได้รับแจ้งอย่างเต็มที่และขอให้กรอกแบบฟอร์มการยึดมั่น เมื่อเราได้รับเหล่านี้ในรูปแบบ e-mail ที่เราส่งไปยังแต่ละคนชุดเก็บตัวอย่างที่เฉพาะเจาะจงและแบบสอบถามเกี่ยวกับพฤติกรรมการใช้งานของเครื่องใช้ของพวกเขา ชุดประกอบด้วย 2 ตัวคั่นพื้นที่กาวฆ่าเชื้อที่มีการรวมพื้นที่เก็บตัวอย่างน้ำในร่ม100 cm2 2 ฟองน้ำถุงชุบแล้วด้วยน้ำเกลือบัฟเฟอร์หมัน2 ถุงปลอดเชื้อสำหรับการเก็บรวบรวมและจัดเก็บฟองน้ำหลังจากที่มีการรวบรวมตัวอย่างและคู่ของการฆ่าเชื้อที่ถุงมือทิ้ง. อาสาสมัครได้รับการสอนในคนวิธีการเก็บตัวอย่างsterilely และวิธีการที่ถูกต้องในการจัดเก็บฟองน้ำถุงจนกว่าจะถึงเวลาของการจัดส่ง ชุดรวมถึงแผ่นพับที่มีคำแนะนำสำหรับการใช้งาน. เราแนะนำตัวอย่างการใช้พื้นผิวที่แตกต่างจากสองสถานที่ในตู้เย็นโดยเฉพาะหนึ่งในสองด้านแนวตั้งผนังและเป็นหนึ่งในด้านล่างของชั้นต่ำสุดที่ผักมักจะถูกวางไว้. 2.3 การเก็บรวบรวมข้อมูลระหว่างเดือนกรกฎาคมปี 2011 และเดือนเมษายน 2012, 293 ตู้เย็นภายในประเทศได้รับตัวอย่างรวมเป็น586 ตัวอย่าง กลุ่มตัวอย่างที่ถูกส่งไปยังห้องปฏิบัติการในระยะเวลาไม่เกิน 2 ชั่วโมงและได้รับการวิเคราะห์ทันทีหลังจากการมาถึงของพวกเขา. 2.4 วิเคราะห์ทางจุลชีววิทยาสำหรับแต่ละถุงมีฟองน้ำ 90 มล. น้ำเกลือปลอดเชื้อมีการเพิ่มที่จะได้รับ100 มล. (10 1); ฟองน้ำแช่จึงถูกกดหลายครั้งใน Colworth Stomacher 400 ที่ความดันต่ำเพื่อให้แน่ใจว่าการฟื้นตัวเป็นไปได้สูงสุดของจุลินทรีย์. หลังจากลดสัดส่วนระดับบนฐานของ 10 ที่เราดำเนินการต่อไปฉีดวัคซีน1 มล. หรือ 0.1 มลสารแขวนลอยใน นับแผ่นวุ้น(Oxoid), Oxytetracycline กลูโคสยีสต์วุ้น (เมอร์ค) บาร์ดปาร์กเกอร์วุ้น(BioLife) Bacillus cereus เลือกวุ้น (Oxoid) GSP วุ้น(เมอร์ค) สำหรับแต่ละตัวอย่างนับทำงานได้รวม (TVC) ถูกกำหนดเช่นเดียวกับการนับแม่พิมพ์และยีสต์, CPS, Bacillus spp. และ B. cereus สันนิษฐาน Pseudomonas และ Aeromonas spp. นอกจากนี้เราดำเนินการวิจัยเชิงคุณภาพของเชื้อ Salmonella spp. และ L. monocytogenes โดยใช้วิธีการวิเคราะห์มาตรฐาน ISO เชื้อโรคทั้งสอง. การวิจัยของ Y. enterocolitica ได้รับการดำเนินการโดยใช้ CIN วุ้น (BioLife). การกำหนดนับจุลินทรีย์ (แสดงใน CFU ซม. 2) ได้ดำเนินการโดยใช้สูตรที่ได้รับการรับรองมาตรฐาน ISO 18593 ใน :. 2004 บางอาณานิคมของผู้ต้องสงสัยที่ปลูกในสื่อวัฒนธรรมที่เกี่ยวข้องได้รับการปลูกถ่ายในสารอาหารวุ้น (Oxoid) และระบุการใช้ macromethod การทดสอบ (oxidase, catalase ฯลฯ ) การย้อมสีแกรมและการทดสอบทางชีวเคมี(API ระบบ bioMerieux) แม่พิมพ์ถูกปลูกฝังในอาหารเลี้ยงเชื้อมันฝรั่ง (BioLife) และมีการระบุลักษณะภายนอก