AbstractIn this study, the applicab

Abstract
In this study, the applicability of droplet digital PCR (ddPCR) for routine analysis in food and feed samples was demonstrated with the quantification of genetically modified organisms (GMOs). Real-time quantitative polymerase chain reaction (qPCR) is currently used for quantitative molecular analysis of the presence of GMOs in products. However, its use is limited for detecting and quantifying very small numbers of DNA targets, as in some complex food and feed matrices. Using ddPCR duplex assay, we have measured the absolute numbers of MON810 transgene and hmg maize reference gene copies in DNA samples. Key performance parameters of the assay were determined. The ddPCR system is shown to offer precise absolute and relative quantification of targets, without the need for calibration curves. The sensitivity (five target DNA copies) of the ddPCR assay compares well with those of individual qPCR assays and of the chamber digital PCR (cdPCR) approach. It offers a dynamic range over four orders of magnitude, greater than that of cdPCR. Moreover, when compared to qPCR, the ddPCR assay showed better repeatability at low target concentrations and a greater tolerance to inhibitors. Finally, ddPCR throughput and cost are advantageous relative to those of qPCR for routine GMO quantification. It is thus concluded that ddPCR technology can be applied for routine quantification of GMOs, or any other domain where quantitative analysis of food and feed samples is needed.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

บทคัดย่อในการศึกษานี้ ความเกี่ยวข้องของของ PCR ดิจิตอล (ddPCR) สำหรับการวิเคราะห์ประจำในตัวอย่างอาหารและอาหารถูกแสดง ด้วยนับของแปลงพันธุกรรมหยดปรับเปลี่ยนสิ่งมีชีวิต (ดัดแปลงพันธุกรรม) ปัจจุบันมีใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่พอลิเมอเรสเชิงปริมาณแบบเรียลไทม์ (qPCR) สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณโมเลกุลของสถานะของการดัดแปลงพันธุกรรมในผลิตภัณฑ์ อย่างไรก็ตาม การใช้ถูกจำกัดสำหรับการตรวจสอบ และ quantifying เลขเล็ก ๆ ของดีเอ็นเอเป้าหมาย ในอาหารบางอย่างซับซ้อน และเลี้ยงเมทริกซ์ โดยใช้การทดสอบแบบสองทาง ddPCR เรามีวัดจำนวน MON810 transgene และ hmg อ้างอิงข้าวโพดเลี้ยงสัตว์ย่อย ๆ ในตัวอย่างดีเอ็นเอแน่นอน มีกำหนดพารามิเตอร์หลักประสิทธิภาพของการทดสอบ ระบบ ddPCR จะแสดงให้แม่นยำแบบสัมพัทธ์ และสัมบูรณ์นับของเป้าหมาย โดยไม่ต้องเทียบเส้นโค้ง (ห้าดีเอ็นเอเป้าหมายคัดลอก) ความไวของการทดสอบ ddPCR เปรียบเทียบกับผู้ละ qPCR assays และวิธี PCR (cdPCR) ดิจิตอลของหอการค้า มันมีช่วงแบบไดนามิก 4 อันดับของขนาด มากกว่าของ cdPCR นอกจากนี้ เมื่อเทียบกับ qPCR วิเคราะห์ ddPCR พบว่าทำซ้ำในดีกว่าที่ความเข้มข้นต่ำเป้าหมายและการยอมรับมากขึ้นเพื่อ inhibitors สุดท้าย ddPCR สามารถประมวลผลได้และต้นทุนมีข้อได้เปรียบเมื่อเทียบกับบรรดา qPCR สำหรับจีเอ็มโอนับเป็นงานประจำ ดังนั้นจะสรุปว่า สามารถใช้เทคโนโลยี ddPCR สำหรับนับตามปกติของการดัดแปลงพันธุกรรม หรือโดเมนอื่นที่จำเป็นการวิเคราะห์เชิงปริมาณของตัวอย่างอาหารและอาหาร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

นามธรรม
การศึกษาการประยุกต์ใช้แสงดิจิตอลเทคนิค ( ddpcr ) สำหรับการวิเคราะห์ขั้นตอนในตัวอย่างอาหารและอาหารสัตว์ ) กับปริมาณของสิ่งมีชีวิตดัดแปลงพันธุกรรม ( GMOs ) เวลาจริงปริมาณการใช้ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส ( qpcr ) ถูกใช้ในขณะนี้สำหรับการวิเคราะห์เชิงปริมาณของโมเลกุล การปรากฏตัวของ GMOs ในผลิตภัณฑ์ อย่างไรก็ตามการใช้งานจะถูก จำกัด สำหรับการตรวจหาค่าขนาดเล็กมากตัวเลขของดีเอ็นเอเป้าหมาย ในบางลักษณะอาหารและอาหารที่ซับซ้อน การใช้ ddpcr เพล็กซ์ ( เรามีวัดตัวเลขที่แน่นอนของยีนยีนและ mon810 hmg ข้าวโพดอ้างอิงเล่มในตัวอย่างดีเอ็นเอ หลักประสิทธิภาพพารามิเตอร์ของการทดสอบ ตัวอย่างระบบ ddpcr แสดงให้ชัดเจนแน่นอนและสัมพันธ์กับปริมาณของเป้าหมาย โดยไม่ต้องใช้เส้นโค้งสอบเทียบ ความไว ( ห้าเป้าหมายดีเอ็นเอสำเนา ) ของ ddpcr การทดสอบเปรียบเทียบกับบุคคล qpcr ) และโรงดิจิตอลเทคนิค ( cdpcr ) วิธีการ มันมีช่วงไดนามิกมากกว่าคำสั่งของขนาด 4 , มากกว่าที่ cdpcr . นอกจากนี้เมื่อเทียบกับ qpcr , ddpcr assay พบว่าดีกว่าที่ความเข้มข้นต่ำ การกำหนดเป้าหมายและความอดทนมากขึ้นกับตัวยับยั้ง ในที่สุดก็ผ่าน ddpcr และต้นทุนที่ได้เปรียบเทียบกับบรรดา qpcr สำหรับรูทีนจีเอ็มโอปริมาณ . จึงสรุปได้ว่า ddpcr เทคโนโลยีสามารถนำมาใช้สำหรับปริมาณประจำวันของ GMOs ,หรืออื่น ๆโดเมนที่การวิเคราะห์เชิงปริมาณของอาหารและตัวอย่างอาหารที่จำเป็น