. An approximate 2.0 kb DNA frag- m

. An approximate 2.0 kb DNA frag- ment of cry2Al1 from pTZ57R/T-cry2Al1 recombinant cloning vec- tor and 5.4 kb fragment of pET22b (+) were gel eluted and purified using GeneJETTM Gel Extraction Kit (Fermentas life science, Mumbai, India). The full-length sequence of cry2Al1 gene was then ligated with pET-22b vector to generate the recombinant construct pET22b-cry2Al1


The ligated product was transformed into E. coli BL21 (DE3) pLysS and the positive clones obtained by selection
medium (LB agar supplemented with ampicillin 50 lg/ml) were
further confirmed by PCR and restriction analysis

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

. มีประมาณ 2.0 kb DNA frag-ment ของ cry2Al1 จาก pTZ57R/T-cry2Al1 recombinant โคลนวี-tor และ 5.4 kb ส่วนของ pET22b (+) ถูกเจ eluted และบริสุทธิ์โดยใช้ชุดดูด GeneJETTM เจล (Fermentas วิทยาศาสตร์ มุมไบ อินเดีย) ลำดับแบบเต็มตัวของยีน cry2Al1 ถูกแล้วกเดี่ยวกับ 22b สัตว์เวกเตอร์เพื่อสร้างสร้าง recombinant pET22b-cry2Al1ผลิตภัณฑ์ควบธีสซูส E. coli BL21 (DE3) pLysS และโคลนบวกได้ โดยเลือกมีขนาดกลาง (ปอนด์วุ้นเสริม ด้วยโกคอ 50 lg/ml)ยืนยัน โดย PCR และข้อจำกัดการวิเคราะห์เพิ่มเติม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

. ดีเอ็นเอประมาณ 2.0 KB frag- ment ของ cry2Al1 จาก pTZ57R / T-cry2Al1 recombinant โคลน Tor vec- และ 5.4 KB ส่วนของ pET22b (+) เป็นเจลชะบริสุทธิ์โดยใช้เจลสกัด GeneJETTM Kit (Fermentas วิทยาศาสตร์เพื่อชีวิต, มุมไบประเทศอินเดีย) ลำดับยาวเต็มรูปแบบของ cry2Al1 ยีน ligated แล้วกับสัตว์เลี้ยง 22b เวกเตอร์เพื่อสร้าง recombinant สร้าง pET22b-cry2Al1


ผลิตภัณฑ์ ligated ก็กลายเป็นเชื้อ E. coli BL21 (DE3) pLysS และโคลนบวกได้โดยการเลือก
ปานกลาง (LB agar เสริม กับ ampicillin 50 LG / มล.) ได้รับการ
ยืนยันต่อไปโดยวิธี PCR และการวิเคราะห์ข้อ จำกัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

. ประมาณ 2.0 - ment Frag บางครั้งดีเอ็นเอของ cry2al1 จาก ptz57r / t-cry2al1 แนนท์โคลนอีซี - เว็บและ 5.4 กิโลเบสของ pet22b ( + ) และชุดสกัดบริสุทธิ์ใช้ตัวอย่างเจลเจล genejettm ( fermentas ชีวิตวิทยาศาสตร์ , มุมไบ , อินเดีย ) ลำดับเต็มตัวของยีน cry2al1 แล้วผูกกับเวกเตอร์ pet-22b เพื่อสร้างโปรตีนที่สร้าง pet22b-cry2al1โดยผูกผลิตภัณฑ์เปลี่ยนเป็น E . coli BL21 ( DE3 ) plyss และโคลนได้โดยการเลือกบวกปานกลาง ( lb agar ที่เติมแอมพิ 50 LG / มิลลิลิตรยืนยันเพิ่มเติมด้วยเทคนิคการวิเคราะห์และการ จำกัด