The original green fluorescent prot

The original green fluorescent protein (GFP) was discovered back in the early 1960s when researchers studying the bioluminescent properties of the Aequorea victoria jellyfish isolated a blue-light-emitting bioluminescent protein called aequorin together with another protein that was eventually named the green-fluorescent protein (Shimomura et al., 1962). Aequorin and GFP work together in the light organs of A. victoria to convert Ca2+-induced luminescent signals into the green luminescence that is characteristic of the species (Chalfie and Kain, 2006). After GFP was cloned (Prasher et al., 1992), it was first used for tracking gene expression in bacteria and the sensory neurons of the nematode C. elegans (Chalfie et al., 1994). Jellyfish-derived GFP has since been engineered to produce a vast number of useful blue, cyan and yellow mutants, and fluorescent proteins from a variety of other species have also been identified, resulting in further expansion of the available color palette into the orange, red and far-red spectral regions (Matz et al., 1999; Shaner et al., 2004; Shaner et al., 2008; Shcherbo et al., 2009). Together, these highly useful genetically encoded probes are broadly referred to as fluorescent proteins (FPs) (Davidson and Campbell, 2009; Rizzo et al., 2010; Shaner et al., 2007).

In this article and the accompanying poster, we will describe some of the general properties of FPs that are important to their function. We will also provide examples of successful mutagenesis that has been used to improve the use of these proteins for live-cell imaging, particularly for mammalian studies. Particular emphasis will be given to some of the most popular and/or best performing FPs in various spectral regions (blue, cyan, green, yellow, orange, red and far-red). Finally, we will briefly present some other applications of FPs, as well as outline anticipated future improvements. This short article is meant to provide a flavor of the power and limitations of fluorescent protein technologies; comprehensive reviews of their biochemistry (Tsien, 1998), their uses and available probes (Day and Davidson, 2009; Rizzo et al., 2010) are available elsewhere.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โปรตีนเรืองแสงสีเขียวเดิม (GFP) ถูกค้นพบย้อนกลับไปในช่วงต้นทศวรรษ 1960 เมื่อนักวิจัยศึกษาคุณสมบัติเรืองแสงของแมงกะพรุน aequorea victoria แยกโปรตีนเรืองแสงสีฟ้าเปล่งแสงที่เรียกว่า aequorin ร่วมกับโปรตีนที่ในที่สุดก็มีการตั้งชื่อโปรตีนเรืองแสงสีเขียวอีก (Shimomura และคณะ. 1962)aequorin และ GFP ทำงานร่วมกันในอวัยวะของแสง victoria การแปลงสัญญาณเรืองแสง Ca2 เกิดเป็นแสงเรืองสีเขียวที่เป็นลักษณะของสายพันธุ์ (chalfie และ kain, 2006) หลังจาก gfp ถูกโคลน (prasher et al,., 1992) มันเป็นครั้งแรกที่ใช้สำหรับการติดตามการแสดงออกของยีนในแบคทีเรียและเซลล์ประสาทของพยาธิตัวกลมค elegans (chalfie และคณะ. 1994)GFP แมงกะพรุนมาตั้งแต่ได้รับการออกแบบมาเพื่อผลิตจำนวนมากมายของสีฟ้า, สีฟ้าและสีเหลืองกลายพันธุ์ที่มีประโยชน์และโปรตีนเรืองแสงจากความหลากหลายของสายพันธุ์อื่น ๆ นอกจากนี้ยังได้รับการระบุผลในการขยายตัวของจานสีที่มีอยู่ในสีส้ม, สีแดง และพื้นที่ห่างไกลสเปกตรัมสีแดง (แมทซ์และคณะ, 1999;. Shaner et al, 2004;. Shaner et al, 2008;.. shcherbo et al, 2009)

ในบทความนี้และโปสเตอร์ประกอบร่วมกันตรวจเหล่านี้มีประโยชน์อย่างมากเข้ารหัสพันธุกรรมจะกว้างกับโปรตีนเรืองแสงเป็น (fps) เรียก (Shaner et al, 2007 เดวิดสันและแคมป์เบล, 2009; Rizzo et al, 2010..). เราจะอธิบายบางส่วนของคุณสมบัติทั่วไปของเฟรมต่อวินาทีที่มีความสำคัญต่อการทำงานของพวกเขาเรายังจะให้ตัวอย่างของการกลายพันธุ์ที่ประสบความสำเร็จที่ได้รับการใช้ในการปรับปรุงการใช้งานของโปรตีนเหล่านี้สำหรับการถ่ายภาพที่อยู่อาศัยเซลล์โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาเลี้ยงลูกด้วยนม โดยเน้นเฉพาะจะได้รับบางส่วนของความนิยมมากที่สุดและ / หรือการปฏิบัติที่ดีที่สุดในภูมิภาคเฟรมต่อวินาทีสเปกตรัมต่างๆ (สีฟ้า, สีฟ้า, สีเขียว, สีเหลือง, สีส้ม, สีแดงและสีแดงไกล) ในที่สุดเราสั้นจะนำเสนอบางโปรแกรมอื่น ๆ ของเฟรมต่อวินาทีเช่นเดียวกับที่เค้าร่างที่คาดว่าการปรับปรุงในอนาคต บทความสั้น ๆ นี้มีขึ้นเพื่อให้รสชาติของอำนาจและข้อ จำกัด ของเทคโนโลยีโปรตีนเรืองแสง; ความคิดเห็นที่ครอบคลุมของชีวเคมีของพวกเขา (Tsien, 1998), การใช้งานของพวกเขาและรายได้ (วันและเดวิดสัน, 2009;. Rizzo et al, 2010) จะมี สามารถใช้ได้ที่อื่น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เดิมสีเขียวเรืองแสงโปรตีน (GFP) ถูกค้นพบในช่วงปี 1960 เมื่อนักวิจัยศึกษาคุณสมบัติ bioluminescent ของแมงกะพรุนวิคตอเรีย Aequorea แยกต่างหากเป็นสีน้ำเงินแสงเปล่ง bioluminescent โปรตีนเรียกว่า aequorin กับโปรตีนอื่นที่ในที่สุดชื่อว่าโปรตีนฟลูออเรสเซนต์เขียว (Shimomura et al., 1962) Aequorin และ GFP กันในอวัยวะอ่อนของวิคตอเรียอ.แปลง Ca2-เกิดสัญญาณ luminescent เป็น luminescence สีเขียวที่เป็นลักษณะของสายพันธุ์ (Chalfie และ Kain, 2006) หลังจากถูก cloned GFP (Prasher et al., 1992), เป็นครั้งแรกใช้สำหรับติดตามยีนในแบคทีเรียและ neurons ทางประสาทสัมผัสของนีมาโทดา C. elegans (Chalfie et al., 1994) วิศวกรรมมาแมงกะพรุน GFP ผลิตจำนวนสายพันธุ์สีน้ำเงิน สี และสีเหลืองมีประโยชน์มากมายตั้งแต่ และโปรตีนเรืองแสงจากหลากหลายสายพันธุ์อื่น ๆ ยังได้ ระบุ เกิดขึ้นในการขยายเพิ่มเติมของจานสีเป็นสีส้ม สีแดง และ far-red สเปกตรัมภูมิภาค (Matz et al., 1999 Shaner et al., 2004 Shaner et al., 2008 Shcherbo et al., 2009) กัน คลิปปากตะเข้เข้ารหัสแปลงพันธุกรรมเหล่านี้มีประโยชน์สูงทั่วไปอย่างเป็นโปรตีนเรืองแสง (FPs) (Davidson และแคมป์เบล 2009 Rizzo et al., 2010 Shaner et al., 2007)

ในบทความนี้และโปสเตอร์มา เราได้กล่าวถึงคุณสมบัติทั่วไปของ FPs ที่มีความสำคัญสำหรับการทำงานบางอย่าง นอกจากนี้เรายังจะมีตัวอย่างของ mutagenesis ประสบความสำเร็จที่ใช้ในการปรับปรุงการใช้โปรตีนเหล่านี้สำหรับภาพเซลล์สด โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษา mammalian เน้นเฉพาะจะได้รับของ FPs นิยมมากที่สุด หรือประสิทธิภาพดีที่สุดในภูมิภาคสเปกตรัมต่าง ๆ (สีน้ำเงิน สี สีเขียว สีเหลือง สีส้ม สีแดง และ far-red) สุดท้าย เราจะสั้น ๆ นำเสนอบางโปรแกรมประยุกต์อื่น ๆ ของ FPs ตลอดจนเค้าปรับปรุงในอนาคตที่คาดการณ์ไว้ บทความสั้น ๆ นี้จะหมายถึงให้รสชาติของอำนาจและข้อจำกัดของเทคโนโลยีโปรตีนเรืองแสง ครอบคลุมรีวิวนักชีวเคมี (Tsien, 1998), การใช้และคลิปปากตะเข้ว่าง (วันและ Davidson, 2009 Rizzo et al., 2010) อื่น ๆ มีการ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่เดิมสีเขียวฟลูออเรสเซนต์โปรตีน( gfp )ได้รับการสำรวจพบกลับไปในช่วงต้นปี 1960 s เมื่อนักวิจัยการศึกษา bioluminescent คุณสมบัติของที่ aequorea วิกตอเรียแมงกะพรุนถูกแยกออกจากกันที่สีฟ้า - แสง - emitting diode bioluminescent โปรตีนเรียกว่า aequorin เข้าด้วยกันพร้อมด้วยอีกคนหนึ่งที่เป็นโปรตีนที่ชื่อว่าในที่สุดสีเขียว - ฟลูออเรสเซนต์โปรตีน(. et al ., 1962 )aequorin gfp และทำงานร่วมกันในองค์กรของวิกตอเรีย A .เพื่อแปลงสัญญาณสว่างสดใส 2 - ทำให้ไม่เข้าไปใน luminescence สีเขียวที่มีลักษณะของสายพันธุ์( chalfie และ kain 2006 ) หลังจาก gfp ถูกจำลองไว้( prasher et al . 1992 )จะถูกใช้สำหรับการแสดงออกทางความคิดเห็นยีนแบคทีเรียในการติดตามและในข้อเท็จจริงถูกค้นพบในหัวไม่แข็งแรงของ elegans C .พยาธิตัวกลม( chalfie et al . 1994 )เป็นครั้งแรกแมงกะพรุน - มา gfp มีมาตั้งแต่การออกแบบการผลิตที่มีประโยชน์หลากหลายจำนวนของสีฟ้า,ฟ้าอมเขียวและสีเหลืองข้าวเจ้า,และฟลูออเรสเซนต์โปรตีนที่ได้จากความหลากหลายของสายพันธุ์อื่นๆยังมีการระบุให้ส่งผลให้การขยายตัวต่อไปในการที่มีสีสีเข้าไปในสีส้ม,สีแดงและสีแดงความยาวคลื่น ภูมิภาค ( matz et al ., 1999 ; shaner et al ., 2004 ; shaner et al ., 2008 ; shcherbo et al ., 2009 )ร่วมกันใช้ัคุณลักษณะ Teaming ,เข้ารหัสพันธุกรรมมีประโยชน์เป็นอย่างสูงและความสามารถเหล่านี้จะถูกอ้างถึงในชื่อโปรตีนฟลูออเรสเซนต์( fps )(เดวิดสันและ Port Campbell 2009 rizzo et al . 2010 shaner et al . 2007 )

ในข้อนี้และโปสเตอร์ให้มาพร้อมกับเราจะอธิบายถึงคุณสมบัติทั่วไปของ FPS ที่มีความสำคัญในการทำงานบางส่วนเราจะให้ตัวอย่างของผลผลิตประสบความสำเร็จที่ได้รับการนำไปใช้ในการปรับปรุงการใช้โปรตีนเหล่านี้เพื่อการถ่าย ภาพ แบบสดเซลล์โดยเฉพาะอย่างยิ่งสำหรับการศึกษาเกี่ยวกับสัตว์เลี้ยงลูกด้วยนมยัง การให้ความสำคัญอย่างใดอย่างหนึ่งจะได้รับมากที่สุด fps ,การทำงานและ/หรือที่ดีที่สุดในเขตพื้นที่ที่ได้รับความนิยมความยาวคลื่นต่างๆ(สีฟ้าฟ้าอมเขียวสีเขียวสีเหลืองสีส้มสีแดงและสีแดง)บางส่วน ในที่สุดเราจะแสดงแอปพลิเคชันอื่นบางอย่างของ FPS และขอบคาดว่าการปรับปรุงในอนาคตเป็นเวลาสั้นๆ ข้อเพื่อไปถึงได้ไม่ไกลนักโรงแรมแห่งนี้คือตั้งใจจะให้รสชาติของข้อจำกัดและการใช้พลังงานของเทคโนโลยีโปรตีนเรืองแสงการตรวจสอบที่ครอบคลุมของชีวเคมี( tsien 1998 )ของบริษัทแห่งนี้ใช้ของตนและการสอบถามมีให้เลือกใช้(วันและเดวิดสัน 2009 rizzo et al . 2010 )มีให้ในที่อื่นๆ