Comparing the three methods one has

Comparing the three methods one has to consider that the AOAC and the new iCheck CAROTENE method are very similar with regard to the quantification of the carotenoids. Both use the absorption at 450 nm and the extinction coefficient (E1%) of ß-carotene for the quantification as total carotenoids. But they are different with regard to the extraction procedure. However, the HPLC and the iCheck CAROTENE method are similar with regard to the extraction procedure and solvent composition. Both extract all carotenoids into hexane as organic solvent. Quantification was done at the same wavelengths but concentration was calculated using the HPLC method as individual carotenoids based on their individual extinction coefficients.



Greatest quantitative differences were observed between the AOAC method and the HPLC method, the later one being in average 27% lower. The new methods studied was in closer agreement with the AOAC methods (lower by 7% on average) and still in average 22% higher than the HPLC method. Thus, for both spectrophotometric methods the greatest differences were observed with the HPLC method indicating that the major reason lies in the quantification difference rather than in differences with regard to extraction because the amount of sample took as per recommended for complete extraction (Schweigert, Schierle, & Hurtinne, 2010).

It has also been reported that spectrophotometric methods tend to overestimate carotenoid content when compared to HPLC due to other compounds also detected, for example, carotenoid degradation products (Kimura, Cobori, Rodriguez-Amaya, & Nestel, 2007) and chlorophyll degradation products such as chlorophyllides which are also absorbing at similar wavelengths (Almela, Férnandez-Lopéz, & Roca, 2000) despite the fact that their increased polarity due to phytol cleavage would result only in small extractability in hexane (Chiba et al., 1967). Lower carotenoid concentrations in HPLC methods may also be explained by saponification losses due to the relatively harsh conditions of alkaline treatment (Biehler et al., 2010, Khachik et al., 1986, Oliver et al., 1998 and Rodriguez-Amaya and Kimura, 2004). Especially the polar carotenoids are sensitive to such conditions (Schweigert, Hurtienne, & Bathe, 2000). Although similar types of work have not been conducted in egg yolk it can be concluded for our results that the observed underestimation in the HPLC method might be due to one or the other mentioned reason. Finally, some unidentified carotenoids present in the egg yolk are missed in the calculation because of unknown chemical structure (no external standards available) or concentrations at detection level. In our study we estimated that this can account for up to 10% of the difference. In another experiment with egg yolk the results of the iCheck method were in average 12% higher compared to results obtained by HPLC (Schweigert et al., 2010).

According to Pearson’s correlation analysis (Table 1) values from the iCheck CAROTENE method have a close relationship with the values obtained by AOAC methods with an average of r2 of 0.99 ranging from 0.82 (free range duck) to 1.00 (free range chicken). The relationship between the values obtained by the iCheck and HPLC method was in average r2 of 0.94 ranging from 0.85 (free range duck) to 1.00 (free range chicken) ( Fig. 1 and Fig. 2). With such high average r2 value the agreement can be interpreted as almost perfect. Raila, Enjalbert, Mothes, Hurtienne, and Schweigert (2012) also demonstrated that both the iCheck and HPLC method showed a very good agreement based on correlation coefficient of r2 > 0.98; (p < 0.001). In this case ß-carotene was determined in cattle blood plasma and results were compared to HPLC analysis. Results of this study support the good agreement between the new method and standard methods such as spectroscopy or HPLC.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เปรียบเทียบสามวิธีหนึ่งได้พิจารณาใน AOAC และวิธีแคโรทีน iCheck ใหม่คล้ายกับการนับของ carotenoids ทั้งสองใช้ดูดซึมที่ 450 nm และสัมประสิทธิ์สูญพันธุ์ (E1%) ของบาทแคโรทีนสำหรับนับเป็น carotenoids รวม แต่จะแตกต่างกันตามกระบวนการแยก อย่างไรก็ตาม การ HPLC และวิธีแคโรทีน iCheck จะคล้ายกับองค์ประกอบกระบวนการและตัวทำละลายสกัด ทั้งดึงทั้งหมด carotenoids ในเฮกเซนเป็นตัวทำละลายอินทรีย์ ทำที่ความยาวคลื่นเดียวกันนับ แต่มีคำนวณความเข้มข้นโดยใช้วิธี HPLC เป็น carotenoids ละตามสัมประสิทธิ์ของแต่ละดับความแตกต่างเชิงปริมาณมากที่สุดถูกพบระหว่างวิธี AOAC และวิธี HPLC หนึ่งภายในเฉลี่ย 27% ต่ำกว่า วิธีใหม่ที่ศึกษาอยู่ในข้อตกลงที่ใกล้ชิดกับวิธี AOAC (ต่ำกว่า 7% โดยเฉลี่ย) และยังอยู่ ในค่าเฉลี่ย 22% สูงกว่าวิธี HPLC ดังนั้น สำหรับวิธีทั้ง spectrophotometric ได้สังเกตความแตกต่างมากที่สุดด้วยวิธี HPLC ที่บ่งชี้ว่า เหตุผลสำคัญที่อยู่ ในความแตกต่างนับ แทน ในความแตกต่างตามสกัดเนื่องจากจำนวนตัวอย่างเอาตามเหมาะสำหรับสกัดสมบูรณ์ (Schweigert, Schierle, & Hurtinne, 2010)มันยังได้รายงานว่า วิธี spectrophotometric มักจะ overestimate carotenoid เนื้อหาเมื่อเทียบกับ HPLC เนื่องจากสารประกอบอื่น ๆ นอกจากนี้ยัง ตรวจพบ เช่น ผลิตภัณฑ์ย่อยสลาย carotenoid (คิมุระโย Cobori คาร็อดริเกซ & Nestel, 2007) และคลอโรฟิลล์ผลิตภัณฑ์ย่อยสลายเช่น chlorophyllides ซึ่งสามารถดูดซับที่คล้ายกันความยาวคลื่น (Almela, Férnandez Lopéz, & โร กา 2000) แม้ว่า ขั้วของพวกเขาเพิ่มขึ้นเนื่องจากปริ phytol จะทำเฉพาะใน extractability เล็กในเฮกเซน (ชิบะ et al, 1967) ยังสามารถอธิบายความเข้มข้นต่ำที่ carotenoid ในวิธี HPLC โดยขาดทุนสะพอนิฟิเนื่องจากเงื่อนไขของการรักษาด่างค่อนข้างรุนแรง (al. et Biehler, 2010, Khachik et al., 1986, Oliver et al., 1998 และ คาร็อดริเกซ และคิมุระ โย 2004) ได้ โดยเฉพาะอย่างยิ่ง carotenoids ขั้วโลกมีความไวต่อเงื่อนไขดังกล่าว (Schweigert, Hurtienne และอาบ น้ำ 2000) ถึงแม้ว่าไม่ได้ดำเนินงานชนิดที่คล้ายกันในไข่แดงสามารถสรุปได้ใน ผลของเรา underestimation สังเกตวิธี HPLC อาจมาจากหนึ่งหรืออื่น ๆ กล่าวถึงเหตุผล สุดท้าย carotenoids บางไม่ได้ระบุอยู่ในไข่แดงจะพลาดในการคำนวณเนื่องจากโครงสร้างทางเคมีไม่รู้จัก (ไม่ภายนอกมาตรฐานพร้อมใช้งาน) หรือความเข้มข้นระดับตรวจสอบ ในการศึกษาของ เราประมาณว่า นี้สามารถลงบัญชีถึง 10% ของผลต่าง ในอีกการทดลองกับไข่แดง ผลของวิธี iCheck ได้เฉลี่ย 12% สูงกว่าเมื่อเทียบกับผลที่ได้รับ โดย HPLC (Schweigert et al., 2010)ตามสหสัมพันธ์ของเพียร์สัน ค่าวิเคราะห์ (ตารางที่ 1) จากวิธีแคโรทีน iCheck มีความสัมพันธ์ที่ใกล้กับค่าที่ได้รับตามวิธี AOAC โดยเฉลี่ย r2 0.99 ตั้งแต่$ 0.82 (ช่วงฟรีเป็ด) 1.00 (ไก่ช่วงฟรี) ความสัมพันธ์ระหว่างค่าที่ได้รับ โดยวิธี HPLC และ iCheck อยู่ใน r2 เฉลี่ยของตั้งแต่ 0.85 (ช่วงฟรีเป็ด) 1.00 (ฟรีช่วงไก่) 0.94 (Fig. 1 และ Fig. 2) มีค่า r2 สูงเฉลี่ยเช่น ข้อตกลงที่สามารถตีความเป็นเกือบจะสมบูรณ์ Raila, Enjalbert, Mothes, Hurtienne และ Schweigert (2012) นอกจากนี้ยังสาธิตการที่ iCheck และวิธี HPLC พบว่าข้อตกลงที่ดีโดยใช้สัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ของ r2 > 0.98 (p < 0.001) ในกรณีนี้ กำหนดบาทแคโรทีนในพลาสมาเลือดวัว และผลลัพธ์ที่ได้เมื่อเทียบกับวิเคราะห์ HPLC ผลการศึกษานี้สนับสนุนข้อตกลงดีระหว่างวิธีใหม่และวิธีมาตรฐานเช่นกหรือ HPLC

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เปรียบเทียบสามวิธีการหนึ่งที่มีการพิจารณาว่า AOAC และวิธีการใหม่ iCheck แคโรทีนมีความคล้ายกันในเรื่องเกี่ยวกับปริมาณของนอยด์ ทั้งสองใช้การดูดซึมที่ 450 นาโนเมตรและค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ (E1%) ของเอสเอสแคโรทีนนอยด์เป็นปริมาณรวม แต่พวกเขามีความแตกต่างในเรื่องเกี่ยวกับขั้นตอนการสกัด อย่างไรก็ตาม HPLC และวิธี iCheck แคโรทีนที่มีความคล้ายคลึงในเรื่องเกี่ยวกับขั้นตอนการสกัดและองค์ประกอบตัวทำละลาย ทั้งสองแยก carotenoids ทั้งหมดลงในเฮกเซนเป็นตัวทำละลายอินทรีย์ ปริมาณที่ได้กระทำในช่วงความยาวคลื่นเดียวกัน แต่ความเข้มข้นที่คำนวณโดยใช้วิธี HPLC เป็น carotenoids บุคคลขึ้นอยู่กับค่าสัมประสิทธิ์การสูญเสียของแต่ละคน. ความแตกต่างเชิงปริมาณที่ยิ่งใหญ่ที่สุดที่พบระหว่างวิธี AOAC และวิธี HPLC หนึ่งต่อมาอยู่ในค่าเฉลี่ยที่ต่ำกว่า 27% วิธีการใหม่ที่ศึกษาอยู่ในข้อตกลงที่ใกล้ชิดกับวิธี AOAC (ลดลง 7% โดยเฉลี่ย) และยังคงอยู่ในค่าเฉลี่ย 22% สูงกว่าวิธี HPLC ดังนั้นสำหรับวิธีสเปกทั้งความแตกต่างที่ยิ่งใหญ่ที่สุดพบกับวิธี HPLC แสดงให้เห็นว่าเหตุผลสำคัญที่อยู่ในความแตกต่างของปริมาณมากกว่าในความแตกต่างในเรื่องเกี่ยวกับการสกัดเนื่องจากปริมาณของตัวอย่างเอาตามที่แนะนำสำหรับการสกัดฉบับสมบูรณ์ (Schweigert, Schierle, และ Hurtinne 2010). มันยังได้รับรายงานว่าวิธีสเปกมีแนวโน้มที่จะประเมินค่าสูงเนื้อหา carotenoid เมื่อเทียบกับ HPLC เนื่องจากสารประกอบอื่น ๆ นอกจากนี้ยังตรวจพบเช่น carotenoid ผลิตภัณฑ์ที่ย่อยสลาย (คิมูระ Cobori, Rodriguez-Amaya และ NESTEL 2007) และผลิตภัณฑ์ที่ย่อยสลายเช่นคลอโรฟิล chlorophyllides ซึ่งยังดูดซับในช่วงความยาวคลื่นที่คล้ายกัน (Almela, เฟอร์นันเดโลเปซและ Roca, 2000) แม้จะมีความจริงที่ว่าขั้วที่เพิ่มขึ้นเนื่องจากการ phytol แตกแยกจะส่งผลเฉพาะในสกัดขนาดเล็กในเฮกเซน (ชิบะและคณะ 1967) ที่ต่ำกว่าความเข้มข้น carotenoid ในวิธี HPLC ก็อาจจะอธิบายได้ด้วยการสูญเสียสะพอเนื่องจากสภาพค่อนข้างรุนแรงของการรักษาอัลคาไลน์ (Biehler et al., 2010, Khachik et al., 1986, โอลิเวอร์ et al., 1998 และ Rodriguez-Amaya และคิมูระ 2004) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง carotenoids ขั้วโลกมีความไวต่อเงื่อนไขดังกล่าว (Schweigert, Hurtienne และอาบน้ำ, 2000) แม้ว่าลักษณะคล้ายคลึงกันของการทำงานที่ไม่ได้รับการดำเนินการในไข่แดงจะสามารถสรุปเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ของเราที่เบาสังเกตวิธี HPLC อาจจะเป็นเพราะหนึ่งหรือเหตุผลอื่น ๆ ที่กล่าวถึง สุดท้ายบาง carotenoids ไม่ปรากฏชื่ออยู่ในไข่แดงจะพลาดในการคำนวณเพราะโครงสร้างทางเคมีที่ไม่รู้จัก (ไม่มีมาตรฐานภายนอกมี) หรือความเข้มข้นในระดับการตรวจสอบ ในการศึกษาของเราที่เราคาดว่านี้สามารถอธิบายได้ถึง 10% ของความแตกต่าง ในการทดลองกับไข่แดงอีกผลของวิธีการ iCheck อยู่ในค่าเฉลี่ย 12% สูงขึ้นเมื่อเทียบกับผลที่ได้รับโดยวิธี HPLC (Schweigert et al., 2010). ตามการวิเคราะห์ความสัมพันธ์ของเพียร์สัน (ตารางที่ 1) ค่าจากวิธี iCheck แคโรทีนมี ความสัมพันธ์ที่ใกล้ชิดกับค่าที่ได้โดยวิธี AOAC กับค่าเฉลี่ยของ r2 0.99 ตั้งแต่ 0.82 (เป็ดช่วงฟรี) เพื่อ 1.00 (ไก่ช่วงฟรี) ความสัมพันธ์ระหว่างค่าที่ได้โดยวิธี HPLC iCheck และอยู่ใน r2 เฉลี่ย 0.94 ตั้งแต่ 0.85 (เป็ดช่วงฟรี) เพื่อ 1.00 (ไก่ฟรีช่วง) (รูปที่. 1 และรูปที่ 2). ด้วยค่า r2 เฉลี่ยสูงเช่นสัญญาสามารถตีความได้ว่าเกือบจะสมบูรณ์แบบ Raila, Enjalbert, Mothes, Hurtienne และ Schweigert (2012) นอกจากนี้ยังแสดงให้เห็นว่าทั้งสอง iCheck และวิธี HPLC พบว่ามีข้อตกลงที่ดีมากขึ้นอยู่กับค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ของ r2> 0.98; (p <0.001) ในกรณีนี้เอสเอสแคโรทีนที่ถูกกำหนดในเลือดวัวและผลที่ได้รับเมื่อเทียบกับการวิเคราะห์ HPLC ผลการศึกษานี้สนับสนุนข้อตกลงที่ดีระหว่างวิธีการใหม่และวิธีการมาตรฐานเช่นสเปกโทรสโกหรือ HPLC

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เปรียบเทียบสามวิธี หนึ่งจะต้องพิจารณาว่า องศา เซลเซียส และวิธีการใหม่ icheck แคโรทีนจะคล้ายกันมากกับการปริมาณของแคโรทีนอยด์ . ใช้ทั้งการดูดซึม 450 nm และค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ ( E1 ) ของß - แคโรทีนสำหรับปริมาณเป็นแคโรทีนอยด์ทั้งหมด แต่พวกเขาจะแตกต่างกันเกี่ยวกับขั้นตอนการสกัด อย่างไรก็ตามกรัม และ icheck แคโรทีนวิธีคล้ายกันที่เกี่ยวข้องกับขั้นตอนการสกัดตัวทำละลายและองค์ประกอบ ทั้งสารสกัดแคโรทีนอยด์ในเฮกเซนเป็นตัวทำละลายอินทรีย์ ปริมาณคือที่ความยาวคลื่นเดียวกัน แต่ปริมาณคำนวณโดยใช้ HPLC วิธีการของแต่ละบุคคลขึ้นอยู่กับค่าสัมประสิทธิ์การสูญพันธุ์ของ carotenoids .



มากที่สุด พบว่ามีปริมาณความแตกต่างระหว่างวิธีการและไม่พบวิธีใหม่ในการเฉลี่ย 27% ลดลง วิธีการใหม่ในข้อตกลงกับวิธีการ ( ไม่ต่ำกว่า 7 % โดยเฉลี่ย ) และยังคงเฉลี่ย 22% สูงกว่าโดยวิธี ดังนั้นทั้งสองวิธี พบว่ามีความแตกต่างมากที่สุด ) ด้วยวิธี HPLC ระบุว่าเหตุผลหลักอยู่ในปริมาณความแตกต่างมากกว่าความแตกต่างเกี่ยวกับการสกัดเพราะปริมาณของตัวอย่างได้ตามที่แนะนำในการสกัดสมบูรณ์ ( schweigert schierle & hurtinne , , ,

) )มีรายงานว่า วิธีการ ) มีแนวโน้ม อย่ามองข้ามในเนื้อหาเมื่อเทียบกับอื่น ๆและเนื่องจากตรวจพบสาร นอกจากนี้ ตัวอย่าง ผลิตภัณฑ์ย่อยสลายคาโรทีนอยด์ ( คิมูระ cobori Rodriguez , Amaya & nestel , 2007 ) และคลอโรฟิลล์ การย่อยสลายผลิตภัณฑ์ เช่น chlorophyllides ซึ่งยังดูดซับที่ความยาวคลื่นที่คล้ายกัน ( almela F é rnandez ลพบุรี บริษัท ซี &โรค่า2000 ) แม้จะมีความจริงที่ว่าพวกเขาเพิ่มขึ้นเนื่องจากความแตกแยกขั้วไฟทอลจะส่งผลเพียงเล็กการตัดตอนในเฮกเซน ( ชิบะ et al . , 1967 ) ปริมาณแคโรทีนอยด์ลดวิธี HPLC ยังอาจจะอธิบายได้จากสปอนนิฟิเคชั่น เนื่องจากเงื่อนไขที่ค่อนข้างรุนแรงของการรักษาด่าง ( biehler et al . , 2010 , khachik et al . , 1986 , โอลิเวอร์ et al . ,1998 และ Rodriguez Amaya และคิมูระ , 2004 ) โดยเฉพาะอย่างยิ่ง carotenoids ขั้วต่อเงื่อนไขดังกล่าว ( schweigert hurtienne & , , อาบน้ำ , 2000 ) แม้ว่าลักษณะของงานยังไม่ได้ดำเนินการในไข่แดงมันสามารถสรุปจากที่สังเกตการการประเมินค่าต่ำไปในและวิธีการที่อาจจะเกิดจากหนึ่งหรืออื่น ๆที่กล่าวถึงเหตุผล ในที่สุดบางกลุ่มแคโรทีนอยด์ที่มีอยู่ในไข่แดงจะพลาดในการคำนวณ เพราะโครงสร้างทางเคมีที่ไม่รู้จัก ( มาตรฐานภายนอกไม่มี ) หรือระดับความเข้มข้นในการตรวจสอบ ในการศึกษาเราประมาณนี้ได้ถึง 10% ของความแตกต่างในการทดลองอีกกับไข่แดงจาก icheck วิธีเฉลี่ย 12% สูงกว่าเมื่อเทียบกับผลลัพธ์ที่ได้โดยวิธี HPLC ( schweigert et al . , 2010 ) .

ตามการวิเคราะห์สหสัมพันธ์ของเพียร์สัน ( ตารางที่ 1 ) ค่าจาก icheck แคโรทีนวิธีมีความสัมพันธ์ใกล้ชิดกับค่าที่ได้จากวิธีที่มีองศา เซลเซียส เฉลี่ยของอาร์ทู 0.99 ตั้งแต่ 0.82 ( ช่วงฟรี ) 1 .00 ( ไก่ช่วงฟรี ) ความสัมพันธ์ระหว่างค่าที่ได้จาก icheck HPLC ใน R2 และวิธีเฉลี่ย 0.94 ตั้งแต่ 0.85 ( ช่วงฟรี ) 1.00 ( ไก่ช่วงฟรี ) ( รูปที่ 1 และรูปที่ 2 ) ด้วยเช่นสูงปานกลาง R2 ค่าสัญญาสามารถตีความเป็นเกือบสมบูรณ์แบบ enjalbert Raila Mothes hurtienne , , , ,schweigert ( 2012 ) และยังพบว่าทั้ง 2 วิธีมีข้อตกลงและ icheck ดีมากตามค่าสัมประสิทธิ์สหสัมพันธ์ของ R2 > 0.98 ; ( P < 0.001 ) ในกรณีนี้ß - แคโรทีนถูกกำหนดในผลโคพลาสม่าในเลือดและเปรียบเทียบกับการวิเคราะห์ปริมาณซูโครส ผลการศึกษานี้สนับสนุนข้อตกลงที่ดีกับวิธีการใหม่และวิธีมาตรฐานเช่นสเปกโทรสโกปีหรือ HPLC .