PCL depolymerase activity was deter

PCL depolymerase activity was determined by the modified
method of Park et al. (2007) using p-nitrophenyl butyrate (pNPB) as
chromogenic substrate for esterase assay. This assaywas performed
after every 24 h up to the maximum of 120 h. Stock solution of pNPB
was prepared in acetonitrile. 0.3 mL of culture supernatant was
added to 2 mL buffer along with 25 mL substrate and 10 mL of
ethanol. The reaction mixture was incubated at 37
C for 20 min,
then OD was calculated at 410 nm through spectrophotometer. The
experiment was run in triplicate, a control was run in separate for
each experiment. One unit of enzyme was defined as the amount of
enzyme required to liberate 1 mmole of p-nitrophenol per min.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Depolymerase จำกัด(มหาชน)ได้กำหนดกิจกรรม โดยการปรับเปลี่ยนวิธีของพาร์ค et al. (2007) โดยใช้ p nitrophenyl butyrate (pNPB)พื้นผิวที่ chromogenic สำหรับทดสอบ esterase Assaywas นี้ทำหลังจากทุก 24 ชมได้สูงสุด 120 h. หุ้นโซลูชั่นของ pNPBถูกเตรียมใน acetonitrile 0.3 mL ของ supernatant วัฒนธรรมได้เพิ่มบัฟเฟอร์ 2 มล. 25 มล.พื้นผิวและ 10 mL ของเอทานอล มี incubated ผสมปฏิกิริยาที่ 37 C สำหรับ 20 นาทีแล้วคำนวณ OD ที่ 410 nm ผ่านเครื่องทดสอบกรดด่าง ที่ทดลองรันใน triplicate ตัวควบคุมถูกเรียกใช้ในการแยกการทดลองแต่ละ หน่วยหนึ่งของเอนไซม์ถูกกำหนดเป็นจำนวนเอนไซม์ที่จำเป็นต้องปลดปล่อย mmole 1 ของ p-nitrophenol ต่อนาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กิจกรรมบมจ depolymerase
ถูกกำหนดโดยปรับเปลี่ยนวิธีการของสวนet al, (2007) โดยใช้ P-Nitrophenyl butyrate (pNPB)
เป็นสารตั้งต้นสำหรับการทดสอบchromogenic esterase assaywas
นี้ดำเนินการทุกครั้งหลังจาก24 ชั่วโมงขึ้นไปสูงสุด 120 ชั่วโมง วิธีการแก้ปัญหาสต็อกของ pNPB
ถูกจัดทำขึ้นใน acetonitrile 0.3
มิลลิลิตรใสวัฒนธรรมที่ถูกเพิ่มเข้ามาใน2 บัฟเฟอร์มิลลิลิตรพร้อมกับพื้นผิว 25 มิลลิลิตรและ 10
มิลลิลิตรของเอทานอล ผสมปฏิกิริยาถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20
นาทีแล้วOD ที่คำนวณได้ที่ 410 นาโนเมตรผ่าน spectrophotometer
ทดลองทำงานในเพิ่มขึ้นสามเท่าการควบคุมได้ทำงานในที่แยกต่างหากสำหรับแต่ละการทดลอง
หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ที่ถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการปลดปล่อย 1 mmole ของ P-nitrophenol ต่อนาที

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จำกัด ( มหาชน ) depolymerase กิจกรรมถูกกำหนดโดยการแก้ไข
วิธีปาร์ค et al . ( 2007 ) ใช้ p-nitrophenyl บิว ( pnpb )
( การสนทนาผ่านข้อความโต้ตอบแบบทันทีสำหรับ , การทดสอบ นี้ assaywas ปฏิบัติ
หลังจากที่ทุก 24 ชั่วโมง สูงสุดถึง 120 หุ้นเอชโซลูชั่นของ pnpb
เตรียมในไน . 0.3 มิลลิลิตร นำวัฒนธรรม
เพิ่ม 2 มิลลิลิตร กันชน พร้อมกับ 25 มิลลิลิตร ( 10 มล.
เอทานอลปฏิกิริยาผสมบ่มที่ 37
C นาน 20 นาที แล้วจึงคำนวณ
OD ที่ 410 nm ผ่านวัสดุ
ทดลองวิ่งทั้งสามใบ , ควบคุมงานในที่แยกต่างหากสำหรับ
แต่ละ การทดลอง หนึ่งหน่วยของเอนไซม์ที่ถูกกำหนดไว้เป็นจํานวน
เอนไซม์ต้องปลดปล่อย 1 มิลลิโมลของ p-nitrophenol ต่อนาที