2. Materials and methods2.1. Induct

2. Materials and methods
2.1. Induction of antibiotic resistance in A. hydrophila
A. hydrophila AL98-C1B isolate obtained from MAS diseased channel catfish was used to determine whether resistance to
rifampicin or to novobiocin or to N + R was able to attenuate A. hydrophila AL98-C1B. After the most effective attenuation strategy was determined to be N + R, the N + R strategy was then used to attenuate the three highly virulent 2009 isolates (Table 1) of A. hydrophila. The identification of the four isolates has been published previously [19]. The archived isolates were recovered from frozen stocks (2 mL aliquots stored at −80 ◦C) and grown in tryptic soy broth (TSB) (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA) for 24 h at 28 ◦C. Novobiocin sodium salt and rifampicin were purchased from Promega (Madison, WI) and Sigma–Aldrich (St. Louis, MO), respectively. All A. hydrophila isolates were cultured in tryptic soy broth (TSB) containing different concentrations of N + R for 24 h at 28 ◦C. The initial concentration of N + R that allowed growth of A. hydrophila was 12.5 g/mL. After 20 passages of A. hydrophila in TSB containing the same or higher concentration of N + R, all three strains of A. hydrophila were able to grow in TSB containing 1600 g/mL of N + R. The three parent and N + R-resistant A. hydrophila strains were then grown on 5% sheep blood agar plates (Thermo Fisher Scientific Remel Products, Lenexa, KS) for bacterial identification. Bacteria isolates were identified by API 20E test (BioMerieux, Durham, NC) and gas chromatography analysis of fatty acid methyl ester using MIDI microbial identification system (MIDI, Newark, DE) according to established procedures [40].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1 การเหนี่ยวนำต้านทานยาปฏิชีวนะใน A. hydrophilaA. hydrophila AL98 C1B แยกได้จากปลาดุกช่องเส้นมาสถูกใช้เพื่อกำหนดว่าความต้านทานต่อrifampicin หรือ novobiocin หรือ N + R ได้ attenuate A. hydrophila AL98 C1B หลังจากอ่อนสุด กลยุทธ์ได้กำหนดเป็น N + R, N + R แล้วใช้กลยุทธ์การ attenuate สามสูง virulent 2009 แยก (ตารางที่ 1) ของ A. hydrophila รหัสของแยกสี่ได้รับการเผยแพร่ก่อนหน้านี้ [19] แยกเก็บถาวรถูกกู้จากหุ้นแช่แข็ง (2 mL aliquots เก็บที่ −80 ◦C) และโตในซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB) (วิทยาศาสตร์ Fisher พิตส์เบิร์ก PA) 24 ชมที่ 28 ◦C เกลือโซเดียม novobiocin และ rifampicin ซื้อจาก Promega (เมดิสัน WI) และซิก-Aldrich (St. Louis, MO), ตามลำดับ A. hydrophila แยกทั้งหมดมีอ่างในซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB) ที่ประกอบด้วยความเข้มข้นแตกต่างกัน N + R สำหรับ 24 ชมที่ 28 ◦C ความเข้มข้นเริ่มต้นของ N + R ที่สามารถเจริญเติบโตของ A. hydrophila ได้ 12.5 g/mL หลังจากทางเดินที่ 20 ของ A. hydrophila ใน TSB ประกอบด้วยเดียวกัน หรือสูงกว่าความเข้มข้นของ N + R สายพันธุ์ที่สามทั้งหมดของ A. hydrophila ไม่สามารถเติบโตใน TSB ประกอบด้วย 1600 g/mL ของ N + อาร์ ในหลักที่สาม และ N + R ทนแล้วได้ปลูกในแผ่น agar เลือดแกะ 5% (ผลิตภัณฑ์ Remel วิทยาศาสตร์ Fisher เทอร์โม Lenexa, KS) A. hydrophila สายพันธุ์สำหรับการระบุเชื้อแบคทีเรีย แบคทีเรียที่แยกได้ที่ระบุ โดยทดสอบ API 20E (BioMerieux เดอแรม NC) และการวิเคราะห์ chromatography ก๊าซกรดไขมัน methyl เอสใช้ MIDI ระบบการรหัสจุลินทรีย์ (MIDI นวร์ก DE) ตามขั้นตอนขึ้น [40]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การเหนี่ยวนำความต้านทานยาปฏิชีวนะใน A. hydrophila
เอ hydrophila แยก AL98-C1B ที่ได้รับจากช่องดุก MAS โรคถูกใช้ในการตรวจสอบว่าความต้านทานต่อการ
rifampicin หรือ Novobiocin หรือ N + R ก็สามารถที่จะผอม A. hydrophila AL98-C1B หลังจากที่กลยุทธ์การลดทอนประสิทธิภาพมากที่สุดก็ตัดสินใจที่จะเป็น N + R, กลยุทธ์ N + R ถูกนำมาใช้เพื่อลดทอนความรุนแรงในสามสูง 2,009 สายพันธุ์ (ตารางที่ 1) ของ A. hydrophila บัตรประจำตัวของสี่สายพันธุ์ได้รับการเผยแพร่ก่อนหน้านี้ [19] เชื้อที่เก็บไว้หายจากหุ้นแช่แข็ง (2 aliquots มิลลิลิตรเก็บไว้ที่ -80 ◦C) และที่ปลูกในน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB) (ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์, พิตต์สเบิร์ก) เป็นเวลา 24 ชั่วโมงวันที่ 28 ◦C เกลือโซเดียม Novobiocin และ rifampicin ที่ซื้อมาจาก Promega (Madison, WI) และ Sigma-Aldrich (เซนต์หลุยส์) ตามลำดับ ทุกสายพันธุ์ A. hydrophila เพาะเลี้ยงในน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB) ที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ N + R เป็นเวลา 24 ชั่วโมงวันที่ 28 ◦C ความเข้มข้นเริ่มต้นของ N + R ที่ได้รับอนุญาตการเจริญเติบโตของ A. hydrophila เป็น 12.5? g / มิลลิลิตร หลังจาก 20 ทางเดินของ A. hydrophila ใน TSB ที่มีความเข้มข้นเดียวกันหรือสูงขึ้นของ N + R ทั้งสามสายพันธุ์ของ A. hydrophila ก็สามารถที่จะเจริญเติบโตได้ใน TSB มี 1,600? g / มิลลิลิตร N + อาร์สามปกครองและ N + A. R ทน hydrophila สายพันธุ์ที่ปลูกแล้วเมื่อวันที่ 5% แผ่นวุ้นเลือดแกะ (เทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ผลิตภัณฑ์ Remel, เลเนซา, แคนซัส) เพื่อระบุตัวตนของแบคทีเรีย สายพันธุ์แบคทีเรียที่ถูกระบุโดยการทดสอบ API 20E (Biomerieux, Durham, NC) และการวิเคราะห์แก๊ส chromatography ของกรดไขมันเมทิลเอสเตอร์โดยใช้ระบบการระบุจุลินทรีย์ MIDI (MIDI, นวร์ก, DE) ตามขั้นตอนการจัดตั้งขึ้น [40]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . การต้านทานยาปฏิชีวนะใน A . hydrophila
A . hydrophila al98-c1b แยกได้จากแม่ป่วยช่องปลาดุกถูกใช้เพื่อตรวจสอบว่าต้านทาน
rifampicin หรือโนโวไบโอซินหรือ N R สามารถเจือจาง . hydrophila al98-c1b หลังจากที่กลยุทธ์ที่มีประสิทธิภาพมากที่สุดคือการกำหนดให้ n R ,n r กลยุทธ์จากนั้นใช้เจือจาง สามอย่างรุนแรง ( ตารางที่ 1 ) 2009 สายพันธุ์ A . hydrophila . กำหนดสี่สายพันธุ์ที่ได้รับการตีพิมพ์ก่อนหน้านี้ [ 19 ] เก็บเชื้อที่พบจากหุ้นแช่แข็ง ( 2 มล. เฉยๆเก็บไว้ที่− 80 ◦ C ) และปลูกในน้ำซุปถั่วเหลืองอาหาร ( TSB ) ( ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ , Pittsburgh , PA ) 24 H ที่ 28 ◦ Cเกลือและโซเดียมโนโวไบโอซิน rifampicin ซื้อมาจาก promega ( Madison , WI ) และ Sigma –ดิช ( St . Louis , MO ) ตามลำดับ A . hydrophila สายพันธุ์ที่เพาะเลี้ยงในอาหารน้ำซุปถั่วเหลือง ( TSB ) ที่มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ N R 24 H ที่ 28 ◦ C ความเข้มข้นเริ่มต้นของ N R ที่อนุญาตให้มีการเจริญเติบโตของ A . hydrophila 12.5  g / ml และหลังจาก 20 หัวข้อของการทดสอบใน TSB ที่มีเดียวกันหรือสูงกว่าความเข้มข้นของ r ทั้งหมด 3 สายพันธุ์ A . hydrophila สามารถเติบโตใน TSB ที่มี 1600  g / ml ของ เอ็น อาร์ สามพ่อแม่และ r-resistant . hydrophila สายพันธุ์ แล้วปลูกใน 5 % แกะเลือดวุ้นแผ่น ( เทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ remel ผลิตภัณฑ์ lenexa ) ) ชนิดของเชื้อแบคทีเรียแบคทีเรียไอโซเลทกลุ่มทดสอบ 20e API ( biomerieux , Durham , NC ) และการวิเคราะห์กรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ด้วยแก๊สโครมาโตกราฟีของระบบการใช้จุลินทรีย์ มิดิ ( MIDI , Newark , DE ) ตามก่อตั้งขั้นตอน [ 40 ]