Primary cultures of HCECs and in vi

Primary cultures of HCECs and in vitro hyperosmolarity model
Human donor corneoscleral tissues (

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัฒนธรรมหลักของ HCECs และ hyperosmolarity ในรุ่นเนื้อเยื่อมนุษย์บริจาค corneoscleral (< h 72 หลังความตาย) ไม่เหมาะสำหรับการใช้ทางคลินิก จากผู้บริจาคอายุ 19-67 ปี ได้รับจากสิงห์ตาธนาคารของเท็กซัส (Houston, TX) หลักHCECs มีอ่างในดี 12 แผ่นใช้ explants จากขอบล้อ limbal กระจกตาในการเสริมฮอร์โมน epidermal ปานกลาง (SHEM) ประกอบด้วย 5% FBS ที่ใช้ก่อนหน้านี้ของเราวิธี [24] Confluent หลักกระจกตา epithelial วัฒนธรรมในวันที่ 14 – 18 ได้เปลี่ยนไปเป็นเท่ากับปริมาตร (0.5 mL/ดี) ของซีรั่มฟรีขนาดกลาง (SHEM โดย FBS) ค้างคืน แล้วรับการรักษา 4 หรือ 24 h isosmotic (312 mOsM) หรือ hyperosmolar สื่อ (350, 400 หรือ 450mOsM), ซึ่งความสำเร็จ โดยการเพิ่ม (19, 44 หรือ 69 mM) โซเดียมคลอไรด์ (NaCl) Osmolarityสื่อวัฒนธรรมถูกวัด โดย osmometer ความดันไอที่ในของเหลวของร่างกายเคมีปฏิบัติทางคลินิกของโรงพยาบาลสโต้ (Houston, TX) เซลล์ที่รับการรักษา4 h lysed ในบัฟเฟอร์ RLT จากชุด Qiagen RNeasy พลัสมินิ และการสกัดอาร์เอ็นเอการวิเคราะห์ยีนนิพจน์ เซลล์ที่รับการรักษา 24-48 h ใช้สำหรับเช่น assays โปรตีนตะวันตกคืนในตา immunofluorescent หรือ immunohistochemical ย้อมสี มีการทดลองแต่ละทำซ้ำ 3-5 ครั้ง และข้อมูล representatively หรือทางสถิติแสดงในผลลัพธ์ด้วยตัวเลข

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลักของวัฒนธรรม และรูปแบบการ hcecs hyperosmolarity
มนุษย์ corneoscleral ผู้บริจาคเนื้อเยื่อ ( < 72 ชั่วโมงหลังความตาย ) ไม่เหมาะกับการใช้ทางคลินิก จากผู้บริจาค
อายุ 19 ถึง 67 ปี ได้มาจากสิงโตตาธนาคารแห่งเท็กซัส ( ฮูสตัน , เท็กซัส ) hcecs หลัก
เพาะเลี้ยงในจานอาหารก็ใช้จากกระจกตา limbal ใน
ขอบเสริมฮอร์โมน epidermal ขนาดกลาง ( เชม ) ที่ประกอบด้วย 5% FBS ใช้
ของเราก่อนหน้านี้วิธีการ [ 24 ] กระจู๋กระจี๋กระจกตาเยื่อวัฒนธรรมหลักใน 14 – 18 วันได้เปลี่ยนไป
( ปริมาณเท่ากับ 0.5 ml / ดี ) ของ serum-free ขนาดกลาง ( เชมโดยที่ FBS ) ค้างคืนแล้ว
ถือว่า 4 หรือ 24 H กับ isosmotic ( 312 mOsm ) หรือสื่อ ( hyperosmolar 350 , 400 หรือ 450
mOsm ) ซึ่งมีความโดยการเพิ่ม ( 1944 หรือ 69 มม. ) โซเดียมคลอไรด์ ( NaCl ) ที่ำ
ของวัฒนธรรมสื่อถูกวัดด้วยออสโมมิเตอร์ความดันในของเหลวในร่างกาย
ปฏิบัติการเคมีคลินิกของโรงพยาบาลเมโธดิสต์ ( ฮูสตัน , เท็กซัส ) เซลล์บำบัด
4 H ( lysed RLT กันชนจาก rneasy บวกเพิ่มในชุดมินิ และภายใต้การสกัดอาร์เอ็นเอ
ต่อการแสดงออกของยีนเซลล์บำบัด 24 - 48 ชั่วโมง ใช้วิธี Western blot โปรตีนเช่น
เป็น , หรือใน immunofluorescent staining แต่ละการทดลอง
ซ้ำ 3 – 5 ครั้ง และข้อมูลที่เป็นตัวอย่างและ / หรือข้อมูลที่นำเสนอในผล
กับตัวเลข