varieties and six Thai landraces and six French marigolds
(T. patula L.) as shown in Table 1 was extracted from
young marigold leaves using a modification of the cetyltrimethylammonium
bromide (CTAB) method (Doyle and
Doyle, 1987). Leaf tissue samples were ground to a fine
powder in liquid nitrogen and lysed with CTAB extraction
buffer (2% CTAB, 20mM EDTA, 100mM Tris–HCl, 1% Polyvinylpyrrolidone
(PVP), 1.4M NaCl and 0.1% sodium
bisulphite) plus 0.2% SDS. Protein was then removed by
extraction with 24:1 (v/v) chloroform–isoamyl alcohol.
DNAwas precipitated using isopropanol, washed with 70%
ethanol and resuspended in deionized water with RNase A
(final concentration 100mg/ml). DNA concentration was
determined using theNanoDrope1000 Spectrophotometer
(Thermoscientific, DE, USA).
พันธุ์และหกพันธุ์พื้นเมืองไทยและฝรั่งเศสหกดอกดาวเรือง
( T. patula L. ) ดังแสดงในตารางที่ 1 ถูกสกัดจาก
ใบดอกดาวเรืองหนุ่มสาวโดยใช้การปรับเปลี่ยนของ cetyltrimethylammonium ที่
โบรไมด์ (CTAB) วิธีการ (ดอยล์และ
ดอยล์, 1987) ตัวอย่างเนื้อเยื่อใบมาบดปรับ
ผงในไนโตรเจนเหลวและ lysed กับ CTAB สกัด
บัฟเฟอร์ (2% CTAB, 20mm EDTA, 100 มม Tris-HCl, 1% Polyvinylpyrrolidone
(PVP) 1.4M โซเดียมคลอไรด์และโซเดียม 0.1%
bisulphite) บวก 0.2% SDS โปรตีนจะถูกลบออกแล้วโดย
การสกัดด้วย 24: 1. (v / v) เครื่องดื่มแอลกอฮอล์คลอโรฟอร์ม isoamyl
DNAwas ตกตะกอนใช้ isopropanol ล้างด้วย 70%
เอทานอลและ resuspended ในน้ำปราศจากไอออนกับ RNase
(สุดท้ายเข้มข้น 100mg / ml) ความเข้มข้นของ DNA ถูก
คำนวณโดยใช้ theNanoDrope1000 Spectrophotometer
(Thermoscientific, DE, สหรัฐอเมริกา)
การแปล กรุณารอสักครู่..
