2.4. Vaccination of fish with N + R-resistant 2009 isolates of A.
hydrophila followed by challenge with virulent parents
Attenuated N + R-resistant A. hydrophila vaccines were cultured
in TSB broth at 28 ◦C with shaking at 125 rpm overnight before
vaccination. Channel catfish were vaccinated with four different
doses (4×105, 2×105, 1×105, and 5×104 CFU/fish) of antibiotic-resistant A. hydrophila in a total volume of 100 L by IP injection. The four vaccination doses were chosen because the vaccines at those doses failed to kill any channel catfish based on the results from the virulence studies. Nile tilapia fish were vaccinated with three different doses (2×108, 2×107, and 2×106 CFU/fish) of N + R-resistant mutants in a total volume of 100 L by IP injection. As sham-vaccination controls, 100 L of TSB was injected into each fish. A total of 60 fish were used in each treatment group (20 fish per tank, three replicates). At 14, 28, and 56 days post vaccination (dpv), fish were challenged with the parent isolate of A. hydrophila through IP injection. Mortalities were recorded for 14 days post challenge and the presence or absence of A. hydrophila in dead fish was determined as described earlier. Results of challenge were presented as relative percent of survival (RPS) as described previously [41]. RPS was calculated according to the following formula:RPS = [1−(vaccinated mortality/control mortality)]×100.
2.4 . วัคซีนของปลาด้วย r-resistant 2009 เชื้อ A . hydrophila โดยความท้าทายกับผู้ปกครองตาม
n r-resistant A . hydrophila รุนแรงเป็นวัคซีนที่ได้เพาะเลี้ยงใน broth TSB
ที่ 28 ◦ C เขย่า 125 รอบต่อนาทีข้ามคืนก่อน
วัคซีน ปลาดุกช่องให้วัคซีนในปริมาณที่แตกต่างกัน 4
( 4 × 2 × 105 , 105 , 1 × 105 และ 5 × 104 CFU / ปลา ) ของยาปฏิชีวนะที่ทน .ตับในปริมาณรวม 100 ลิตร โดยฉีด IP ทั้งสี่ถูกเลือกเพราะวัคซีนปริมาณวัคซีนที่ปริมาณผู้ล้มเหลวในการฆ่าปลาดุกช่องใดขึ้นอยู่กับผลจากความรุนแรงโดย ปลานิลปลาให้วัคซีนแตกต่างกันสามขนาด ( 2 × 108 , 2 × 2 × 106 และ 107 CFU / ปลา ) ของ r-resistant กลายพันธุ์ในปริมาตร 100 ลิตร โดยฉีด IPขณะที่การควบคุมการฉีดวัคซีนปลอม 100 L ของ TSB ถูกฉีดเข้าไปในปลาแต่ละ รวมปลา 60 ที่ใช้ในการรักษาแต่ละกลุ่ม ( ต่อถัง 20 ปลา 3 ซ้ำ ) ที่ 14 , 28 , 56 วัน หลังการฉีดวัคซีน ( dpv ) , ปลาถูกท้าทายกับพ่อแม่แยกของ A . hydrophila โดยฉีด IP mortalities บันทึก 14 วันโพสต์ความท้าทายและการแสดงตนหรือการขาด .ตับปลาตายไปถูกกำหนดตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ผลของความท้าทายที่ถูกนำเสนอเป็นร้อยละสัมพัทธ์ของการอยู่รอด ( RPS ) ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 41 ] โดยคำนวณตามสูตรต่อไปนี้ : RPS = [ − 1 ( วัคซีนมรณะ / ควบคุมอัตราการตาย ) ] × 100
การแปล กรุณารอสักครู่..