A dot blot (or slot blot) is a tech

A dot blot (or slot blot) is a technique in molecular biology used to detect biomolecules, and for detecting, analyzing, and identifying proteins. It represents a simplification of the northern blot, Southern blot, or western blot methods. In a dot blot the biomolecules to be detected are not first separated by electrophoresis. Instead, a mixture containing the molecule to be detected is applied directly on a membrane as a dot, and then is spotted through circular templates directly onto the membrane or paper substrate. This differs from the western blot because protein samples are not separated electrophoretically. This is then followed by detection by either nucleotide probes (for a northern blot and southern blot) or antibodies (for a western blot).

The technique offers significant savings in time, as chromatography or gel electrophoresis, and the complex blotting procedures for the gel are not required. However, it offers no information on the size of the target biomolecule. Furthermore, if two molecules of different sizes are detected, they will still appear as a single dot. Dot blots therefore can only confirm the presence or absence of a biomolecule or biomolecules which can be detected by the DNA probes or the antibody.

A radioactive sample can be hybridized to allow for the detection of variation between samples. The DNA is quantified and equal amounts are aliquoted into tubes in excess of the number of its targets in the samples, such as 10 µg for a plasmid and 1 µg for a PCR amplicon. These are denatured (NaOH and 95°C) and added to the wells where a vacuum sucks the water (with NaOH and NH4OAc) from underneath the membrane (nylon or nitrocellulose).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

คืนในจุดตา (หรือคืนในช่องตา) เป็นเทคนิคทางชีววิทยาโมเลกุลที่ใช้ในการตรวจหาชื่อโมเลกุลชีวภาพ และ การตรวจสอบ วิเคราะห์ ระบุโปรตีน แสดงรวบคืนในตาภาคเหนือ ภาคใต้คืนในตา หรือวิธีคืนในตาตะวันตก ในคืนในจุดตา ชื่อโมเลกุลชีวภาพถูกตรวจไม่แรกยอ electrophoresis แทน ส่วนผสมประกอบด้วยโมเลกุลสามารถตรวจจับจะใช้บนเมมเบรนเป็นจุด แล้ว ด่างผ่านแม่แบบวงกลมลงบนพื้นผิวเมมเบรนหรือกระดาษโดยตรง ซึ่งต่างจากตะวันตกคืนในตาเนื่องจากโปรตีนตัวอย่างจะแยก electrophoretically นี้แล้วตาม ด้วยการตรวจสอบ โดยคลิปปากตะเข้นิวคลีโอไทด์ (สำหรับคืนในตาภาคเหนือและภาคใต้คืนในตา) หรือแอนตี้ (สำหรับตะวันตกคืนในตา)

เทคนิคบริการสำคัญประหยัดเวลา electrophoresis chromatography หรือเจล และขั้นตอนซับซ้อน blotting สำหรับเจไม่ต้องการ อย่างไรก็ตาม มันมีข้อมูลไม่มีขนาดของโมเลกุลชีวภาพเป้าหมาย นอกจากนี้ ถ้าตรวจพบโมเลกุลสองขนาดแตกต่างกัน พวกเขายังจะปรากฏเป็นจุดเดียว กันบล็อทจุดจึงสามารถเฉพาะยืนยันสถานะการขาดงานของชีวโมเลกุลหรือชื่อโมเลกุลชีวภาพซึ่งสามารถตรวจพบได้ โดยคลิปปากตะเข้ดีเอ็นเอหรือแอนติบอดีได้

สามารถ hybridized อย่างกัมมันตรังสีให้ตรวจความผันแปรระหว่างตัวอย่างได้ Quantified ดีเอ็นเอ และจำนวนเท่า aliquoted ในท่อส่วนที่เกินจากจำนวนเป้าหมายของตัวอย่าง 10 ไมโครกรัมเป็นเครื่องสำหรับเป็น plasmid และ 1 ไมโครกรัมเป็นเครื่องสำหรับ PCR amplicon เหล่านี้เป็น denatured (NaOH และ 95° C) และเพิ่มลงในบ่อที่สุญญากาศครับน้ำ (NaOH และ NH4OAc) จากใต้เยื่อ (ไนล่อนหรือ nitrocellulose)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จุดดวง (หรือ blot ช่อง) เป็นเทคนิคทางอณูชีววิทยาที่ใช้ในการตรวจจับสารชีวโมเลกุลและการตรวจวิเคราะห์และระบุโปรตีน มันแสดงให้เห็นถึงความเรียบง่ายของ blot ภาคเหนือ, ภาคใต้ blot หรือวิธีการดวงตะวัน ในจุดลบสารชีวโมเลกุลที่จะถูกตรวจพบไม่ได้แยกออกจากกันเป็นครั้งแรกโดย electrophoresis แต่ส่วนผสมที่มีโมเลกุลที่จะถูกตรวจพบถูกนำไปใช้โดยตรงในเมมเบรนเป็นจุดแล้วเป็นด่างผ่านแม่แบบวงกลมโดยตรงลงบนเยื่อหรือกระดาษพื้นผิว นี้แตกต่างจากดวงตะวันเพราะตัวอย่างโปรตีนไม่ได้แยกออกจากกัน electrophoretically นี้แล้วตามด้วยการตรวจสอบโดยการตรวจเบื่อหน่าย (สำหรับ blot ภาคเหนือและภาคใต้ blot) หรือแอนติบอดี (สำหรับดวงตะวัน) เทคนิคที่มีเงินออมที่สำคัญในเวลาที่โคหรือเจลอิเล็กและวิธีการซับซับซ้อนสำหรับเจล ไม่จำเป็นต้อง แต่ก็มีข้อมูลเกี่ยวกับขนาดของชีวโมเลกุลเป้าหมายที่ไม่มี นอกจากนี้หากสองโมเลกุลที่มีขนาดที่แตกต่างกันมีการตรวจพบที่พวกเขาจะยังคงปรากฏเป็นจุดเดียว blots จุดจึงสามารถยืนยันได้เพียงการแสดงตนหรือไม่มีตัวตนของชีวโมเลกุลหรือสารชีวโมเลกุลที่สามารถตรวจพบโดยการตรวจดีเอ็นเอหรือแอนติบอดีตัวอย่างกัมมันตรังสีสามารถไฮบริดที่จะอนุญาตให้มีการตรวจสอบของความแตกต่างระหว่างกลุ่มตัวอย่าง DNA เป็นวัดและจำนวนเงินเท่ากัน aliquoted ลงในหลอดเกินกว่าจำนวนเป้าหมายในตัวอย่างเช่น 10 ไมโครกรัมสำหรับพลาสมิดและ 1 ไมโครกรัมสำหรับ amplicon PCR เหล่านี้จะมีเอทิลแอลกอฮอล์ (NaOH และ 95 ° C) และเพิ่มบ่อที่สูญญากาศดูดน้ำ (มี NaOH และ NH4OAc) จากใต้เยื่อหุ้มเซลล์ (ไนลอนหรือ nitrocellulose)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จุดด่างพร้อย ( หรือ Slot blot ) เป็นเทคนิคทางอณูชีววิทยาใช้ตรวจจับความร้อน และการ วิเคราะห์และระบุโปรตีน มันเป็นหนึ่งเดียวของ blot , ภาคเหนือของ Southern blot หรือ Western blot วิธี ใน dot blot สารชีวโมเลกุล ที่จะถูกตรวจพบเป็นครั้งแรกโดยแยกเรส แทนส่วนผสมที่ประกอบด้วยโมเลกุลที่จะถูกตรวจพบใช้โดยตรงบนเมมเบรนเป็นจุด และเป็นจุดผ่านแม่แบบวงกลมโดยตรงลงบนแผ่นกระดาษหรือพื้นผิว . นี้แตกต่างจาก blot ตะวันตกเพราะตัวอย่างโปรตีนแยกจากกันไม่ได้ electrophoretically .นี้แล้วตามด้วยการตรวจหาลำดับเบสด้วยโพรบ ( Blot ภาคเหนือและ Southern blot ) หรือแอนติบอดี ( Western Blot )

เทคนิคมีการออมในเวลาที่เป็นเทคนิค หรือ เจล และวิธีที่ซับซ้อนขั้นตอนการเจลไม่ต้อง อย่างไรก็ตาม มันมีข้อมูลเกี่ยวกับขนาดของชีวโมเลกุลของเป้าหมาย นอกจากนี้ถ้าสองโมเลกุลขนาดต่าง ๆ ถูกจับได้ พวกเขาจะยังคงปรากฏเป็นจุดเดียว จุดไม้จึงสามารถยืนยันการแสดงตนหรือการขาดงานของโมเลกุลชีวภาพหรือสารชีวโมเลกุล ซึ่งสามารถตรวจพบโดย DNA probes หรือแอนติบอดี

ตัวอย่างสารกัมมันตรังสีสามารถผสมพันธุ์เพื่อให้ตรวจหาความผันแปรระหว่างตัวอย่างดีเอ็นเอตรวจปริมาณเท่ากับจะ aliquoted เป็นท่อในส่วนที่เกินจากจำนวนของเป้าหมายในตัวอย่าง เช่น 10 µกรัม ใน 1 µกรัมสำหรับ PCR และ . เหล่านี้จะใช้ ( NaOH และ 95 องศา C ) และเพิ่มไปยังบ่อที่เครื่องดูดฝุ่นดูดน้ำ ( ด้วย NaOH และ nh4oac ) จากใต้เยื่อแผ่นไนลอนหรือไนโตร )