กิจกรรม ACC deaminase ถูกดัดแปลงวิธีการ
ซึ่งวัดปริมาณการผลิตของα-ketobutyrate
เมื่อมีการย่อยสลาย ACC จำนวนของไมโครโมลของ
ผลิต Α-ketobutyrate โดยปฏิกิริยานี้ถูกกำหนดโดย
เปรียบเทียบค่าที่ 540 nm ของกราฟมาตรฐาน
α-ketobutyrate ขนาดระหว่าง 10 ถึง 200 ไมโครโมล
stock
solution
ในสารละลาย α-ketobutyrate 100 mmoL L-1 ใน
0.1 moL L-1 Tris– HCl (pH 8.5) และเก็บไว้ที่ 4 องศาเซลเซียส
เพียงแค่ก่อนที่จะใช้
สต็อกถูกเจือจาง ด้วยบัฟเฟอร์ที่เดียวกันเพื่อให้
10 mmoL L-1 ของโซลูชัน จากความเข้มข้นมาตรฐาน
ในที่นี้ เราจะรู้ความเข้มข้นของ α-ketobutyrate
สาร 2, 4-dinitrophenyl-ไฮดราซีน reagent,2 มล.
(0.2% 2, 4-dinitrophenyl-ไฮดราซีนใน 2 moL L-1 HCl) เติมลงไป
จากนั้นนำไป vortexed และบ่มที่อุณหภูมิ 30° C เป็นเวลา 30 นาที ในระหว่าง
ที่ α-ketobutyrate เป็น derivative(อนุพันธุ์) aphenylhydrazine
สีของ phenyl hydrazine เปลี่ยนไป โดยการเติม 2 มิลลิลิตร
NaOH 2 moL L-1 หลังจากหลังนำไปวัดค่าการดูดกลืนแลงที่ความยาวคลื่น
ที่ 540 nm