Worker bees of A. mellifera were ob

Worker bees of A. mellifera were obtained from the apiary of Huazhong Agriculture University. Bees were fed with sucrose solution daily and colonies were not treated with insecticides. Emerging honey bee adults (0 d) were collected from a colony during summer for bioassays. The silkworm we used is a hybrid of B. mori, Qiufeng 6Baiyu, which is the main variety used for commercial cocoon production in Southern China. Silkworm eggs were placed in an incubator set at 2560.5uC and 7565% relative humidity for hatching, and newly hatched larvae (neonates) were used in the bioassays. For honey bees, feeding behavior was evaluated following the protocols described by Han et al. [18]. Emerging honey bees were kept in cages (15 6 10 6 20 cm) [36] with the top face covered with a piece of mesh, and they were used for the experiments after a 1-day period of adaptation to rearing conditions. Conventional cotton pollen, ZMSJ cotton pollen, and ZMKCKC cotton pollen were used in the experiments as three different treatments; Bt cotton pollen samples collected in July were used because they contained the highest amount of Bt toxin (see Table 1). Three different diets were prepared by mixing water, honey, and pollen at a ratio of 1:2:7 (weight) with no additional sugar provided. Five replicates (cage) were used per treatment with 40 bees per replicate, and during the bioassay process the honey bee mortality and pollen consumption were recorded daily. Honey bees were considered dead when they remained completely immobile, and they were removed from the cages every day [26]. After being exposed to the three different dietary treatments for 7 days, the surviving bees were prepared for the total hemocyte count (THC) experiment, in which 30 bees per treatment (five cages 6six bees) were used. THC (number/ml) was determined using a phase contrast microscope (406) with a hemocytometer [37]. For silkworms, experiments were performed following the protocols described by Li et al. with slight modification [38]. Based on the density of cotton pollen deposited naturally on leaves of mulberry plants [35] and Hansen’s study [39], two different densities of each type of Bt cotton pollen and conventional cotton pollen were obtained by suspending 10 and 100 mg of pollen in 1 ml distilled water. For Bt pollen, we used samples collected in 20th July. Based on the ELISA results in Table 1, the content of Bt toxins was calculated and the data were shown in Table 2. Fresh mulberry leaves were collected from the Mulberry Experiment Garden at Huazhong Agricultural University, which is situated far from the cotton fields. Leaf disks were cut using a 7.0 cm2-hole puncher and then dipped in the pollen suspension; the discs and suspension were shaken to ensure uniform distribution of pollen grains on the leaf surface. Under the microscope, the mean number of pollen grains on the leaves treated with 10 and 100 mg/ml pollen suspensions was approximately 900 and 8000 pollen grains/cm2, respectively. A non-pollen treatment, in which leaf disks were treated only with distilled water, served as the negative control. Each treatment was replicated six times with 10 neonates each time. Larvae were fed with treated leaves from birth to pupation. Both developmental phase and mortality were monitored for all individuals every day until pupation, and the weight of molting larvae (molters) for 1st to 4th instars was also measured. To evaluate the hemocyte concentration, another six replicates were used for each treatment with 10 neonates per replicate. Hemolymph was collected from 5th instar larvae on days 1 (V-1), 3 (V-3), 5 (V-5), and 7 (V-7), and THC (number/ml) was determined using a blood cell counter as described by Tu et al. [40]. We use six insects for each THC test.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผู้ปฏิบัติงานผึ้งของ A. mellifera ได้รับจาก apiary Huazhong เกษตรมหาวิทยาลัย ผึ้งที่เลี้ยง ด้วยโซลูชันซูโครสทุกวัน และอาณานิคมได้ไม่รับการรักษา ด้วยยาฆ่าแมลง เกิดน้ำผึ้งผึ้งผู้ใหญ่ (0 d) ได้รวบรวมจากอาณานิคมที่ร้อนสำหรับ bioassays ไหมที่เราใช้เป็นผสมของโมริเกิด Qiufeng 6Baiyu ซึ่งเป็นอาหารหลักที่ใช้สำหรับการผลิตโคคูนเชิงพาณิชย์ในภาคใต้ของจีน ไข่ไหมไว้ใน incubator ที่ตั้งใน 2560.5uC และความชื้นสัมพัทธ์ 7565% สำหรับฟักไข่ และตัวอ่อนใหม่ขีด (neonates) ใช้ในการ bioassays สำหรับน้ำผึ้งผึ้ง อาหารพฤติกรรมถูกประเมินตามโพรโทคอลที่อธิบายโดย Han et al. [18] ผึ้งน้ำผึ้งเกิดเก็บไว้ในกรง (15 6 10 6 20 ซม.) [36] หน้าด้านบนปกคลุม ด้วยตาข่าย และพวกเขาใช้ในการทดลองหลังจากรอบระยะเวลา 1 วันของแม่สภาพการปรับตัว ละอองเกสรฝ้ายธรรมดา ละอองเกสรฝ้าย ZMSJ และ ZMKCKC ฝ้ายละอองเกสรถูกใช้ในการทดลองเป็น 3 รักษาแตกต่างกัน ใช้ตัวอย่างละอองเกสรฝ้ายบีทีในกรกฎาคมเนื่องจากพวกเขาประกอบด้วยยอดสูงสุดของสารพิษบีที (ดูตารางที่ 1) อาหารสามแตกต่างกันถูกเตรียมไว้ โดยผสมน้ำ น้ำผึ้ง และละอองเกสรที่อัตราส่วน 1:2:7 (น้ำหนัก) กับน้ำตาลไม่เพิ่มเติมให้ 5 สามารถจำลอง (กรง) ใช้สำหรับรักษากับผึ้ง 40 ต่อจำลอง และระหว่าง bioassay ผึ้งผึ้งตายและปริมาณละอองเกสรได้รับการบันทึกทุกวัน ผึ้งน้ำผึ้งถูกถือว่าตายเมื่อพวกเขายังคงสมบูรณ์ immobile และพวกเขาออกจากกรงทุกวัน [26] หลังจากการสัมผัสเพื่อรักษาอาหารแตกต่างกันสามวัน 7 ผึ้งรอดตายถูกเตรียมไว้สำหรับนับรวม hemocyte (THC) ทดลอง การใช้ผึ้ง 30 ต่อรักษากรงห้า 6six ผึ้ง) THC (จำนวน/มล.) ที่ถูกกำหนดด้วยกล้องจุลทรรศน์ระยะความคมชัด (406) hemocytometer [37] สำหรับ silkworms ทดลองได้ปฏิบัติตามโพรโทคอลที่อธิบายโดย Li et al. มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย [38] ขึ้นอยู่กับความหนาแน่นของละอองเกสรฝ้ายฝากตามธรรมชาติบนใบหม่อนพืช [35] และ [39] การศึกษาของแฮนเซ่น ความหนาแน่นแตกต่างกันสองของแต่ละชนิดของฝ้ายปกติละอองเกสรและละอองเกสรฝ้ายบีทีได้รับ โดยระงับ 10 และ 100 มิลลิกรัมของเรณูใน 1 ml กลั่นน้ำ ละอองเกสรบีที เราใช้ตัวอย่างที่เก็บรวบรวมในเดือน 20 กรกฎาคม ตามผล ELISA ในตารางที่ 1 เนื้อหาของสารพิษบีทีมีคำนวณ และข้อมูลที่แสดงในตารางที่ 2 หม่อนสดที่เก็บจากสวนทดลองหม่อน Huazhong เกษตรมหาวิทยาลัย ที่อยู่ไกลจากฝ้าย ใบดิสก์ถูกตัดโดยใช้เครื่องเจาะหลุม cm2 ที่ 7.0 แล้ว จุ่มลงในทางระงับ pollen ดิสก์และระบบกันสะเทือนถูกเขย่าให้กระจายสม่ำเสมอของ pollen ธัญพืชบนผิวใบไม้ ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ เฉลี่ยจำนวน pollen ธัญพืชบนใบรับบริการละอองเกสรของ 10 และ 100 mg/ml ได้ประมาณ 900 และ 8000 pollen ธัญพืช/cm2 ตามลำดับ รักษาไม่เป็นละอองเกสร ที่ใบดิสก์ได้รับการรักษา ด้วยน้ำกลั่น ทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมค่าลบ ทรีตเมนท์ถูกจำลองแบบหกครั้งกับเวลา 10 neonates ตัวอ่อนถูกเลี้ยง ด้วยใบไม้บำบัดจากเกิดการ pupation ขั้นตอนการพัฒนาและการตายได้ตรวจสอบสำหรับบุคคลทั้งหมดทุกวันจน pupation และน้ำหนักของ molting ตัวอ่อน (molters) สำหรับ 1-4 instars ถูกวัด เหมือนกับอีกหกถูกใช้เพื่อประเมินความเข้มข้น hemocyte สำหรับทรีตเมนท์โดย neonates 10 ต่อจำลอง Hemolymph รวบรวมจากตัวอ่อน instar 5 วัน 1 (V-1), 3 (V-3), 5 (V-5), และ 7 (V-7), และ THC (จำนวน/มล.) ถูกกำหนดโดยใช้ตัวนับเม็ดเลือดตามที่อธิบายไว้โดย Tu et al. [40] เราใช้แมลง 6 สำหรับแต่ละการทดสอบ THC

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผึ้งงานของ A. mellifera ที่ได้รับจากการเลี้ยงผึ้ง Huazhong เกษตรมหาวิทยาลัย ผึ้งได้รับการเลี้ยงดูด้วยสารละลายน้ำตาลซูโครสในชีวิตประจำวันและอาณานิคมที่ไม่ได้รับการรักษาด้วยยาฆ่าแมลง ที่เกิดขึ้นใหม่น้ำผึ้งผู้ใหญ่ผึ้ง (0 ง) ที่ถูกเก็บรวบรวมจากอาณานิคมในช่วงฤดู​​ร้อนสำหรับ bioassays ไหมที่เราใช้เป็นไฮบริดของ B. Mori, Qiufeng 6Baiyu ซึ่งเป็นความหลากหลายหลักที่ใช้สำหรับการผลิตเชิงพาณิชย์ในรังภาคใต้ของจีน ไข่ไหมถูกวางไว้ในตู้อบที่ตั้ง 2560.5uC และ 7565% ความชื้นสัมพัทธ์สำหรับฟักไข่และตัวอ่อนที่เพิ่งฟัก (ทารก) ถูกนำมาใช้ใน bioassays สำหรับผึ้งพฤติกรรมการให้อาหารต่อไปนี้ถูกประเมินโปรโตคอลที่อธิบายไว้โดยฮัน et al, [18] ผึ้งที่เกิดขึ้นใหม่จะถูกเก็บไว้ในกระชัง (15 6 10 6 20 เซนติเมตร) [36] กับใบหน้าด้านบนปกคลุมไปด้วยชิ้นส่วนของตาข่ายและพวกเขาถูกนำมาใช้สำหรับการทดลองหลังจากระยะเวลา 1 วันของการปรับตัวเพื่อการเลี้ยงเงื่อนไข ละอองเกสรดอกไม้ผ้าฝ้ายธรรมดา, ผ้าฝ้าย ZMSJ เรณูและละอองเกสรดอกไม้ผ้าฝ้าย ZMKCKC ถูกนำมาใช้ในการทดลองเป็นสามวิธีการรักษาที่แตกต่างกัน บาทตัวอย่างที่เก็บรวบรวมเกสรฝ้ายในเดือนกรกฎาคมถูกนำมาใช้เพราะพวกเขามีจำนวนเงินสูงสุดของสารพิษบาท (ดูตารางที่ 1) สามอาหารที่แตกต่างกันได้รับการจัดทำขึ้นโดยน้ำผสมน้ำผึ้งและเกสรในอัตราส่วน 1: 2: 7 (น้ำหนัก) ที่ไม่มีน้ำตาลให้เพิ่มเติม ห้าซ้ำ (กรง) ถูกนำมาใช้ต่อการรักษาด้วยผึ้งต่อ 40 ซ้ำและในระหว่างขั้นตอนการทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพที่การตายของผึ้งเกสรและการบริโภคในชีวิตประจำวันที่ถูกบันทึกไว้ ผึ้งได้รับการพิจารณาที่ตายแล้วเมื่อพวกเขายังคงไม่สามารถเคลื่อนที่ได้อย่างสมบูรณ์และพวกเขาจะถูกลบออกจากกรงทุกวัน [26] หลังจากได้รับการสัมผัสกับอาหารสามการรักษาที่แตกต่างกันเป็นเวลา 7 วัน, ผึ้งมีชีวิตรอดถูกเตรียมไว้สำหรับนับเซลล์เม็ดเลือดรวม (THC) การทดลองที่ 30 ผึ้งต่อการรักษา (ห้ากรง 6six ผึ้ง) ถูกนำมาใช้ THC (หมายเลข / มล.) ได้กำหนดขั้นตอนการใช้กล้องจุลทรรศน์ตรงกันข้าม (406) ที่มีการ hemocytometer [37] สำหรับดักแด้ทดลองได้ดำเนินการดังต่อไปนี้โปรโตคอลอธิบายโดย Li et al, มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย [38] ขึ้นอยู่กับความหนาแน่นของเรณูฝ้ายฝากตามธรรมชาติบนใบของพืชหม่อน [35] และการศึกษาของแฮนเซน [39] สองความหนาแน่นที่แตกต่างกันของแต่ละชนิดของเกสรฝ้ายบีทีและละอองเกสรดอกไม้ผ้าฝ้ายธรรมดาที่ได้รับจากการระงับ 10 และ 100 มก. ของเรณู 1 มล. น้ำกลั่น สำหรับเกสรบาทเราใช้ตัวอย่างที่เก็บรวบรวมได้ใน 20 กรกฎาคม ขึ้นอยู่กับผลการ ELISA ในตารางที่ 1 เนื้อหาของสารพิษบีทีที่คำนวณได้และข้อมูลที่แสดงในตารางที่ 2 ใบหม่อนสดที่ถูกเก็บรวบรวมจากสวนทดลองหม่อนที่ Huazhong มหาวิทยาลัยเกษตรซึ่งตั้งอยู่ห่างไกลจากสาขาฝ้าย แผ่นใบถูกตัดใช้ 7.0 cm2 เจาะหลุมแล้วจุ่มลงในการระงับเกสร; แผ่นและระงับถูกเขย่าเพื่อให้แน่ใจว่าการกระจายชุดของละอองเรณูบนพื้นผิวใบ ภายใต้กล้องจุลทรรศน์จำนวนเฉลี่ยของละอองเรณูบนใบรับการรักษาด้วย 10 และ 100 มก. / มลสารแขวนลอยเกสรประมาณ 900 8000 และละอองเรณู / cm2 ตามลำดับ การรักษาที่ไม่เกสรซึ่งในแผ่นใบได้รับการรักษาเฉพาะกับน้ำกลั่นทำหน้าที่เป็นผู้ควบคุมเชิงลบ การรักษาที่แต่ละคนได้รับการจำลองแบบหกครั้งมี 10 ทารกแรกเกิดในแต่ละครั้ง ตัวอ่อนได้รับการเลี้ยงดูที่มีใบได้รับการรักษาตั้งแต่แรกเกิดถึง pupation ทั้งขั้นตอนการพัฒนาและการเสียชีวิตถูกตรวจสอบสำหรับประชาชนทุกวันจนกว่า pupation และน้ำหนักของตัวอ่อนลอกคราบ (molters) สำหรับวันที่ 1 ถึง 4 วัยยังวัด เพื่อประเมินความเข้มข้นของเซลล์เม็ดเลือดอีกหกซ้ำถูกนำมาใช้ในการรักษาแต่ละคนมีต่อทารกแรกเกิด 10 ซ้ำ เลือดที่ถูกเก็บรวบรวมจากตัวอ่อนวัยที่ 5 ในวันที่ 1 (V-1), 3 (V-3), 5 (V-5) และ 7 (V-7) และ THC (หมายเลข / ml) ถูกกำหนดโดยใช้เลือด มือถือที่เคาน์เตอร์ตามที่อธิบาย et al, เฉิงตู [40] เราใช้หกแมลงสำหรับแต่ละการทดสอบ THC

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผึ้งงานของ A . mellifera ได้จาก ที่ มหาวิทยาลัยเกษตร Huazhong . ผึ้งเลี้ยงด้วยสารละลายซูโครสอาณานิคมทุกวันและไม่ได้รับการรักษาด้วยยาฆ่าแมลง ผึ้งผู้ใหญ่ที่เกิดขึ้นใหม่ ( 0 D ) ถูกเก็บจากอาณานิคมในช่วงฤดูร้อนให้ละเอียด . ไหมที่เราใช้เป็นลูกผสมของ โมริ 6baiyu qiufeng ,ซึ่งเป็นหลักที่ใช้ในการผลิตรังไหมพันธุ์เชิงพาณิชย์ในภาคใต้ของจีน ไข่ไหมอยู่ในตู้อบที่ตั้งไว้ และ 2560.5uc 7565 ความชื้นสัมพัทธ์สำหรับฟัก , ฟักใหม่ตัวอ่อน ( ทารก ) ถูกใช้ในละเอียด . ผึ้ง อาหาร พฤติกรรมที่ประเมินตามโปรโตคอลที่อธิบายโดย Han et al . [ 18 ]ผึ้งใหม่ ถูกขังไว้ในกรง ( 15 6 10 6 20 ซม. ) [ 36 ] กับด้านบนใบหน้าปกคลุมด้วยแผ่นตาข่ายและนำมาทดลองหลังจากช่วงระยะเวลาของการปรับตัวเพื่อการเลี้ยงดูเงื่อนไข เกสรฝ้ายปกติ zmsj ผ้าฝ้ายและผ้าฝ้าย zmkckc เกสรเกสร ถูกใช้ในการทดลองที่ 3 การรักษาที่แตกต่างกันฝ้ายบีทีในเดือนกรกฎาคมมีจำนวนเกสรใช้เพราะพวกเขามีปริมาณสูงสุดของสารพิษบาท ( ดูตารางที่ 1 ) 3 อาหารที่แตกต่างกันที่ถูกเตรียมไว้ โดยการผสมน้ำ น้ำผึ้ง เกสร ในอัตราส่วน 1:2:7 ( น้ำหนัก ) กับไม่เพิ่มน้ำตาลให้ ห้านาที ( กรง ) ใช้ต่อ การรักษาด้วยผึ้งต่อ 40 มากและในระหว่างกระบวนการพันธุ์ผึ้งและเกสรจากการบันทึกรายวัน ผึ้งก็ถือว่าตายเมื่อพวกเขายังคงสนิทไม่ไหวติง และพวกเขาถูกเอาออกจากกรงทุกวัน [ 26 ] หลังจากที่ถูกสัมผัสกับอาหารที่แตกต่างกันสามการรักษา 7 วัน รอดผึ้งถูกเตรียมไว้สำหรับนับ hemocyte ทั้งหมด ( THC ) ทดลองซึ่งในการรักษาผึ้งต่อ 30 ( ห้ากรง 6six ผึ้ง ) สถิติที่ใช้ THC ( ตัวเลข / ml ) คือการพิจารณาระยะความคมชัดกล้องจุลทรรศน์ ( 406 ) กับ hemocytometer [ 37 ] สำหรับหนอนไหม ทดลองตามโปรโตคอลที่อธิบายโดย Li et al . ด้วยการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย [ 38 ]ขึ้นอยู่กับความหนาแน่นของฝ้ายฝากตามธรรมชาติบนใบหม่อน เกสรพืช [ 35 ] และของแฮนเซนศึกษา [ 39 ] สองมีความหนาแน่นที่แตกต่างกันของแต่ละชนิดของเกสรดอกไม้ เกสรฝ้ายฝ้าย BT และปกติที่ได้รับจากการเรียน 10 และ 100 มิลลิกรัมต่อ 1 มิลลิลิตรของเรณูในน้ำกลั่น สำหรับ BT เกสร เราใช้จำนวนในวันที่ 20 กรกฎาคม ขึ้นอยู่กับวิธี ELISA ผลในตารางที่ 1เนื้อหาของ BT สารพิษถูกคำนวณและข้อมูลที่แสดงในตารางที่ 2 ใบหม่อนสด เก็บมาจากสวนหม่อน การทดลองที่มหาวิทยาลัยเกษตร Huazhong ซึ่งตั้งอยู่ไกลจากฝ้าย . แผ่นใบมีตัดใช้ 7.0 CM2 ตุ๊ดตู่เจาะกระดาษแล้วจุ่มลงในเกสรระงับ ;ดิสก์และการสั่นสะเทือนเพื่อให้แน่ใจว่าเครื่องแบบของละอองเรณูกระจายบนผิวใบ ภายใต้กล้องจุลทรรศน์ หมายถึงจำนวนของเรณูในใบที่ได้รับ 10 และ 100 มก. / มล. และเกสรช่วงล่างประมาณ 900 000 ละอองเรณู / cm2 ) การรักษาที่ไม่ใช่เกสรดอกไม้ ซึ่งในแผ่นใบปฏิบัติเฉพาะกับน้ำกลั่นทำหน้าที่ควบคุมลบ การรักษาแต่ละครั้งเป็นจำนวน 6 ครั้งกับ 10 ของทารกในแต่ละครั้ง ตัวอ่อนที่ได้รับการปล่อยจากวันเกิดว่า ทั้งระยะพัฒนาการ และอัตราการตายได้ตรวจสอบสำหรับบุคคลทุกๆ วันจนกระทั่งว่า และน้ำหนักของการลอกคราบของตัวอ่อน ( molters ) 1 - 4 โดยมีวัด เพื่อประเมิน hemocyte ความเข้มข้นอีก 6 นาที ที่ใช้สำหรับการรักษาแต่ละที่มี 10 ทุนต่อจําลอง สามารถเก็บรวบรวมข้อมูลจาก หนอน 5 วัน 1 ( V-1 ) , 3 ( v-3 ) , 5 ( v-5 ) , และ 7 ( v-7 ) และโครงสร้าง ( ตัวเลข / ml ) ใช้วิเคราะห์เลือดเซลล์นับตามที่อธิบายไว้โดย Tu et al . [ 40 ] เราใช้หกแมลงแต่ละงานทดสอบ