S. cerevisiae possess two catalase

S. cerevisiae possess two catalase isoforms, a peroxisomal/mitochondrial Cta1 [18] and an atypical cytosolic Ctt1 [19]. Hence, we next addressed the relative importance of each isoform in protecting cells against H2O2 challenge using the single catalase knockouts, ctt1∆ and cta1∆. Comparable catalase activity is induced in wild-type and cta1∆ YPH250 cells after H2O2 exposure ( Fig. 2A,B,D) but negligible catalase induction occurs in the ctt1∆ mutant strain ( Fig. 2C,D). Similar results were observed for the catalase knockouts in the BY4741 genetic background (data not shown). Combined, our data indicate that cytosolic Ctt1 activity is stimulated ~10-fold by exogenous H2O2 in YPD, consistent with the 15-fold increase in production of the Ctt1 protein on H2O2 challenge in SCD [10]. Furthermore, cta1∆ cells exhibit wild-type resistance to H2O2 ( Fig. 2E), whereas the ctt1∆ mutant exhibits H2O2 hypersensitivity with cell viability dropping by 30% on challenge with 0.2 mM H2O2 ( Fig. 2E). H2O2 challenge in YPD does not upregulate Cta1 activity ( Fig. 3C) and no increase in Cta1 protein levels were detected on H2O2 challenge in SCD [10]. Thus, we conclude that stimulation of cytosolic Ctt1 activity on H2O2 challenge in YPD is a critical factor in protecting cells against this ROS.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

S. cerevisiae มี isoforms catalase สอง เป็น peroxisomal/mitochondrial Cta1 [18] และ Ctt1 cytosolic การอักเสบ [19] ดังนั้น เราถัดไประบุความสำคัญของแต่ละ isoform ในการปกป้องเซลล์จากความท้าทาย H2O2 ใช้ catalase เดียว knockouts, ctt1∆ และ cta1∆ Catalase เทียบกิจกรรมเกิดจากในเซลล์ YPH250 ชนิดของป่าและ cta1∆ หลังจาก H2O2 แสง (Fig. 2A, B, D) แต่ catalase ระยะเหนี่ยวนำเกิดขึ้นใน ctt1∆ กลายพันธุ์สายพันธุ์ (Fig. 2C, D) ผลคล้ายสุภัคสำหรับ knockouts catalase BY4741 พันธุกรรมประกอบ (ข้อมูลไม่แสดง) รวม ข้อมูลบ่งชี้ว่า ถูกกระตุ้นกิจกรรม Ctt1 cytosolic ~ 10-fold โดย H2O2 บ่อยใน YPD สอดคล้องกับการเพิ่มขึ้นของ 15-fold ในการผลิตโปรตีน Ctt1 ในความท้าทาย H2O2 ใน SCD [10] นอกจากนี้ cta1∆ เซลล์แสดงชนิดของป่าความต้านทานต่อ H2O2 (Fig. 2E), โดย ctt1∆ mutant จัดแสดง H2O2 ที่ไวต่อยา ด้วยเซลล์ชีวิตวาง 30% บนความท้าทายกับ 0.2 mM H2O2 (Fig. 2E) ความท้าทายของ H2O2 ใน YPD ไม่ไม่ upregulate Cta1 กิจกรรม (Fig. 3C) และเพิ่มระดับโปรตีน Cta1 พบกับความท้าทาย H2O2 ใน SCD [10] ดังนั้น เราสรุปว่า กระตุ้น cytosolic Ctt1 กิจกรรมท้าทาย H2O2 ใน YPD ปัจจัยสำคัญในการปกป้องเซลล์จาก ROS นี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

S. cerevisiae มีสองไอโซฟอร์ม catalase, รอก / ยล Cta1 [18] และผิดปกติ cytosolic Ctt1 [19] ดังนั้นเราต่อไปที่ความสำคัญของแต่ละไอโซฟอร์มในการปกป้องเซลล์กับความท้าทาย H2O2 ใช้ knockouts catalase เดียวctt1Δและcta1Δ กิจกรรม catalase เทียบเคียงถูกเหนี่ยวนำให้เกิดในป่าชนิดและcta1Δเซลล์ YPH250 หลังจากได้รับ H2O2 (รูป. 2A, B, D) แต่เล็กน้อยเหนี่ยวนำ catalase เกิดขึ้นในctt1Δสายพันธุ์ (รูป. 2C, D) ผลที่คล้ายกันถูกตั้งข้อสังเกตสำหรับ catalase knockouts ในพื้นหลังทางพันธุกรรม BY4741 (ไม่ได้แสดงข้อมูล) รวมข้อมูลของเราแสดงให้เห็นว่ากิจกรรม Ctt1 cytosolic ถูกกระตุ้น ~ 10 เท่าโดย H2O2 ภายนอกใน YPD สอดคล้องกับการเพิ่มขึ้น 15 เท่าในการผลิตโปรตีน Ctt1 ท้าทาย H2O2 ใน SCD [10] นอกจากนี้เซลล์cta1Δแสดงความต้านทานป่าชนิด H2O2 (รูป. 2E) ในขณะที่การจัดแสดงนิทรรศการกลายพันธุ์ctt1Δแพ้ H2O2 ที่ลดลงมีชีวิตเซลล์ 30% ในความท้าทายกับ 0.2 มิลลิ H2O2 (รูป. 2E) ท้าทาย H2O2 ใน YPD ไม่ upregulate กิจกรรม Cta1 (รูป. 3C) และเพิ่มขึ้นใน Cta1 ระดับโปรตีนไม่ได้รับการตรวจพบในความท้าทาย H2O2 ใน SCD [10] ดังนั้นเราจึงสรุปได้ว่าการกระตุ้นของกิจกรรม cytosolic Ctt1 ท้าทาย H2O2 ใน YPD เป็นปัจจัยสำคัญในการปกป้องเซลล์กับ ROS นี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

S . cerevisiae มีสองสามารถต่อเป็น peroxisomal / ยล cta1 [ 18 ] และพิเศษ cytosolic ctt1 [ 19 ] ดังนั้น เราต่อไปกล่าวถึงความสำคัญสัมพัทธ์ของแต่ละไอโซฟอร์มในการปกป้องเซลล์กับความท้าทาย H2O2 ใช้ knockouts คะตะเลสโสด และ ctt1 ∆ cta1 ∆ . นักศึกษานำและเปรียบเป็นยา cta1 ∆ yph250 เซลล์หลังการสลาย ( รูปที่ 2A , B ,D ) แต่สามารถเหนี่ยวนำซึ่งเกิดขึ้นในสายพันธุ์กลายพันธุ์ ctt1 ∆ ( รูปที่ 2 C , D ) ผลที่คล้ายกันสามารถพบได้ใน knockouts ใน by4741 พันธุประวัติ ( ข้อมูลไม่แสดง ) รวมข้อมูลของเราบ่งชี้ว่า กิจกรรม ctt1 cytosolic ถูกกระตุ้น ~ 10 เท่าโดย H2O2 ใน ypd ภายนอก ,สอดคล้องกับ 15 พับเพิ่มในการผลิตของโปรตีนบนความท้าทายใน ctt1 H2O2 SCD [ 10 ] นอกจากนี้ cta1 ∆เซลล์แสดงความต้านทานของแบตเตอรี่ ( รูปที่ 2 ) และ ctt1 กลายพันธุ์มา∆ H2O2 1 กับเซลล์ลดลง 30% ในการท้าทายกับ 0.2 มิลลิเมตร แบตเตอรี่ ( รูปที่ 2 ) ความท้าทายใน ypd H2O2 ไม่ upregulate cta1 ( ภาพกิจกรรม3 C ) และไม่มีการเพิ่มระดับโปรตีนที่พบใน cta1 H2O2 ท้าทายใน SCD [ 10 ] ดังนั้นเราจึงสรุปได้ว่า การกระตุ้นกิจกรรม ctt1 H2O2 cytosolic บนความท้าทายใน ypd เป็นปัจจัยสําคัญในการปกป้องเซลล์ต่อผลตอบแทนนี้