A rapid and efficient one-tube PCR-

A rapid and efficient one-tube PCR-based mutagenesis technique using Pfu DNA polymerase.
The author sets out to describe the pcr in situ technique in comprehensible terms for both the surgical pathologist and the molecular biologist. Hence, the first two chapters are extremely basic, focusing on the structure of dna and defining the ‘jargon’ associated with molecular biology. In Chapter 3, the reader is finally introduced to the conventional pcr technique. The procedure, with associated limitations and pitfalls, is outlined very clearly in the text. The description of the effect of various tissue fixatives on the amplifiability of dna is particularly useful. However, the accompanying figure misses the mark, while filling three pages.

The fundamental problem of nonspecific amplification of dna is dealt with in Chapter 4, with the support of excellent illustrations. The key concept of ‘hot start’ is introduced as a means of improving both the specificity and sensitivity of conventional pcr and is cited in later chapters as essential to the success of in situ pcr.

Chapter 5 describes the classic in situ hybridization procedure. A detailed description of the technique is provided, augmented by photographs depicting the effects of protease treatment and tissue fixation on hybridization signals. Unfortunately, the use of black and white photography to illustrate the appearance of different counterstains and chromagens is counterproductive. While a few colour photos are provided, these are sequestered in a later section of the book. The reader must flip back and forth to make comparisons.

The remainder of the text deals with pcr in situ hybridization or in situ pcr. In the later case, labelled nucleotides are incorporated directly into the amplified product, precluding the hybridization step. The author emphasizes that the technique is still under development and as such the methods he describes “are most definitely not the final story”. Thus, while the procedure provides insight into the cellular and histological distribution of viral dna, rna and human mrna, the utility of the technique in the routine diagnostic laboratory is questionable.

In summary, the strength of the book lies in the emphasis placed on the use of appropriate controls and in providing excellent instructions and problem-solving algorithms. The author has gone to great lengths to build up gradually the expertise of the reader, such that the novice, as well as the expert molecular biologist, will be undaunted by the technology. For anyone contemplating using pcr in situ hybridization in a research setting, this book is invaluable.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

อย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพเทคนิคฉับหลอดหนึ่งที่ใช้วิธี PCR โดยใช้โพลีเมอ Pfu ดีเอ็นเอ.
ผู้เขียนชุดออกไปอธิบายเทคนิค PCR ในแหล่งกำเนิดในแง่ที่เข้าใจทั้งพยาธิวิทยาผ่าตัดและโมเลกุลชีววิทยา ดังนั้นสองบทแรกเป็นพื้นฐานมากมุ่งเน้นไปที่โครงสร้างของดีเอ็นเอและการกำหนด 'ศัพท์แสง' ที่เกี่ยวข้องกับชีววิทยาระดับโมเลกุล ในบทที่ 3 ผู้อ่านที่เป็นที่รู้จักในที่สุดก็ถึงเทคนิค PCR แบบเดิม ขั้นตอนที่มีข้อ จำกัด ที่เกี่ยวข้องและข้อผิดพลาดจะถูกระบุไว้อย่างชัดเจนในข้อความ คำอธิบายของผลกระทบของ fixatives เนื้อเยื่อต่างๆใน amplifiability ของดีเอ็นเอเป็นประโยชน์อย่างยิ่ง อย่างไรก็ตามรูปประกอบขาดเครื่องหมายในขณะที่เติมสามหน้า. ปัญหาพื้นฐานของการขยายเชิญชมของดีเอ็นเอจะจัดการกับในบทที่ 4 ด้วยการสนับสนุนของภาพที่ยอดเยี่ยม แนวคิดที่สำคัญของ 'เริ่มร้อน' ถูกนำมาเป็นเครื่องมือในการปรับปรุงทั้งความจำเพาะและความไวของ PCR การชุมนุมและมีการอ้างถึงในบทต่อมาก็เป็นสิ่งสำคัญต่อความสำเร็จของในแหล่งกำเนิดวิธี PCR. บทที่ 5 อธิบายคลาสสิกในแหล่งกำเนิดขั้นตอนการผสมพันธุ์ อธิบายรายละเอียดของเทคนิคที่มีให้เติมโดยการถ่ายภาพภาพวาดผลกระทบของการรักษาและโปรติเอสตรึงเนื้อเยื่อสัญญาณผสมพันธุ์ แต่น่าเสียดายที่การใช้งานของการถ่ายภาพขาวดำเพื่อแสดงให้เห็นถึงลักษณะของ counterstains แตกต่างกันและเป็น chromagens ต่อต้าน ในขณะที่ภาพสีที่มีให้ไม่กี่เหล่านี้จะถูกแยกในส่วนต่อมาของหนังสือเล่มนี้ ผู้อ่านจะต้องพลิกไปมาเพื่อทำการเปรียบเทียบ. ส่วนที่เหลือของข้อเสนอข้อความที่มี PCR ในแหล่งกำเนิดพันธุ์หรือในแหล่งกำเนิด PCR ในกรณีที่ต่อมานิวคลีโอที่มีข้อความจะรวมโดยตรงลงในผลิตภัณฑ์ขยาย, precluding ขั้นตอนการผสมพันธุ์ ผู้เขียนเน้นว่าเทคนิคที่ยังอยู่ภายใต้การพัฒนาและวิธีการดังกล่าวที่เขาอธิบาย "เป็นส่วนใหญ่แน่นอนไม่ได้เป็นเรื่องสุดท้าย" ดังนั้นในขณะที่ขั้นตอนการให้ข้อมูลเชิงลึกในการกระจายของเซลล์และเนื้อเยื่อของดีเอ็นเอไวรัส RNA และ mRNA มนุษย์ยูทิลิตี้ของเทคนิคในห้องปฏิบัติการประจำการวินิจฉัยเป็นที่น่าสงสัย. ในการสรุปความแข็งแรงของหนังสือเล่มนี้อยู่ในการเน้นวางอยู่บน การใช้งานของการควบคุมที่เหมาะสมและในการให้คำแนะนำที่ดีเยี่ยมและการแก้ปัญหาขั้นตอนวิธีการ ผู้เขียนได้ไปยาวมากที่จะสร้างขึ้นค่อยๆความเชี่ยวชาญของผู้อ่านเช่นว่าสามเณรเช่นเดียวกับนักชีววิทยาโมเลกุลผู้เชี่ยวชาญจะสะทกสะท้านเทคโนโลยี สำหรับทุกคนที่ใคร่ครวญโดยใช้วิธี PCR ในแหล่งกำเนิดพันธุ์ในการตั้งค่าการวิจัยหนังสือเล่มนี้เป็นสิ่งล้ำค่า

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เป็นอย่างรวดเร็วและมีประสิทธิภาพ หนึ่งหลอด PCR โดยใช้เทคนิคการกลายพันธุ์ของดีเอ็นเอพอลิเมอเรสพีเอฟยูตาม .
ผู้เขียนชุดออกเพื่ออธิบายเทคนิค PCR ในแหล่งกำเนิดในแง่ที่เข้าใจทั้งศัลยกรรมพยาธิวิทยาและนักชีววิทยาโมเลกุล ดังนั้น สองบทแรก เป็นสิ่งพื้นฐาน เน้นโครงสร้างของดีเอ็นเอและการกำหนด ' ภาษา ' เกี่ยวข้องกับชีววิทยาระดับโมเลกุล ในบทที่ 3ผู้อ่านจะได้รู้จักกับเทคนิค PCR ธรรมดา ขั้นตอนที่เกี่ยวข้องกับข้อ จำกัด และข้อผิดพลาดที่ถูกระบุไว้อย่างชัดเจนในข้อความ อธิบายผลของ fixatives เนื้อเยื่อต่าง ๆใน amplifiability ของ DNA ที่เป็นประโยชน์โดยเฉพาะอย่างยิ่ง อย่างไรก็ตาม ประกอบรูปขาดเครื่องหมาย ในขณะที่กรอกข้อมูล

สามหน้าปัญหาพื้นฐานของการติดเชื้อเพิ่มจำนวนดีเอ็นเอการแจกไพ่ในบทที่ 4 , ด้วยการสนับสนุนของภาพประกอบยอดเยี่ยม แนวคิดสำคัญของการเริ่มต้น ' ' ร้อน เป็นแนวทางในการปรับปรุงทั้งความจำและความไวของวิธี PCR ธรรมดา และอ้างในบทต่อมาเป็นสิ่งจำเป็นเพื่อความสำเร็จของ

ใน situ PCRบทที่ 5 กล่าวถึงคลาสสิกในขั้นตอน ( แหล่งกำเนิด รายละเอียดของเทคนิคคือ ให้เติมโดยภาพแสดงผลของการรักษาและการตรึงเอนไซม์โปรติเอสเนื้อเยื่อบนสัญญาณลูกผสม แต่น่าเสียดายที่ใช้ในการถ่ายภาพขาวดำและแสดงให้เห็นถึงลักษณะของ counterstains แตกต่างกันและ chromagens คือต่อต้านในขณะที่สีภาพถ่ายไม่กี่ให้เหล่านี้จะแยกในส่วนหลังของหนังสือ ผู้อ่านต้องพลิกไปมาเพื่อให้เปรียบเทียบ

ส่วนที่เหลือของข้อความที่เกี่ยวข้องกับ PCR ใน situ hybridization หรือใน situ PCR กรณีต่อมา เรียกว่า นิวคลีโอไทด์จะรวมโดยตรงลงในการขยายผลิตภัณฑ์และขั้นตอนเลเซ .ผู้เขียนเน้นว่าเทคนิคที่ยังอยู่ภายใต้การพัฒนาและเป็นเช่นวิธีการที่เขาอธิบายว่า " แน่นอนที่สุด ไม่ใช่เรื่อง " สุดท้าย ดังนั้น ในขณะที่กระบวนการให้ลึกเข้าไปในเซลล์ และการกระจายผลของไวรัสดีเอ็นเอ อาร์เอ็นเอ และการแสดงออกของมนุษย์ ประโยชน์ของเทคนิคในการวินิจฉัยทางห้องปฏิบัติการเป็นประจำ เป็นที่น่าสงสัย .

สรุปแล้วความแข็งแรงของหนังสืออยู่ในเน้นวางอยู่บนใช้ของการควบคุมที่เหมาะสม และให้คำแนะนำที่ยอดเยี่ยมและขั้นตอนวิธีการแก้ปัญหา ผู้เขียนได้พยายามอย่างมาก ที่จะสร้างขึ้นเรื่อย ๆความเชี่ยวชาญของผู้อ่าน เช่น สามเณร ตลอดจนผู้เชี่ยวชาญนักชีววิทยาโมเลกุล จะไม่ลดละ โดยเทคโนโลยีสำหรับใครที่คิดใช้ PCR ใน situ hybridization ในการตั้งค่า หนังสือเล่มนี้มีประโยชน์มาก