- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
Materials and MethodsStrainsStrains
Materials and Methods
Strains
Strains used in this work are conserved in ICFC (IIB-INTECH collection of Fungal Cultures, Laboratory of Mycology and Mushroom cultivation, IIB-INTECH; Chascomús, Argentina (reference in the WDCM data base: 826).
Pleurotus ostreatus
ICFC 153/99, commercial strain, 19-XI-1999, leg. E. Albertó; Gymnopilus pampeanus: ICFC 444/01, Capital Federal, Buenos Aires, Argentina; growing on Eucalyptus, 10-V-2001, leg E. Albertó; ICFC 548/03, Burzaco, Buenos Aires, Argentina, growing on Melia azedarach stalk, 15-11-2003, E. Albertó; Trichoderma sp: ICFC 767/12, Chascomús, Buenos Aires, Argentina; 12-VIII-2012. Leg. M. B. Colavolpe, isolated from P. ostreatus cultivation bag.
Spawn production
It was prepared following Pieckenstain et al. (1999). Briefly, glass bottles filled with boiled wheat grains and 1% w/w CaCO3 were sterilized for 1.5 h at 121 °C, cooled and inoculated with an agar plug (1 cm diam.) cut from the advancing margin of a 5-d-old colony grown on PDA (potato dextrose agar). Bottles were incubated in the dark, at 25 °C, with periodical shaking, during 15 days for Pleurotus and Trichoderma sp, and 30 days for Gymnopilus.
Trichoderma sp inoculum
Conidia of Trichoderma sp were massively produced using the spawn method. When spawning run period was finished, colonized bottles were left near a window at room temperature until the grains became all green colored due to the mature conidia. A suspension of Trichoderma sp conidia in distilled water was prepared. Colonized grains were immersed in distilled water under laminar flow; conidia were released by shaking. Then, water was filtered using cheesecloth and dropped into an Erlenmeyer flask. Concentration of conidia was adjusted to 105 conidia/mL using a Neubauer chamber. Conidia suspension was not stored; a new suspension was made evey time it was needed.
Substrate preparation
Chopped wheat straw, wheat seed, Populus or Eucalyptus sawdust were separately used. Substrates were subjected to different treatments (see next point), then immediately bagged in polypropylene bags (15 × 30 cm) containing 100 g of wet substrate with the addition of 1% w/w of CaCO3. After they reached room temperature, they were sprayed with 3 mL of water suspension of conidia of Trichoderma sp. per bag and mixed. Then, bags were inoculated with 10% of spawn of the mushroom used in each experiment (w/w) and afterwards they were stopped with cotton plugs held by PVC (polyvinyl chloride) cylinders.
Treatments of the substrate
Different treatments were carried out, 1) immersion in hot water: a thermal bath with automatic temperature regulation was used; substrates were placed during 30 min into the bath after reaching the temperature of treatment (60 or 80 °C), then they were drained and put on absorbent papers to adjust the humidity to 70% and finally bagged: 2) steam sterilization, substrates were firstly bagged, then tap water was added up to 70% of final humidity and sterilized during 2 h at 120 °C at 1.2 psi of pressure; 3) Immersion in alkalinized water: we used the methodology proposed by Contreras et al. (2004). Substrates were soaked into an alkaline solution prepared with 0, 5% of calcium oxide for 0, 5 min, 12 h, 24 h or 36 h.
Experimental design and cultivation conditions
Three experiments with different objectives were carried out. The first experiment was focused on the evaluation of the growth of the green mold Trichoderma sp after the steam sterilization treatment. Two strains and four different sterilized and non-sterilized substrates were used (Table 1); the following treatments were performed: T (Trichoderma sp spray inoculum), T + M (Trichoderma sp spray inoculum + mushroom spawn), and M (mushroom spawn). Table 1 shows the experimental design. The second experiment was focused on the evaluation of the effect of different temperatures of heat treatments of substrates on the growth of the green mold. Temperatures of 60, 80 °C (direct immersion in hot water) and 120 °C (steam sterilization of bagged substrates) were assayed. Two strains and three different substrates were used. The following treatments were performed: T, T + M and M (Table 2). The third experiment was focused on the evaluation of the growth of the green mold after immersion of the substrate in alkalinized water. Wheat straw was immersed in an alkaline solution during four different periods of time: 5 min, 12 h, 24 h and 36 h. One strain of Pleurotus ostreatus and one substrate (wheat straw) were used. Three treatments were tested: T, T + M and M. Controls without inoculating were performed in all experiments, bags were observed after 10 days of incubation at 25 °C in the dark. Five replicates for all treatments and experiments were carried out. The results were qualitatively expressed by assessing the visual degree of growth and colonization of Trichoderma sp. The following symbols indicate degrees of growth of the green mold disease in the bags: (+): Poor growth, les
Strains
Strains used in this work are conserved in ICFC (IIB-INTECH collection of Fungal Cultures, Laboratory of Mycology and Mushroom cultivation, IIB-INTECH; Chascomús, Argentina (reference in the WDCM data base: 826).
Pleurotus ostreatus
ICFC 153/99, commercial strain, 19-XI-1999, leg. E. Albertó; Gymnopilus pampeanus: ICFC 444/01, Capital Federal, Buenos Aires, Argentina; growing on Eucalyptus, 10-V-2001, leg E. Albertó; ICFC 548/03, Burzaco, Buenos Aires, Argentina, growing on Melia azedarach stalk, 15-11-2003, E. Albertó; Trichoderma sp: ICFC 767/12, Chascomús, Buenos Aires, Argentina; 12-VIII-2012. Leg. M. B. Colavolpe, isolated from P. ostreatus cultivation bag.
Spawn production
It was prepared following Pieckenstain et al. (1999). Briefly, glass bottles filled with boiled wheat grains and 1% w/w CaCO3 were sterilized for 1.5 h at 121 °C, cooled and inoculated with an agar plug (1 cm diam.) cut from the advancing margin of a 5-d-old colony grown on PDA (potato dextrose agar). Bottles were incubated in the dark, at 25 °C, with periodical shaking, during 15 days for Pleurotus and Trichoderma sp, and 30 days for Gymnopilus.
Trichoderma sp inoculum
Conidia of Trichoderma sp were massively produced using the spawn method. When spawning run period was finished, colonized bottles were left near a window at room temperature until the grains became all green colored due to the mature conidia. A suspension of Trichoderma sp conidia in distilled water was prepared. Colonized grains were immersed in distilled water under laminar flow; conidia were released by shaking. Then, water was filtered using cheesecloth and dropped into an Erlenmeyer flask. Concentration of conidia was adjusted to 105 conidia/mL using a Neubauer chamber. Conidia suspension was not stored; a new suspension was made evey time it was needed.
Substrate preparation
Chopped wheat straw, wheat seed, Populus or Eucalyptus sawdust were separately used. Substrates were subjected to different treatments (see next point), then immediately bagged in polypropylene bags (15 × 30 cm) containing 100 g of wet substrate with the addition of 1% w/w of CaCO3. After they reached room temperature, they were sprayed with 3 mL of water suspension of conidia of Trichoderma sp. per bag and mixed. Then, bags were inoculated with 10% of spawn of the mushroom used in each experiment (w/w) and afterwards they were stopped with cotton plugs held by PVC (polyvinyl chloride) cylinders.
Treatments of the substrate
Different treatments were carried out, 1) immersion in hot water: a thermal bath with automatic temperature regulation was used; substrates were placed during 30 min into the bath after reaching the temperature of treatment (60 or 80 °C), then they were drained and put on absorbent papers to adjust the humidity to 70% and finally bagged: 2) steam sterilization, substrates were firstly bagged, then tap water was added up to 70% of final humidity and sterilized during 2 h at 120 °C at 1.2 psi of pressure; 3) Immersion in alkalinized water: we used the methodology proposed by Contreras et al. (2004). Substrates were soaked into an alkaline solution prepared with 0, 5% of calcium oxide for 0, 5 min, 12 h, 24 h or 36 h.
Experimental design and cultivation conditions
Three experiments with different objectives were carried out. The first experiment was focused on the evaluation of the growth of the green mold Trichoderma sp after the steam sterilization treatment. Two strains and four different sterilized and non-sterilized substrates were used (Table 1); the following treatments were performed: T (Trichoderma sp spray inoculum), T + M (Trichoderma sp spray inoculum + mushroom spawn), and M (mushroom spawn). Table 1 shows the experimental design. The second experiment was focused on the evaluation of the effect of different temperatures of heat treatments of substrates on the growth of the green mold. Temperatures of 60, 80 °C (direct immersion in hot water) and 120 °C (steam sterilization of bagged substrates) were assayed. Two strains and three different substrates were used. The following treatments were performed: T, T + M and M (Table 2). The third experiment was focused on the evaluation of the growth of the green mold after immersion of the substrate in alkalinized water. Wheat straw was immersed in an alkaline solution during four different periods of time: 5 min, 12 h, 24 h and 36 h. One strain of Pleurotus ostreatus and one substrate (wheat straw) were used. Three treatments were tested: T, T + M and M. Controls without inoculating were performed in all experiments, bags were observed after 10 days of incubation at 25 °C in the dark. Five replicates for all treatments and experiments were carried out. The results were qualitatively expressed by assessing the visual degree of growth and colonization of Trichoderma sp. The following symbols indicate degrees of growth of the green mold disease in the bags: (+): Poor growth, les
0/5000
วัสดุและวิธีการสายพันธุ์สายพันธุ์ที่ใช้ในงานนี้จะอยู่ใน ICFC (คอลเลกชัน IIB INTECH วัฒนธรรมเชื้อรา ห้องปฏิบัติการเห็ด และ เพาะเห็ด IIB-INTECH Chascomús อาร์เจนตินา (อ้างอิงในฐานข้อมูล WDCM: 826)เห็ด ostreatusICFC 153/99 สายพันธุ์เชิงพาณิชย์ 19-XI-1999 ขา E. Albertó Gymnopilus pampeanus: ICFC 444/01 ทุนรัฐบาล บัวโนสไอเรส อาร์เจนตินา เจริญเติบโตบนยูคาลิปตัส 10-V-2001 ขา E. Albertó ICFC 548/03, Burzaco บัวโนสไอเรส อาร์เจนตินา เจริญเติบโตบน Melia azedarach ก้าน 15-11-2003, E. Albertó Trichoderma sp: ICFC 767/12, Chascomús บัวโนสไอเรส อาร์เจนตินา 12-VIII-2012 ขา M. B. Colavolpe แยกออกจากถุงเพาะ P. ostreatusการผลิตการวางไข่มันถูกจัดทำขึ้นตาม Pieckenstain et al. (1999) สั้น ๆ ขวดแก้วที่เต็มไป ด้วยข้าวสาลีต้มธัญพืช และ 1% w/w CaCO3 ถูกฆ่าเชื้อสำหรับ 1.5 h 121 ° c เย็น และ inoculated พร้อมกับวุ้นรูปปลั๊ก (1 ซม. diam.) ตัดจากขอบ advancing ของอาณานิคม 5 d เก่าปลูกบน PDA (วุ้นมันฝรั่งเดกซ์โทรส) ขวดได้รับการกกในมืด ที่ 25 ° C วารสารสั่นสะเทือน ระหว่าง 15 วันสำหรับเห็ดและ Trichoderma sp และ 30 วันสำหรับ GymnopilusTrichoderma sp inoculumConidia ของ Trichoderma sp จำนวนมากถูกผลิตโดยใช้วิธีการวางไข่ เมื่อวางไข่ระยะเวลาเรียกใช้เสร็จสมบูรณ์ ขวดยึดครองถูกทิ้งอยู่ใกล้หน้าต่างที่อุณหภูมิห้องจนกระทั่งเมล็ดเป็น สีเขียวทั้งหมดเนื่องจาก conidia แก่ ๆ มีจัดเตรียมการระงับ Trichoderma sp conidia ในน้ำกลั่น ยึดครองธัญพืชถูกแช่อยู่ในน้ำกลั่นภายใต้ไหล conidia เผยแพร่ โดยการเขย่า แล้ว น้ำถูกกรองโดยใช้ผ้า และลดลงในขวด Erlenmeyer ความเข้มข้นของ conidia ถูกปรับให้ conidia 105/mL โดยใช้ห้อง Neubauer Conidia ระงับถูกเก็บ ระบบกันสะเทือนที่ทำ evey เวลามันจำเป็นการเตรียมพื้นผิวฟางสับข้าวสาลี เมล็ดข้าวสาลี ขี้เลื่อย Populus หรือยูคาลิปตัสใช้แยกต่างหาก พื้นผิวถูกรักษาแตกต่างกัน (ดูจุดถัดไป), แล้ว ทันทีถุงในถุงพลาสติก (15 × 30 ซม.) ที่ประกอบด้วยพื้นผิวที่เปียก 100 กรัม มีบวก 1% w/w ของ CaCO3 หลังจากอุณหภูมิห้องถึงพวกเขา พวกเขาถูกพ่น ด้วย 3 mL ของน้ำระงับของ conidia ของ Trichoderma sp.ต่อถุง และผสม กระเป๋าถูก inoculated กับ 10% ของการเกิดของเห็ดที่ใช้ในการทดลองแต่ละ (w/w) แล้วหลังจากนั้น พวกเขาถูกหยุดพร้อมฝ้ายโดยถังพีวีซี (คลอไรด์)การรักษาพื้นผิวรักษาแตกต่างกันดำเนินการ 1) แช่ในน้ำร้อน: ใช้อ่างอาบน้ำร้อนพร้อมควบคุมอุณหภูมิอัตโนมัติ พื้นผิวถูกวางไว้ในช่วง 30 นาทีในการอาบน้ำหลังจากถึงอุณหภูมิของการรักษา (60 หรือ 80 ° C), แล้วพวกเขาเตรียม และวางบนกระดาษซับเพื่อปรับความชื้น 70% และสุดท้าย ถูกจับ: 2) ไอน้ำฆ่าเชื้อ พื้นผิวถูกแข้งครั้งแรก แล้วน้ำประปาเพิ่มถึง 70% ของความชื้นสุดท้าย และผ่านการฆ่าเชื้อในระหว่าง 2 ชม.ที่ 120 ° C ที่ 1.2 psi แรงดัน 3) แช่น้ำ alkalinized: เราใช้วิธีการนำเสนอโดย Contreras et al. (2004) พื้นผิวที่ถูกแช่ในละลายด่างด้วย 0, 5% ของแคลเซียมออกไซด์สำหรับ 0, 5 นาที h 12 ตัว 24 ชม. หรือชม. 36เงื่อนไขการออกแบบและปลูกทดลองสามทดลอง มีวัตถุประสงค์แตกต่างกันดำเนินการ การทดลองแรกเน้นการประเมินผลของการเติบโตของเชื้อราเขียว Trichoderma sp หลังจากการอบฆ่าเชื้อ สายพันธุ์ที่สองและสี่ไม่ได้ผ่านการฆ่าเชื้อ และฆ่าเชื้อพื้นผิวต่าง ๆ ที่ใช้ (ตารางที่ 1); ดำเนินการรักษาต่อไปนี้: (Trichoderma sp สเปรย์ inoculum) T, T + M (Trichoderma sp สเปรย์ inoculum + วางไข่เห็ด), และ M (เห็ดวางไข่) ตารางที่ 1 แสดงการออกแบบการทดลอง การทดลองที่สองเน้นการประเมินผลกระทบของอุณหภูมิที่ต่างกันของความร้อนของพื้นผิวในการเติบโตของเชื้อราเขียว อุณหภูมิที่ 60, 80 ° C (ตรงแช่ในน้ำร้อน) และ 120 ° C (การนึ่งฆ่าเชื้อของพื้นผิวเร่ง) ถูก assayed ใช้สองสายพันธุ์และพื้นผิวต่าง ๆ 3 ดำเนินการรักษาต่อไปนี้: T, T + M และ M (ตารางที่ 2) การทดลองที่สามเน้นการประเมินผลของการเติบโตของเชื้อราเขียวหลังจากแช่ของพื้นผิวในน้ำ alkalinized ข้าวสาลีฟางถูกแช่อยู่ในโซลูชันในสี่ช่วงเวลา: 5 นาที 12 ชม. 24 ชม. และชม. 36 ใช้หนึ่งสายพันธุ์ของเห็ด ostreatus และพื้นผิวหนึ่ง (ฟางข้าวสาลี) รักษาสามทดสอบ: T, T + M และม.ควบคุม โดย inoculating ดำเนินการในการทดลองทั้งหมด กระเป๋าถูกตั้งข้อสังเกตหลังจาก 10 วันที่ 25 ° C ในมืด เหมือนกับห้าสำหรับทุกทรีทเมนท์และทดลองดำเนินการ คุณภาพผลลัพธ์ถูกแสดง โดยประเมินระดับภาพการเจริญเติบโตและการล่าอาณานิคมของ Trichoderma sp องศาของการเติบโตของโรคเชื้อราเขียวในถุงแสดงสัญลักษณ์ต่อไปนี้: (+): เติบโตไม่ดี les
การแปล กรุณารอสักครู่..
วัสดุและวิธีการ
สายพันธุ์
สายพันธุ์ที่ใช้ในงานนี้ได้รับการอนุรักษ์ใน ICFC (คอลเลกชัน IIB-อินเทควัฒนธรรมเชื้อราปฏิบัติการของเห็ดและการเพาะปลูกเห็ด IIB-อินเทค; Chascomus อาร์เจนตินา (อ้างอิงในฐานข้อมูล WDCM:. 826)
Pleurotus ostreatus
ICFC . 153/99 ความเครียดเชิงพาณิชย์ 19 XI-1999 ขาอี Alberto; Gymnopilus pampeanus: ICFC 444/01, Capital Federal, บัวโนสไอเรสอาร์เจนตินา; เจริญเติบโตบนต้นยูคา, 10-V-2001 ขาอี Alberto; ICFC 548/03, Burzaco บัวโนสไอเรสอาร์เจนตินาที่เจริญเติบโตบนก้าน Melia azedarach, 15-11-2003, อี Alberto; เชื้อรา Trichoderma SP:. ICFC 767/12, Chascomus บัวโนสไอเรสอาร์เจนตินา; 12-VIII 2012 ขา . MB Colavolpe ที่แยกได้จากพีถุงเพาะปลูกนางรม.
วางไข่ผลิต
มันถูกจัดทำขึ้นดังต่อไปนี้ Pieckenstain et al. (1999). สั้น ๆ , ขวดแก้วที่เต็มไปด้วยต้มเมล็ดข้าวสาลีและ 1% w / W CaCO3 ถูกฆ่าเชื้อ 1.5 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 121 องศา ซีระบายความร้อนและเชื้อด้วยปลั๊กอินวุ้น (1 ซม. เส้นผ่าศูนย์กลาง.) ตัดออกมาจากขอบก้าวหน้าของการเป็นอาณานิคมของ 5-D-เก่าที่ปลูกบน PDA (potato dextrose agar) ขวดถูกบ่มในที่มืดที่ 25 ° C มีระยะสั่นในช่วง 15 วันสำหรับเห็ดและเชื้อรา Trichoderma SP, และ 30 วันสำหรับ Gymnopilus
เชื้อรา Trichoderma SP เชื้อ
สปอร์เชื้อรา Trichoderma SP ถูกผลิตอย่างหนาแน่นโดยใช้วิธีการวางไข่ เมื่อวางไข่ระยะเวลาทำงานเสร็จขวดอาณานิคมถูกทิ้งไว้ใกล้หน้าต่างที่อุณหภูมิห้องจนเมล็ดกลายเป็นสีเขียวสีเนื่องจากการ conidia ผู้ใหญ่ ระงับเชื้อรา Trichoderma SP สปอร์ในน้ำกลั่นถูกจัดทำขึ้น ธัญพืชอาณานิคมถูกแช่อยู่ในน้ำกลั่นภายใต้การไหล; สปอร์ได้รับการปล่อยตัวด้วยการเขย่า จากนั้นน้ำกรองโดยใช้ผ้าและลดลงในขวด Erlenmeyer ความเข้มข้นของสปอร์ได้รับการปรับให้ 105 ปอร์ / มลใช้ห้อง Neubauer ระงับ conidia ไม่ได้ถูกเก็บไว้; ระงับใหม่ถูกสร้างขึ้นมาเวลา evey มันเป็นสิ่งที่จำเป็น
การเตรียมพื้นผิว
สับฟางข้าวสาลีเมล็ดข้าวสาลี Populus หรือยูคาลิปขี้เลื่อยถูกนำมาใช้แยกต่างหาก พื้นผิวที่ถูกยัดเยียดให้การรักษาที่แตกต่างกัน (ดูจุดถัดไป) แล้วโดนทันทีในถุงโพรพิลีน (15 × 30 ซม.) ที่มี 100 กรัมของพื้นผิวเปียกด้วยนอกเหนือจาก 1% w / W ของ CaCO3 หลังจากที่พวกเขามาถึงอุณหภูมิห้องที่พวกเขาถูกพ่นด้วย 3 มลของการระงับน้ำของสปอร์เชื้อรา Trichoderma SP ต่อถุงและผสม จากนั้นถุงถูกเชื้อกับ 10% ของการวางไข่ของเห็ดที่ใช้ในการทดสอบแต่ละครั้ง (w / w) และหลังจากนั้นพวกเขาก็หยุดกับปลั๊กผ้าฝ้ายที่จัดขึ้นโดยพีวีซี (Polyvinyl Chloride) ถัง
การรักษาพื้นผิว
การรักษาที่แตกต่างกันได้ดำเนินการคือ 1) การแช่ในน้ำร้อน: การอาบน้ำการระบายความร้อนที่มีการควบคุมอุณหภูมิอัตโนมัติใช้; พื้นผิวที่ถูกวางไว้ในช่วง 30 นาทีเข้าไปในห้องอาบน้ำหลังจากที่ไปถึงอุณหภูมิของการรักษา (60 หรือ 80 ° C) แล้วพวกเขาก็ถูกระบายน้ำและวางบนกระดาษดูดซับเพื่อปรับความชื้น 70% และถุงที่สุด: 2) การนึ่งฆ่าเชื้อพื้นผิวได้ ถุงแรกแล้วแตะน้ำเพิ่มขึ้นถึง 70% ของความชื้นสุดท้ายและผ่านการฆ่าเชื้อในช่วง 2 ชั่วโมงที่ 120 ° C ที่ 1.2 ปอนด์ต่อตารางนิ้วของความดัน; 3) การแช่ในน้ำด่าง: เราใช้วิธีการที่เสนอโดย Contreras, et al (2004) พื้นผิวที่ถูกแช่ลงในสารละลายด่างเตรียมกับ 0, 5% ของแคลเซียมออกไซด์สำหรับ 0, 5 นาที, 12 ชั่วโมง, 24 ชั่วโมงหรือ 36 ชั่วโมง
การออกแบบและการเพาะปลูกทดลองเงื่อนไข
การทดลองสามโดยมีวัตถุประสงค์ที่แตกต่างกันออกไป การทดลองครั้งแรกที่มุ่งเน้นไปที่การประเมินผลของการเจริญเติบโตของเชื้อรา Trichoderma SP สีเขียวหลังจากที่การอบฆ่าเชื้อ สองสายพันธุ์ที่แตกต่างกันและสี่ฆ่าเชื้อและไม่ผ่านการฆ่าเชื้อพื้นผิวที่ถูกนำมาใช้ (ตารางที่ 1); การรักษาต่อไปนี้ได้ดำเนินการ: T (Trichoderma SP สเปรย์หัวเชื้อ) T + M (Trichoderma SP สเปรย์หัวเชื้อเห็ด + วางไข่) และ M (เห็ดวางไข่) ตารางที่ 1 แสดงให้เห็นถึงการออกแบบการทดลอง การทดลองที่สองได้รับการมุ่งเน้นไปที่การประเมินผลกระทบของอุณหภูมิที่แตกต่างกันของการรักษาความร้อนของพื้นผิวในการเจริญเติบโตของเชื้อราสีเขียว อุณหภูมิ 60, 80 ° C (แช่โดยตรงในน้ำร้อน) และ 120 ° C (นึ่งฆ่าเชื้อที่พื้นผิวของถุง) และนำไปวิเคราะห์ สองสายพันธุ์และสามพื้นผิวที่แตกต่างกันถูกนำมาใช้ การรักษาต่อไปนี้ได้ดำเนินการ: T, T + M และ M (ตารางที่ 2) การทดลองที่สามกำลังจดจ่ออยู่กับการประเมินผลของการเจริญเติบโตของเชื้อราสีเขียวหลังจากแช่ของพื้นผิวในน้ำด่าง ฟางข้าวสาลีถูกแช่ในสารละลายด่างในช่วงสี่ช่วงระยะเวลาต่างๆ: 5 นาที, 12 ชั่วโมง, 24 ชั่วโมงและ 36 ชั่วโมง หนึ่งในสายพันธุ์ของ Pleurotus ostreatus และเป็นหนึ่งในสารตั้งต้น (ฟางข้าวสาลี) ถูกนำมาใช้ สามการรักษาที่ได้รับการทดสอบ: T, T + M เมตรและควบคุมโดยไม่ต้องฉีดวัคซีนได้ดำเนินการในการทดลองทั้งหมด, กระเป๋าถูกตั้งข้อสังเกตหลังจาก 10 วันของการบ่มที่ 25 ° C ในที่มืด ห้าซ้ำสำหรับการรักษาและการทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการ ผลการวิจัยแสดงคุณภาพโดยการประเมินการศึกษาระดับปริญญาภาพของการเจริญเติบโตและการล่าอาณานิคมของเชื้อรา Trichoderma SP สัญลักษณ์ต่อไปนี้บ่งบอกองศาของการเจริญเติบโตของโรคเชื้อราในสีเขียวถุง: (+): การเจริญเติบโตแย่ Les
สายพันธุ์
สายพันธุ์ที่ใช้ในงานนี้ได้รับการอนุรักษ์ใน ICFC (คอลเลกชัน IIB-อินเทควัฒนธรรมเชื้อราปฏิบัติการของเห็ดและการเพาะปลูกเห็ด IIB-อินเทค; Chascomus อาร์เจนตินา (อ้างอิงในฐานข้อมูล WDCM:. 826)
Pleurotus ostreatus
ICFC . 153/99 ความเครียดเชิงพาณิชย์ 19 XI-1999 ขาอี Alberto; Gymnopilus pampeanus: ICFC 444/01, Capital Federal, บัวโนสไอเรสอาร์เจนตินา; เจริญเติบโตบนต้นยูคา, 10-V-2001 ขาอี Alberto; ICFC 548/03, Burzaco บัวโนสไอเรสอาร์เจนตินาที่เจริญเติบโตบนก้าน Melia azedarach, 15-11-2003, อี Alberto; เชื้อรา Trichoderma SP:. ICFC 767/12, Chascomus บัวโนสไอเรสอาร์เจนตินา; 12-VIII 2012 ขา . MB Colavolpe ที่แยกได้จากพีถุงเพาะปลูกนางรม.
วางไข่ผลิต
มันถูกจัดทำขึ้นดังต่อไปนี้ Pieckenstain et al. (1999). สั้น ๆ , ขวดแก้วที่เต็มไปด้วยต้มเมล็ดข้าวสาลีและ 1% w / W CaCO3 ถูกฆ่าเชื้อ 1.5 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 121 องศา ซีระบายความร้อนและเชื้อด้วยปลั๊กอินวุ้น (1 ซม. เส้นผ่าศูนย์กลาง.) ตัดออกมาจากขอบก้าวหน้าของการเป็นอาณานิคมของ 5-D-เก่าที่ปลูกบน PDA (potato dextrose agar) ขวดถูกบ่มในที่มืดที่ 25 ° C มีระยะสั่นในช่วง 15 วันสำหรับเห็ดและเชื้อรา Trichoderma SP, และ 30 วันสำหรับ Gymnopilus
เชื้อรา Trichoderma SP เชื้อ
สปอร์เชื้อรา Trichoderma SP ถูกผลิตอย่างหนาแน่นโดยใช้วิธีการวางไข่ เมื่อวางไข่ระยะเวลาทำงานเสร็จขวดอาณานิคมถูกทิ้งไว้ใกล้หน้าต่างที่อุณหภูมิห้องจนเมล็ดกลายเป็นสีเขียวสีเนื่องจากการ conidia ผู้ใหญ่ ระงับเชื้อรา Trichoderma SP สปอร์ในน้ำกลั่นถูกจัดทำขึ้น ธัญพืชอาณานิคมถูกแช่อยู่ในน้ำกลั่นภายใต้การไหล; สปอร์ได้รับการปล่อยตัวด้วยการเขย่า จากนั้นน้ำกรองโดยใช้ผ้าและลดลงในขวด Erlenmeyer ความเข้มข้นของสปอร์ได้รับการปรับให้ 105 ปอร์ / มลใช้ห้อง Neubauer ระงับ conidia ไม่ได้ถูกเก็บไว้; ระงับใหม่ถูกสร้างขึ้นมาเวลา evey มันเป็นสิ่งที่จำเป็น
การเตรียมพื้นผิว
สับฟางข้าวสาลีเมล็ดข้าวสาลี Populus หรือยูคาลิปขี้เลื่อยถูกนำมาใช้แยกต่างหาก พื้นผิวที่ถูกยัดเยียดให้การรักษาที่แตกต่างกัน (ดูจุดถัดไป) แล้วโดนทันทีในถุงโพรพิลีน (15 × 30 ซม.) ที่มี 100 กรัมของพื้นผิวเปียกด้วยนอกเหนือจาก 1% w / W ของ CaCO3 หลังจากที่พวกเขามาถึงอุณหภูมิห้องที่พวกเขาถูกพ่นด้วย 3 มลของการระงับน้ำของสปอร์เชื้อรา Trichoderma SP ต่อถุงและผสม จากนั้นถุงถูกเชื้อกับ 10% ของการวางไข่ของเห็ดที่ใช้ในการทดสอบแต่ละครั้ง (w / w) และหลังจากนั้นพวกเขาก็หยุดกับปลั๊กผ้าฝ้ายที่จัดขึ้นโดยพีวีซี (Polyvinyl Chloride) ถัง
การรักษาพื้นผิว
การรักษาที่แตกต่างกันได้ดำเนินการคือ 1) การแช่ในน้ำร้อน: การอาบน้ำการระบายความร้อนที่มีการควบคุมอุณหภูมิอัตโนมัติใช้; พื้นผิวที่ถูกวางไว้ในช่วง 30 นาทีเข้าไปในห้องอาบน้ำหลังจากที่ไปถึงอุณหภูมิของการรักษา (60 หรือ 80 ° C) แล้วพวกเขาก็ถูกระบายน้ำและวางบนกระดาษดูดซับเพื่อปรับความชื้น 70% และถุงที่สุด: 2) การนึ่งฆ่าเชื้อพื้นผิวได้ ถุงแรกแล้วแตะน้ำเพิ่มขึ้นถึง 70% ของความชื้นสุดท้ายและผ่านการฆ่าเชื้อในช่วง 2 ชั่วโมงที่ 120 ° C ที่ 1.2 ปอนด์ต่อตารางนิ้วของความดัน; 3) การแช่ในน้ำด่าง: เราใช้วิธีการที่เสนอโดย Contreras, et al (2004) พื้นผิวที่ถูกแช่ลงในสารละลายด่างเตรียมกับ 0, 5% ของแคลเซียมออกไซด์สำหรับ 0, 5 นาที, 12 ชั่วโมง, 24 ชั่วโมงหรือ 36 ชั่วโมง
การออกแบบและการเพาะปลูกทดลองเงื่อนไข
การทดลองสามโดยมีวัตถุประสงค์ที่แตกต่างกันออกไป การทดลองครั้งแรกที่มุ่งเน้นไปที่การประเมินผลของการเจริญเติบโตของเชื้อรา Trichoderma SP สีเขียวหลังจากที่การอบฆ่าเชื้อ สองสายพันธุ์ที่แตกต่างกันและสี่ฆ่าเชื้อและไม่ผ่านการฆ่าเชื้อพื้นผิวที่ถูกนำมาใช้ (ตารางที่ 1); การรักษาต่อไปนี้ได้ดำเนินการ: T (Trichoderma SP สเปรย์หัวเชื้อ) T + M (Trichoderma SP สเปรย์หัวเชื้อเห็ด + วางไข่) และ M (เห็ดวางไข่) ตารางที่ 1 แสดงให้เห็นถึงการออกแบบการทดลอง การทดลองที่สองได้รับการมุ่งเน้นไปที่การประเมินผลกระทบของอุณหภูมิที่แตกต่างกันของการรักษาความร้อนของพื้นผิวในการเจริญเติบโตของเชื้อราสีเขียว อุณหภูมิ 60, 80 ° C (แช่โดยตรงในน้ำร้อน) และ 120 ° C (นึ่งฆ่าเชื้อที่พื้นผิวของถุง) และนำไปวิเคราะห์ สองสายพันธุ์และสามพื้นผิวที่แตกต่างกันถูกนำมาใช้ การรักษาต่อไปนี้ได้ดำเนินการ: T, T + M และ M (ตารางที่ 2) การทดลองที่สามกำลังจดจ่ออยู่กับการประเมินผลของการเจริญเติบโตของเชื้อราสีเขียวหลังจากแช่ของพื้นผิวในน้ำด่าง ฟางข้าวสาลีถูกแช่ในสารละลายด่างในช่วงสี่ช่วงระยะเวลาต่างๆ: 5 นาที, 12 ชั่วโมง, 24 ชั่วโมงและ 36 ชั่วโมง หนึ่งในสายพันธุ์ของ Pleurotus ostreatus และเป็นหนึ่งในสารตั้งต้น (ฟางข้าวสาลี) ถูกนำมาใช้ สามการรักษาที่ได้รับการทดสอบ: T, T + M เมตรและควบคุมโดยไม่ต้องฉีดวัคซีนได้ดำเนินการในการทดลองทั้งหมด, กระเป๋าถูกตั้งข้อสังเกตหลังจาก 10 วันของการบ่มที่ 25 ° C ในที่มืด ห้าซ้ำสำหรับการรักษาและการทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการ ผลการวิจัยแสดงคุณภาพโดยการประเมินการศึกษาระดับปริญญาภาพของการเจริญเติบโตและการล่าอาณานิคมของเชื้อรา Trichoderma SP สัญลักษณ์ต่อไปนี้บ่งบอกองศาของการเจริญเติบโตของโรคเชื้อราในสีเขียวถุง: (+): การเจริญเติบโตแย่ Les
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- What kind of
- so you on diet after exercise..or you wi
- ฉันกอดกับแม่ทุกคืนเลยCuddle
- ในหลวงท่านทรงทำเพื่อเราตั้งมากมายโดยไม่ห
- สำคัญต่อผู้คนทุกยุคทุกสมัย
- การเข้าใจนั้นต้องอาศัยการมั่นศึกษาเรียนร
- The advantages of social media have been
- I want to make friends with those I'm co
- โรงเรียนของฉัน
- Deeper structural problems are the backd
- *When you lose you can come to me, i'll
- ฉันจะต้องรู้และเข้าใจเกี่ยวกับฟังก์ชั่นต
- ฉันแอบเล่นโทรศัพท์
- regulation
- ฉันไปที่นั่น1อาทิตย์ต่อเดือน
- ความเผ็ดระดับหนึ่ง
- จากนั้นเราก็ได้ดูหนังกัน
- ฉันคิดว่าฉันไปคนเดียวได้
- ผู้จัดการทีมพาพวกเราไปกินอาหารเย็นที่ร้า
- ฉันฝากดอกไม้ให้แม่คุณด้วย
- ความแตกต่างระหว่างเซลล์พื่ชและเซลล์สัตว์
- Deeper structural problems are the backd
- Fig. 1. a) Fallow soil replicates satura
- Spot
