Preparation of affinity purified go

Preparation of affinity purified goat IgG to rabbit IgG
The affinity purified goat IgG to rabbit IgG was developed following
the procedure of Anandlaxmi and Prakash (2001). Briefly,
about 40 ml plasma from goats immunized against rabbit IgG containing
20 IU heparin/ml of blood was vortexed with rabbit IgG
agarose and loaded onto a small column. First, non-specific
proteins were eluted with PBS (0.5 M, 0.15 M NaCl, pH 7.2) buffer.
Proteins bound specifically were eluted with 15 ml of 0.1 M glycine–HCl
(pH 2.0). All steps were performed at room temperature.
The eluted fractions (3 ml each) were collected in vials containing
0.2 ml of 1 M Tris–HCl (pH 8.0). The eluted IgG was dialyzed
overnight against PBS and the protein content determined by
measuring the absorbance spectrophotometrically at 260 nm and
280 nm, and extrapolated from a normograph

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การจัดความสัมพันธ์บริสุทธิ์แพะ IgG เพื่อกระต่าย IgGแพะบริสุทธิ์ความสัมพันธ์ IgG เพื่อกระต่าย IgG ได้รับการพัฒนาต่อไปกระบวนการ Anandlaxmi และพรา (2001) สั้น ๆประมาณ 40 มล.จากแพะ immunized กับกระต่ายที่ประกอบด้วย IgGราคาเฮ 20 IU ต่อมิลลิลิตรของเลือดถูก vortexed กับกระต่าย IgGagarose และโหลดลงในคอลัมน์ขนาดเล็ก ครั้งแรก ไม่เฉพาะเจาะจงโปรตีนถูก eluted กับบัฟเฟอร์ PBS (0.5 M, 0.15 M NaCl, pH 7.2)ผูกพันโดยเฉพาะโปรตีนถูก eluted กับ 15 ml ของ glycine – HCl 0.1 M(pH 2.0) มีการดำเนินการขั้นตอนทั้งหมดที่อุณหภูมิห้องเศษส่วน eluted (3 ml) ถูกจัดเก็บในขวดที่ประกอบด้วย0.2 ml 1 M ทริสเรทติ้ง – HCl (pH 8.0) Eluted IgG เป็น dialyzedข้ามคืนกับ PBS และโปรตีนเนื้อหาที่กำหนดโดยการวัดค่า spectrophotometrically ที่ 260 nm และ280 nm และ extrapolated จาก normograph เป็น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การเตรียมความสัมพันธ์บริสุทธิ์ IgG แพะกระต่าย IgG
ความสัมพันธ์บริสุทธิ์ IgG แพะกระต่าย IgG ได้รับการพัฒนาต่อไปนี้
ขั้นตอนของการ Anandlaxmi และ Prakash นี้ (2001) สั้น ๆ
ประมาณ 40 มล. พลาสม่าจากแพะวัคซีนป้องกัน IgG กระต่ายที่มี
20 IU เฮ / มิลลิลิตรเลือดหมุนวนกับกระต่าย IgG
agarose และโหลดลงในคอลัมน์เล็ก ๆ ครั้งแรกที่ไม่เฉพาะเจาะจง
โปรตีนถูกชะกับพีบีเอส (0.5 M 0.15 M NaCl ค่า pH 7.2) บัฟเฟอร์.
โปรตีนผูกพันเฉพาะถูกชะกับ 15 มล. 0.1 M-glycine HCl
(pH 2.0) ทุกขั้นตอนได้ดำเนินการที่อุณหภูมิห้อง.
เศษชะ (3 มล. แต่ละคน) ถูกเก็บไว้ในขวดที่มี
0.2 มล. 1 เมตร Tris-HCl (pH 8.0) ชะ IgG ถูก dialyzed
ค้างคืนกับพีบีเอสและปริมาณโปรตีนที่กำหนดโดย
การวัดการดูดกลืนแสง spectrophotometrically ที่ 260 นาโนเมตรและ
280 นาโนเมตรและมีการคาดเดาจาก normograph

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเตรียมการของทางกลุ่มแพะกระต่าย IgG บริสุทธิ์affinity IgG บริสุทธิ์แพะกระต่าย IgG ถูกพัฒนาต่อไปขั้นตอนและ anandlaxmi Prakash ( 2001 ) สั้น ๆเกี่ยวกับ 40 มิลลิลิตรพลาสมาจากแพะที่ได้รับกับกระต่าย IgG ที่มี20 IU / ml ยาเลือด vortexed กับกระต่าย IgG, โหลดลงในคอลัมน์เล็ก ๆ ชนิดแรกโปรตีนเป็นตัวอย่างกับ PBS ( 0.5 M ) M NaCl , pH 7.2 ) กันชนโปรตีนผูกพันเฉพาะมีตัวอย่าง 15 มล. ความเข้มข้น 0.1 M HCl และไกลซีน( pH 2.0 ) ทุกขั้นตอนมีการปฏิบัติที่อุณหภูมิห้องมีตัวอย่างเศษส่วน ( 3 ml แต่ละ ) ถูกเก็บในหลอดแก้วที่มี0.2 มิลลิลิตรต่อ 1 เมตร ( HCl ( pH 8.0 ) มีตัวอย่าง IgG คือซิค้างคืนกับ PBS และโปรตีนที่กำหนดโดยวัดค่าการดูดกลืนแสงที่ 260 นาโนเมตรนี้280 nm และคาดจาก normograph