20 (bed vol., 500 ml) using MeOH-CH

20 (bed vol., 500 ml) using MeOH-CHCl3 (4:1) as a
mobile phase. Ten ml fractions were collected. Fractions
No. 35-39 were combined and subjected to ODS-HPLC
(Senshu-Pak ODS 3251D; 250x8 mm i.d.) and eluted at
a flow rate of 2.5mlmin~1 as follows: 0-20 min, 45%
aqueous acetonitrile; 20-40 min, with a linear gradient of
45-100% acetonitrile; 40-45 min, 100% acetonitrile. The
retention time was 12-15 min for brassinolide and 20-24
min for castasterone.
The fractions thus obtained were analyzed by GC-SIM
after methylation and trimethylsilylation for GAs and IAA
or after methaneboronation for BRs. GC-SIM was conducted
using a JEOL JMS AX 505 instrument equipped
with DB-1 for GAs and IAA and DB-5 for BRs (J&W Scientific;
0.25 mm x 15 m; 0.25 mm film thickness). For GA
samples, the injection temperature was 220°C. The column
temperature was held at 130°C for the first 2 min, and then
was programmed to increase at 32°C min"1 to 220°C with
a 4 min isothermal hold at 220°C, and subsequently at 8°C
min"1 to 270°C with a 10 min isothermal hold at the end of
the program. For IAA samples, the injection temp, was
200°C. The column temp, was held at 80°C for 1.5 min,
and increased to 130°C at 32°C min"1, followed by a further
increase to 220°C at 8°C min"1. The analytical conditions
for BR samples were as described by Yokota et al.
(1994).
The following ions were monitored to identify compounds:
GA./fHsJGA,, m/z 511/506 and 496/491; GA*/
[2HJGAM, m/z 420/418 and 405/403; IAA/^QJIAA,
m/z 267/261 and 208/202; brassinolide/pHdbrassinolide,
m/z 534/528 and 161/155; castasterone/[2H6]castasterone,
m/z 518/512 and 161/155. The concentrations of GA,,
GA20, IAA, brassinolide and castasterone in the samples
were calculated from the ratios of peak areas at m/z 506/
511, 434/437, 418/420, 202/208, 155/161 and 512/518, respectively.
To confirm the recovery of plant growth from Zn
deficiency by GAs, GA3 (20 and 40 fig liter"1) was added to
the Zn-deficient nutrient solution in 4-liter pots. At 13 days
after addition of GA3 (short-term group), the growth of
Zn-deficient plants appeared the same as that of Zn-critical
plants (Table 2). The plant height was more

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

20 (นอน 500 ml) ใช้ทานอ-CHCl3 (4:1) เป็นการระยะเคลื่อน มีการเก็บรวบรวมเศษ 10 ml เศษส่วนหมายเลข 35-39 รวม และอยู่ภายใต้การ ODS HPLC(Senshu-ปาก ODS 3251D ประชาชน 250 x 8 มม.) และ eluted ที่อัตราการไหลของ 2.5mlmin ~ 1 เป็นดังนี้: 0-20 นาที 45%อควี acetonitrile 20-40 นาที มีการไล่ระดับสีเชิงเส้นของacetonitrile 45 100% 40-45 นาที acetonitrile 100% ที่รักษาเวลาได้ 12-15 นาทีสำหรับ brassinolide และ 20-24นาทีสำหรับ castasteroneเศษส่วนจึง ได้ถูกวิเคราะห์ ด้วย GC-SIMหลังจากปรับและ trimethylsilylation สำหรับก๊าซและ IAAหรือหลัง จากที่ได้ดำเนินการ methaneboronation สำหรับ BRs GC-SIMใช้เครื่องมือ JEOL JMS AX 505 ห้องมี DB-1 แก๊ส และ IAA 5 DB สำหรับ BRs (เจแอนด์วิทยาศาสตร์ W0.25 มม. x 15 m 0.25 มม.ฟิล์มหนา) สำหรับ GAตัวอย่าง ฉีดอุณหภูมิ 220 องศาเซลเซียส คอลัมน์จัดขึ้นที่ 130° C สำหรับ 2 นาทีแรก อุณหภูมิและโปรแกรมเพิ่ม 32° C ต่ำสุด "1-220° C มีนาที 4 isothermal กดค้างไว้ ที่ 220° C และในเวลาต่อมา ที่ 8° Cนาที "1 270° C ด้วยขับ isothermal ถือท้ายโปรแกรม สำหรับตัวอย่างของ IAA ฉีดชั่ว ถูก200 องศาเซลเซียส จัดขึ้นที่ 80° C สำหรับ 1.5 นาที ชั่ว คอลัมน์และเพิ่มขึ้นถึง 130° C ที่ 32° C ต่ำสุด "1 ตาม ด้วยการเพิ่มเติมเพิ่มขึ้นถึง 220° C ในนาที 8° C "1 เงื่อนไขวิเคราะห์สำหรับห้อง ตัวอย่างได้ตามที่อธิบายไว้โดยโยโกต้า et al(1994)กันต่อไปนี้ถูกตรวจสอบเพื่อระบุสาร:GA./fHsJGA, m/z 511/506 และ 496/491 GA * /[2HJGAM, m/z 420/418 และ 405/403 IAA / ^ QJIAAm/z 267/261 และ 208/202 brassinolide/pHdbrassinolidem/z 534/528 และ 161/155 castasterone / [2H 6] castasteronem/z 518/512 และ 161/155 ความเข้มข้นของ GAGA20, IAA, brassinolide และ castasterone ในตัวอย่างคำนวณได้จากอัตราส่วนของพื้นที่ peak ที่ m z 506 /511, 434/437, 418/420, 202/208, 155/161 และ 512/518 ตามลำดับยืนยันการฟื้นตัวของการเจริญเติบโตของพืชจาก Znขาด โดยที่แก๊ส GA3 (20 และ 40 ฟิกลิตร "1) ถูกเพิ่มเข้าไปไม่ Zn ธาตุอาหารโซลูชันในหม้อ 4 ลิตร ในวันที่ 13หลังจากเพิ่ม GA3 (ระยะสั้นกลุ่ม), การเติบโตของพืช Zn ไม่ปรากฏว่าเป็นของสำคัญ Znพืช (ตารางที่ 2) ความสูงของพืชได้มากขึ้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

(. เตียงปริมาตร 500 มล.) โดยใช้เมธานอล 20-CHCl3 (4: 1)
เป็นเฟสเคลื่อนที่ สิบมลเศษส่วนที่ถูกเก็บรวบรวม เศษส่วนเลขที่
35-39 มารวมกันและเป็นไป ODS-HPLC
(ODS Senshu ปาก 3251D; 250x8 มมรหัส)
และชะที่อัตราการไหลของ2.5mlmin ~ 1 ดังนี้ 0-20 นาที, 45%
น้ำ acetonitrile; 20-40 นาทีด้วยการไล่ระดับสีเชิงเส้นของ
45-100% acetonitrile; 40-45 นาที, 100% acetonitrile
เวลาการเก็บรักษาเป็น 12-15 นาที brassinolide และ 20-24
นาที castasterone.
เศษส่วนที่ได้จึงถูกนำมาวิเคราะห์โดย GC-SIM
หลังจาก methylation และ trimethylsilylation สำหรับก๊าซและ IAA
หรือหลัง methaneboronation สำหรับ BRS GC-SIM
ได้ดำเนินการโดยใช้JEOL JMS ขวาน 505
ที่ใช้ในการติดตั้งกับDB-1 สำหรับก๊าซและ IAA และ DB-5 BRS (J & W วิทยาศาสตร์;
0.25 mm x 15 เมตร; 0.25 มิลลิเมตรความหนาของฟิล์ม) สำหรับ GA
ตัวอย่างอุณหภูมิฉีดเป็น 220 ° C คอลัมน์อุณหภูมิถูกจัดขึ้นที่ 130 องศาเซลเซียสเป็นครั้งแรก 2 นาทีและจากนั้นเป็นโปรแกรมที่จะเพิ่มขึ้นที่32 องศาเซลเซียสนาที "1-220 ° C มี4 นาทีถือ isothermal ที่ 220 ° C และต่อมาอยู่ที่ 8 องศาเซลเซียสนาที"1-270 องศาเซลเซียสกับ 10 นาทีถือ isothermal ในตอนท้ายของโปรแกรม สำหรับตัวอย่าง IAA อุณหภูมิฉีดเป็น200 ° C อุณหภูมิคอลัมน์ถูกจัดขึ้นที่ 80 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1.5 นาทีและเพิ่มขึ้นถึง130 ° C ที่ 32 ° C นาที "1 ตามมาด้วยอีกเพิ่มขึ้นถึง220 ° C ที่ 8 องศาเซลเซียสนาที" 1 เงื่อนไขการวิเคราะห์ตัวอย่าง BR ได้ตามที่อธิบายไว้โดยโยโกตะ et al. (1994). ไอออนต่อไปนี้ถูกตรวจสอบเพื่อระบุสารประกอบ:. GA / fHsJGA ,, เมตร / z 511/506 และ 496/491; GA * / [2HJGAM, M / z 420/418 และ 405/403; IAA / ^ QJIAA, ม. / z 267/261 และ 208/202; brassinolide / pHdbrassinolide, ม. / z 534/528 และ 161/155; castasterone / [2H6] castasterone, ม. / z 518/512 และ 161/155 ความเข้มข้นของ GA ,, GA20, IAA, brassinolide และ castasterone ในตัวอย่างจะถูกคำนวณจากอัตราส่วนของพื้นที่สูงสุดที่ม. / z 506/511 434/437, 418/420, 202/208, 155/161 และ 512 / 518 ตามลำดับ. เพื่อยืนยันการฟื้นตัวของการเจริญเติบโตของพืชจากสังกะสีขาดโดยก๊าซ GA3 (20 และ 40 มะเดื่อลิตร "1) ถูกบันทึกอยู่ในสารละลายธาตุอาหารสังกะสีขาดในกระถาง4 ลิตร. ใน 13 วันหลังจากที่นอกเหนือจากGA3 ( กลุ่มในระยะสั้น) การเจริญเติบโตของพืชสังกะสีขาดปรากฏเช่นเดียวกับที่ของธาตุสังกะสีที่มีความสำคัญพืช(ตารางที่ 2). ความสูงของพืชได้มากขึ้น

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

20 ( เตียง เล่มที่ 500 ml ) ใช้ meoh-chcl3 ( 4 : 1 ) เป็น
เฟสเคลื่อนที่ 10 เศษส่วนมลเก็บ เศษส่วน
เลขที่ 35-39 ร่วม และต้อง ods-hplc
( ขายเช่นกัน ปากบอก 3251d ; 250x8 mm ID ) และตัวอย่างที่
อัตราการไหล 2.5mlmin ~ 1 ดังนี้ 0-20 นาที 45 %
สารละลายไน ; 20-40 นาที มีความลาดชันเชิงเส้นของไน 45-100 %
; 40-45 นาที 100% ไน .
เวลาการเก็บรักษาคือ 12-15 นาทีและบราสสิโนไลด์มิน castasterone 20-24
.
เศษส่วนจึงได้วิเคราะห์โดย gc-sim
หลังจาก methylation และ trimethylsilylation สำหรับก๊าซและ IAA
หรือหลัง methaneboronation สำหรับ Brs . gc-sim ดำเนินการ
ใช้จอล jms ขวาน 505 เครื่องมืออุปกรณ์
กับ db-1 สำหรับก๊าซและ IAA db-5 และสำหรับ Brs ( J & W ทางวิทยาศาสตร์ ;
0.25 มม. x 15 เมตร หนา 0.25 มิลลิเมตรฟิล์ม )
สำหรับกาตัวอย่างที่อุณหภูมิ 220 องศา ฉีดเป็นคอลัมน์
อุณหภูมิถูกจัดขึ้นที่ 130 องศา C แรก 2 นาทีแล้ว
เป็นโปรแกรมเพิ่มที่ 32 ° C มิน " 1 220 องศา C
4 นาที อุณหภูมิอยู่ที่ 220 องศาซี และต่อมาที่ 8 ° C
มิน " 1 , 270 ° C 10 นาทีอุณหภูมิไว้ที่ส่วนท้ายของ
โปรแกรม สำหรับตัวอย่าง IAA , temp ฉีดคือ
200 องศา คอลัมน์ temp , จัดขึ้นที่ 80 ° C
1.5 นาทีและเพิ่มขึ้น 130 องศา C ที่ 32 ° C มิน " 1 ตามด้วยเพิ่มอีก 220 องศา C
8 ° C มิน " 1 เงื่อนไขการวิเคราะห์
อย่าง br เป็นตามที่อธิบายไว้โดยโครงการ et al . ( 1994 )
.
ไอออนต่อไปนี้การตรวจสอบเพื่อระบุสารประกอบ :
กา / fhsjga , , M / Z 511 / แล้ว 496 / 491 ; กา * /
[ 2hjgam , M / Z 420 / และ 405 / 403 qjiaa IAA /
;
, m / z 267 / 261 10 / 202 / phdbrassinolide
; บราสสิโนไลด์ ,M / Z / 528 529 และ 161 / 155 / [ ; castasterone 2h6 ] castasterone
, m / z 518 / 512 และ 161 / 155 . ความเข้มข้นของ GA , ,
ga20 IAA , , และบราสสิโนไลด์ castasterone ในตัวอย่าง
คำนวณจากอัตราส่วนพื้นที่สูงสุดที่ m / z 506 /
511 , 434 / 437 418 / 420 , 202 / 208 , 155 / เป็น 512 / 518 ตามลำดับ
ยืนยันการฟื้นตัวของโรงงาน การขาดสังกะสี
โดยก๊าซ GA3 ความเข้มข้น 20 และ 40 มะเดื่อลิตร " 1 ) เพิ่ม

การขาดสังกะสี สารละลายธาตุอาหารใน 4-liter หม้อ ที่ 13 วัน
หลังจากเพิ่ม GA3 ( กลุ่มระยะสั้น ) , การเจริญเติบโตของพืชที่ขาดสังกะสี
ปรากฏเหมือนสังกะสีสําคัญ
พืช ( ตารางที่ 2 ) ความสูงมากขึ้น