The microorganisms were subcultured on Sabouraud dextroseagar (SDA; Acumedia Manufacturers Inc., Lansing,MI, USA) plates supplemented with chloramphenicol (0.05 g/l) and incubated at 37oC for 48 h. To prepare the yeast inocula, two loopfuls of the agar cultures were transferred to 5 ml of RPMI 1640 medium (Sigma-Aldrich, St.Louis, MO, USA) and incubated at 37oC overnight in an orbital shaker (75 rpm). Cells of the resultant cultures were harvested and washed twice with phosphate-buffered saline (PBS, pH 7.2) at 4,000 ×g for 5 min. Washed microorganisms were resuspended in PBS and spectrophotometrically standardized at an optical density of 520 nm (Biospectro, Equipar Ltda, Curitiba, PR, Brazil) to a final concentration of 108 CFU/ml (colony forming units per ml).
จุลินทรีย์ที่ถูกเลี้ยงใน Sabouraud dextroseagar (SDA; Acumedia ผู้ผลิตอิงค์ Lansing, MI, USA) เสริมด้วยแผ่น chloramphenicol (0.05 กรัม / ลิตร) และบ่มที่ 37oC เป็นเวลา 48 ชั่วโมง เพื่อเตรียมความพร้อม inocula ยีสต์สอง loopfuls ของวัฒนธรรมวุ้นถูกโอนไปยัง 5 มิลลิลิตร RPMI 1640 กลาง (Sigma-Aldrich, เซนต์หลุยส์, MO, USA) และบ่มที่ 37oC ค้างคืนในเครื่องปั่นโคจร (75 รอบต่อนาที) เซลล์ของวัฒนธรรมผลเก็บเกี่ยวและล้างสองครั้งด้วยน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอสพีเอช 7.2) 4,000 ×กรัมเป็นเวลา 5 นาที จุลินทรีย์ล้างถูก resuspended ในพีบีเอสและมาตรฐานความหนาแน่นของแสง 520 นาโนเมตร (Biospectro, Equipar Ltda กูรีตีบา, PR, ประเทศบราซิล) เพื่อความเข้มข้นสุดท้ายของ 108 CFU / ml (อดีตอาณานิคมหน่วยต่อมิลลิลิตร) spectrophotometrically
การแปล กรุณารอสักครู่..