Experimental animalsMale Sprague Da

Experimental animals
Male Sprague Dawley rats (SLC), weighing 250 g (7 weeks) at the beginning of the experiments, were used in this study. The animals were kept two to three per cage under a 12 h light/dark cycle (light between 7:00 A.M. and 7:00 P.M.) in an air-conditioned room (22−24°C). They had food and water ad libitum throughout the experiment. All experiments were conducted according to the Regulations for Animal Experiments in Nagoya University, and the Fundamental Guidelines for Proper Conduct of Animal Experiments and Related Activities in Academic Research Institutions in Japan.
Protocol for LC, SC, and stretching of the extensor digitorum longus muscle
LC and SC.
LC was applied as reported previously (Taguchi et al., 2005a). Briefly, on day 0 the animals were anesthetized with sodium pentobarbital (50 mg/kg, i.p.). LC was induced in the lower hindleg extensors [mainly the extensor digitorum longus (EDL) muscle] by electrical stimulation of the common peroneal nerve through a pair of needle electrodes inserted near the nerve. Electrical stimulation with the following parameters was applied for 1 s: current strength of three times the twitch threshold (

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

สัตว์ทดลองชาย Sprague Dawley หนู (SLC), น้ำหนัก 250 g (7 สัปดาห์) ที่เริ่มต้นการทดลอง ถูกใช้ในการศึกษานี้ สัตว์ถูกเก็บไว้สองถึงสามต่อกรงภายใต้วงจรไฟ/มืด 12 h (แสงระหว่างเวลา 7:00 น.และ 19:00 น.) ในห้องปรับอากาศ (22−24 ° C) พวกเขามีอาหารและน้ำที่ ad libitum ทดลอง ทดลองทั้งหมดได้ดำเนินการตามกฎระเบียบสำหรับการทดลองสัตว์ในมหาวิทยาลัยนาโกย่า และแนวทางพื้นฐานสำหรับกิจกรรมที่เกี่ยวข้องในสถาบันการศึกษาวิจัยในประเทศญี่ปุ่นและเหมาะสมดำเนินการของสัตว์ทดลองโพรโทคอลสำหรับ LC, SC และยืดของการเอกซ์เทนเซอร์กล้ามเนื้อLC และ SC.ใช้ LC ตามรายงานก่อนหน้านี้ (Taguchi et al., 2005a) สั้น ๆ ในวันที่ 0 สัตว์ถูกด้วยกับโซเดียม pentobarbital (50 mg/kg, i.p.) LC ถูกเหนี่ยวนำใน extensors hindleg ล่าง [ส่วนใหญ่เอกซ์เทนเซอร์ (รอบ) กล้ามเนื้อ] โดยกระตุ้นไฟฟ้าของเส้นประสาท peroneal ทั่วไปผ่านคู่หุงตเข็มแทรกใกล้เส้นประสาท กระตุ้นไฟฟ้า ด้วยพารามิเตอร์ต่อไปนี้ใช้สำหรับ 1 s:ปัจจุบันความแรงของเวลาสามขีดจำกัด twitch (< 100 μA) และความถี่ 50 Hz กับชีพจรระยะเวลาของนางสาว 1 เท้า plantar ก๊อก flexed ใน synchrony กับการหดตัวของกล้ามเนื้อด้วยการใช้ของ servomotor linearized (CPL28T08B 06C2T โอเรียนทัลมอเตอร์) ยืด extensors hindleg ล่างแล้ว ส่งกลับไปยังตำแหน่งเริ่มต้นกว่า 3 ตัว s ที่เหลือระยะเวลาการ รอบนี้มีซ้ำจำนวนการทำซ้ำ 500 วิธีการอันคุ้มค่ากับที่สำหรับ LCs ยกเว้นของการยืดกล้ามเนื้อได้ หลังจากหนูกู้จากยาหลังออกกำลังกาย พวกเขาทำงาน กิน แล้วดื่มตามปกติยืดกล้ามเนื้อเพื่อให้เร่งรัดยืดคล้ายกับว่า ระหว่าง LC ตรงยืดของรอบกล้ามเนื้อทำดังนี้ ทำบน dorsum ของ hindpaw ขวาแผลขนาดเล็ก (∼0.5 ซม.) และเอ็นของกล้ามเนื้อรอบถูกแยกออกจากเนื้อเยื่อเกี่ยวพันโดยรอบ และควบแน่น พวกเขาถูกดึงด้วยตนเอง โดย ∼2 มม.สำหรับ 1 s ขณะเข่าคง โดยแท่งอะครีลิคสองจากทั้งสองฝ่าย และจากนั้น กลับไปเริ่มต้นตำแหน่งกว่า 3 s รอบนี้ได้ซ้ำเวลา 500 เดียวกับ LC เอ็นของกล้ามเนื้อรอบ contralateral ยังควบ โดยไม่มีการยืด และทำหน้าที่เป็นตัวควบคุมถอนขีดจำกัดการวัดAnalgesiometer Randall – Selitto (Ugo Basile) พร้อม ด้วยโพรบของปลายเส้นผ่าศูนย์กลาง 2.6 มม.ใช้วัดขีดจำกัดของถอนของ extensors ของ hindleg ล่าง (รวมกล้ามเนื้อรอบ) โพรบแบบของปลายเส้นผ่าศูนย์กลาง 5 มม.ใช้วัดขีดจำกัดของกล้ามเนื้อ gastrocnemius ถอน วัดกล้ามเนื้อกลจำกัด nociceptive (ทะกะฮะชิ et al., 2005 การอนุญาตให้ใช้โพรบที่ มีเส้นผ่าศูนย์กลางแนะนำ ≥2.6 มม. บริการร้อยเอ็ด al., 2010) สัตว์ถูกยับยั้งรอบลำตัวด้วยผ้าขนหนูสงบพวกเขา และถือว่าเบา ๆ ในระหว่างการทดลอง โพรบที่ใช้ท้อง extensors hindleg ล่างหรือท้องด้านข้างของกล้ามเนื้อ gastrocnemius ผ่านผิว shaved ตั้งความเร็วบังคับใช้ที่ 157 mN s และมีการตัดของ mN 2450 สำหรับการโหลดเพื่อหลีกเลี่ยงการทำลายเนื้อเยื่อ ความรุนแรงของความดันที่ทำให้เกิดปฏิกิริยาการหลบหนีถูกกำหนดเป็นขีดจำกัดถอน ชุดแต่ละชุดการทดลองที่ดำเนินการที่เกือบจะช่วงเวลาเดียวกันระหว่างวันเพื่อหลีกเลี่ยงความผันผวน circadian มีดำเนินการฝึกอบรมวันที่สี่ติดต่อกัน วัดดำเนิน 7 หรือ 10 ครั้งในช่วงเวลาหลายนาที และค่าเฉลี่ยของการทดลอง 5 หลังถูกใช้เป็นขีดจำกัดExperimenters ตาบอดหนูที่ รับการรักษา (LC, SC ยืดหรือ), ยา รถได้ยาเสพติด การคำนวณเปอร์เซ็นต์ปราบปรามของ hyperalgesia โดยยาเสพติด และกำหนดเวลาBradykinin ตัว140 จอบ (B2 ปฏิปักษ์ 0.01, 0.1 mg/kg ซิก) และ 140 จอบ des Arg10 (ปฏิปักษ์ B1, 0.1 mg/kg ซิก) ละลายในน้ำเกลือ และ subcutaneously ฉีดเข้าไปในผิวหนังของหลัง 30 นาที ก่อนออกกำลังกาย หรือ 30 นาทีก่อนวัดขีดจำกัดกลถอนในวันที่สองหลังจากออกกำลังกาย 140 จอบยังถูกฉีดในกลุ่มอื่นสัตว์ 30 นาทีหลังออกกำลังกาย ตัวนี้มีเฉพาะตัวรับ (เก้าร้อยเอ็ด al., 1991 Wirth et al., 1991), และ dosages ใช้พอ antagonize bradykinin ในรูปแบบของความเจ็บปวดในการผ่าตัด (Muratani et al., 2005) และเงื่อนไขอักเสบ (จิ้งจอกและ al., 2003)ปราบปรามการเปอร์เซ็นต์ที่ลดลงในขีดจำกัดถอนกลกล้ามเนื้อถูกคำนวณดังนี้ ความแตกต่างในขีดจำกัดถอน 2 d หลังออกกำลังกายจาก −1 วันในกลุ่มยานพาหนะ (Δthreshold veh) หรือกลุ่มยา (Δthreshold-ยา) ที่มีคำนวณ และความแตกต่าง (ปราบปราม) ระหว่าง Δthreshold ยา Δthreshold veh ตามปกติกับ Δthreshold-veh และแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ป้องกัน-NGF แอนติบอดีแอนติบอดีต่อต้าน NGF (10 หรือ 30 μg, R & D ระบบ) ถูกฉีดผม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สัตว์ทดลองหนูชายปราก Dawley (SLC) น้ำหนัก 250 กรัม (7 สัปดาห์) ที่จุดเริ่มต้นของการทดลองที่ถูกนำมาใช้ในการศึกษานี้
สัตว์ที่ถูกเก็บไว้ 2-3 ต่อกรงภายใต้แสง 12 ชั่วโมง / รอบมืด (แสง 7:00-07:00) ในห้องปรับอากาศ (22-24 ° C) พวกเขามีอาหารและน้ำโฆษณา libitum ตลอดการทดลอง การทดลองทั้งหมดถูกดำเนินการตามกฎระเบียบสำหรับการทดลองในสัตว์ในนาโกย่ามหาวิทยาลัยและแนวทางพื้นฐานสำหรับการดำเนินการที่เหมาะสมของกิจกรรมการทดลองและที่เกี่ยวข้องสัตว์ในวิชาการวิจัยสถาบันในประเทศญี่ปุ่น.
พิธีสารสำหรับ LC, SC, และยืดของยืด digitorum longus กล้ามเนื้อ
LC และ SC.
LC ถูกนำไปใช้เป็นรายงานก่อนหน้านี้ (Taguchi et al., 2005A) สั้น ๆ ในวันที่ 0 สัตว์ที่ถูกดมยาสลบที่มีโซเดียม Pentobarbital (50 mg / kg IP) LC ถูกชักนำในระดับที่ต่ำ extensors hindleg [ส่วนใหญ่ยืด digitorum longus (EDL) กล้ามเนื้อ] โดยการกระตุ้นไฟฟ้าของเส้นประสาท peroneal ร่วมกันผ่านคู่ของขั้วเข็มแทรกอยู่ใกล้กับเส้นประสาท การกระตุ้นไฟฟ้าที่มีพารามิเตอร์ต่อไปนี้ถูกนำมาใช้เป็นเวลา 1 s: ความแข็งแรงปัจจุบันของสามครั้งเกณฑ์ชัก (ที่ <100 ต) และความถี่ 50 เฮิร์ตซ์ที่มีระยะเวลาชีพจรของ 1 มิลลิวินาที ร่วมข้อเท้าถูกฝ่าเท้าเกร็งได้พร้อมกล้ามเนื้อหดที่มีการใช้กระตุก linearized (CPL28T08B-06C2T, โอเรียนเต็ลมอเตอร์) จะยืดต่ำ extensors hindleg แล้วกลับไปที่ตำแหน่งเริ่มต้นในช่วงระยะเวลา 3 วินาทีที่พักผ่อน รอบนี้ซ้ำรวม 500 ซ้ำ วิธีการ SCs เป็นแบบเดียวกับที่สำหรับ LCs ยกเว้นกรณีที่ไม่มีการยืดกล้ามเนื้อ หลังจากที่หนูหายจากการระงับความรู้สึกหลังการออกกำลังกายที่พวกเขาประพฤติกินและดื่มได้ตามปกติ.
ยืดกล้ามเนื้อ.
เพื่อให้แน่ใจว่าเข้มข้นยืดคล้ายกับว่าในช่วง LC, โดยตรงยืดของกล้ามเนื้อ EDL ได้ดำเนินการดังต่อไปนี้ แผลขนาดเล็ก (~0.5 ซม.) ในวันที่ dorsum ของ hindpaw ขวาและเส้นเอ็นของกล้ามเนื้อ EDL ถูกแยกออกจากเนื้อเยื่อเกี่ยวพันรอบ ligated แน่นที่ พวกเขาถูกดึงด้วยตนเองโดย ~2 มม 1 วินาทีในขณะที่หัวเข่าได้รับการแก้ไขโดยสองแท่งอะคริลิจากทั้งสองฝ่ายและจากนั้นกลับไปที่ตำแหน่งเริ่มต้นมากกว่า 3 s รอบนี้ซ้ำ 500 ครั้งเช่นเดียวกับใน LC เส้นเอ็นของกล้ามเนื้อ contralateral EDL ยัง ligated โดยไม่ต้องยืดและทำหน้าที่เป็นตัวควบคุม.
เกณฑ์การวัดการถอนแรนดอ-Selitto analgesiometer (Ugo Basile) พร้อมกับการสอบสวนของเส้นผ่าศูนย์กลางปลาย 2.6 มมถูกนำมาใช้ในการวัดเกณฑ์การถอนตัวของ extensors ของ ต่ำกว่า hindleg (EDL กล้ามเนื้อรวม)
สอบสวนของเส้นผ่าศูนย์กลางปลาย 5 มมถูกใช้ในการวัดเกณฑ์การถอนตัวของกล้ามเนื้อน่องที่ การใช้งานของหัววัดที่มีเส้นผ่าศูนย์กลางปลาย≥2.6มมช่วยให้การวัดกล้ามเนื้อกลเกณฑ์เจ็บปวด (ทากาฮาชิ et al, 2005;.. สุ et al, 2010) สัตว์ที่ถูกยับยั้งรอบลำต้นด้วยผ้าขนหนูที่จะสงบพวกเขาและรับการรักษาเบา ๆ ในระหว่างการทดลอง สอบสวนถูกนำไปใช้ท้องของที่ต่ำกว่า extensors hindleg หรือหน้าท้องด้านข้างของกล้ามเนื้อน่องผ่านผิวโกน ความเร็วของการบังคับใช้เป็นที่ตั้ง 157 mN / s และมีการตัดของ 2450 mN สำหรับการโหลดเพื่อหลีกเลี่ยงความเสียหายของเนื้อเยื่อที่ ความเข้มของความดันที่ก่อให้เกิดปฏิกิริยาการหลบหนีถูกกำหนดเป็นเกณฑ์การถอน ชุดการทดลองแต่ละคนได้รับการดำเนินการที่เกือบจะเป็นเวลาเดียวกันในระหว่างวันเพื่อหลีกเลี่ยงความผันผวนเป็นกลาง การฝึกอบรมได้ดำเนินการอย่างน้อยสี่วันติดต่อกัน วัดได้ดำเนินการ 7 หรือ 10 ครั้งในช่วงเวลาหลายนาทีและค่าเฉลี่ยของหลังห้าการทดลองถูกนำมาเป็นเกณฑ์.
ทดลองตาบอดที่หนูได้รับการรักษา (LC, SC, หรือยืด), ยาเสพติดหรือยานพาหนะ .
ยาเสพติด, การคำนวณของการปราบปรามร้อยละของ hyperalgesia
จากยาเสพติดและเวลาที่กำหนดคู่อริBradykinin.
จอบ 140 (ศัตรู B2, 0.01, 0.1 mg / kg ซิก) และ des-Arg10-HOE 140 (ศัตรู B1, 0.1 mg / kg ซิก ) ถูกกลืนหายไปในน้ำเกลือและฉีดเข้าใต้ผิวหนังเข้าสู่ผิวของกลับมา 30 นาทีก่อนออกกำลังกายหรือ 30 นาทีก่อนที่จะวัดเกณฑ์การถอนกลในวันที่สองหลังการออกกำลังกาย HOE 140 ถูกฉีดยังอยู่ในกลุ่มของสัตว์ 30 นาทีหลังการออกกำลังกายอีก คู่อริเหล่านี้จะเฉพาะรับ (Hock et al, 1991;.. เวิร์ ธ , et al, 1991) และโดที่ใช้มีเพียงพอที่จะกลายเป็น bradykinin ในรูปแบบที่มีอาการปวดหลังการผ่าตัดและเงื่อนไขอักเสบ (ฟ็อกซ์, et al (Muratani et al, 2005). ., 2003).
การปราบปรามร้อยละของการลดลงของเกณฑ์การถอนตัวของกล้ามเนื้อกลที่คำนวณได้ดังต่อไปนี้ ความแตกต่างในเกณฑ์ถอน 2 d หลังการออกกำลังกายจากว่าในวัน -1 ในกลุ่มยานพาหนะ (Δthreshold-VEH) หรือกลุ่มยาเสพติด (Δthresholdยาเสพติด) จะถูกคำนวณและความแตกต่าง (ปราบปราม) ระหว่างΔthresholdยาเสพติดและΔthreshold-VEH เป็นปกติด้วย Δthreshold-VEH และแสดงเป็นร้อยละ.
แอนติบอดีต่อต้านเอ็นจี.
แอนติบอดี้ต่อต้าน NGF (10 หรือ 30 ไมโครกรัมวิจัยและพัฒนาระบบ) ถูกฉีดผม