ข้อถือสิทธิ1. A culture chamber ซึ่

ข้อถือสิทธิ

1. A culture chamber ซึ่งประกอบรวมด้วย a plurality of recesses each formed of a bottom portion and an opening portion, wherein
5 the bottom portion has one of a hemispherical shape and a truncated cone shape,
the opening portion is defined by a wall that surrounds an area from a boundary between the opening portion and the bottom portion to an end of each of the recesses, the wall having a taper angle in a range from 1 degree to 20 degrees,
an equivalent diameter of the boundary is in a range from 50 gm to 2 mm and a depth 10 from a bottom of the bottom portion to the end of each of the recesses is in a range from 0.6 or
more times to 3 or less times the equivalent diameter, and
the wall defining the opening portion forms a surface continuous to the bottom portion, and an inclination of the continuous surface changes at the boundary.


15 2. The culture chamber according to ข้อถือสิทธิ 1, wherein the end of each of the recesses
has one of a hemispherical shape, a trapezoidal shape, and an inverted triangular shape.


3. The culture chamber according to ข้อถือสิทธิ 1 or 2, wherein an area between two
adjacent recesses is flat and a distance between the two recesses is in a range from 5 pm to 50 20


4. The culture chamber according to any one of ข้อถือสิทธิ 1 to 3, wherein the culture
chamber is a resin molding formed of one or a combination of two or more selected from the
group consisting of acrylic resin, polylactic acid, polyglycolic acid, styrene resin, acrylic styrene 25 copolymer resin, polycarbonate resin, polyester resin, polyvinyl alcohol resin, ethylene vinyl
alcohol copolymer resin, thermoplastic elastomer, vinyl chloride resin, and silicon resin.
5. The culture chamber according to any one of ข้อถือสิทธิ 1 to 4, wherein a functional
group is formed on the recesses by a surface modification treatment method of any one of
30 plasma treatment, glass coating, corona discharge, and UV ozonation, or a combination thereof
and the treatment is performed so that a water contact angle becomes 45 degrees or less.


6. The culture chamber according to any one of ข้อถือสิทธิ 1 to 5, wherein a hydrophilic
polymer chain that inhibits cell adhesion is immobilized in the recesses.





23

7. The culture chamber according to any one of ข้อถือสิทธิ 1 to 6, wherein a phospholipid or a phospholipid-polymer complex is immobilized in the recesses.


5 8. The culture chamber according to any one of ข้อถือสิทธิ 1 to 7, wherein each of the
recesses has a cell non-adhesive surface on which at least one polymer of a hydrophilic polymer
chain that inhibits cell adhesion, and a phospholipid, or a phospholipid-polymer complex is
immobilized after a functional group is formed in the recesses by a surface modification
treatment method of any one of plasma treatment, glass coating, corona discharge, and UV
10 ozonation, or a combination thereof and the treatment is perfoiined so that a water contact angle
becomes 45 degrees or less.
9. The culture chamber according to ข้อถือสิทธิ 8, wherein the hydrophilic polymer chain is poly(hydroxyethyl methacrylate).
15
10. The culture chamber according to ข้อถือสิทธิ 9, wherein an average molecular weight of the poly(hydroxyethyl methacrylate) is 100,000 or more.
11. A culture method that uses a culture chamber according to any one of ข้อถือสิทธิ 1 to 20 10, the culture method ซึ่งประกอบรวมด้วย:
dispersing cells into a medium, a total number of the cells being equal to or greater than a number N of the recesses of the culture chamber and equal to or less than a number obtained by multiplying the number N of the recesses by a value obtained by dividing a volume V1 of a
space defined by each of the recesses by a volume V2 of cells to be seeded; and
25 adding the medium to the culture chamber.

12. The culture method according to ข้อถือสิทธิ 11, wherein one spheroid is formed in one space defined by each of the recesses.


30 13. The culture method according to ข้อถือสิทธิ 12, wherein a spheroid is formed in the
space and the spheroid is allowed to grow.

14. The culture method according to ข้อถือสิทธิ 12 or 13, wherein a spheroid is formed in the space and is differentiated and induced.





24

15. The culture method according to any one of ข้อถือสิทธิ 11 to 14, wherein 60% or more of a total number of spheroids formed in the culture chamber have a diameter in a range of 15% of an average spheroid diameter.
5
16. The culture method according to any one of ข้อถือสิทธิ 11 to 15, wherein cells in the recesses are recovered by agitating the medium.

17. The culture method according to ข้อถือสิทธิ 16, wherein the agitation of the medium is 10 done by any one of the following means: agitation of the medium by shaking the culture
chamber; agitation of the medium by sucking and discharging the medium; agitation of the
medium by disposing a stirring blade in the culture chamber; and agitation of the medium by
placing a stirrer in the culture chamber, or a combination thereof


15 18. The culture method according to any one of ข้อถือสิทธิ 11 to 17, wherein the medium
is replaced at least once, and 20% or more of the medium is replaced.


19. A culture method for cell seeding, cell culture, replacement of a medium, and
harvesting of cells by using a culture chamber according to any one of ข้อถือสิทธิ 1 to 10, the culture 20 method ซึ่งประกอบรวมด้วย the steps of:
a) dispersing cells into a medium, the number of the cells being equal to or greater than a number n of recesses of the culture chamber and equal to or less than a number obtained by multiplying the number n of the recesses by a value obtained by dividing a volume V of each of the recesses by a volume v of cells to be seeded, and adding the medium to the culture chamber;
25 b) culturing the cells in the culture chamber for 12 hours or more to form a spheroid;
c) sucking 20% or more of the medium and then injecting the same amount of fresh medium;
d) repeating the steps a) to c) a plurality of times to allow the spheroid to grow;
e) allowing the spheroid to grow to a desired size and then agitating the medium to 30 suspend the cells within the recesses in the medium; and
f) sucking the medium including the cells by a suction machine to recover the cells.





25
ABSTRACT

A microspace structure for highly efficiently producing spheroids of uniform size and
easily replacing and recovering culture medium is designed, and a culture vessel having the designed microspace structure is provided. A plurality of recesses (10) comprising a bottom part (11) and an opening part (12) are arranged in the culture vessel. The
bottom part (11) has the shape of either a hemisphere or a truncated cone, and the
opening part (12) is constituted by walls having a taper angle of from 1° to 20° and
surrounding an area from the boundary with the bottom part (11) to the end part of the recess (10). In addition, the equivalent diameter at the boundary is from 50 pm to 2 mm, the depth from the bottom of the bottom part (11) to the end part is 0.6 to 3 times the equivalent diameter, the walls constituting the opening part (12) form a continuous
surface with the bottom part (11), and the slope of the continuous surface changes at the boundary.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ข้อถือสิทธิ1.ซึ่งประกอบรวมด้วยหอวัฒนธรรมได้ recesses แต่ละรูปส่วนล่างและส่วนเปิด นั้น5 ส่วนล่างมีรูปครึ่งและรูปตัดกรวยส่วนการเปิดไว้ตามกำแพงที่ล้อมรอบพื้นที่ขอบระหว่างส่วนการเปิดและส่วนล่างจากการสิ้นสุดของแต่ละ recesses ผนังที่มีความเรียวมุมในช่วงจาก 1 องศา 20 องศาเส้นผ่าศูนย์กลางเท่าของขอบเขตอยู่ในช่วงตั้งแต่ 50 กรัม 2 มม. และความลึก 10 จากด้านล่างของส่วนล่างของ recesses ในแต่ละแห่งตั้งแต่ 0.6 หรือ ครั้งเป็น 3 หรือน้อยกว่าเวลาเทียบเท่ากับเส้นผ่าศูนย์กลาง และผนังที่กำหนดส่วนการเปิดรูปแบบพื้นผิวอย่างต่อเนื่องกับส่วนล่าง และมีความเอียงของพื้นผิวต่อเนื่องเปลี่ยนแปลงไปในขอบเขต15 2 วัฒนธรรม chamber ตามข้อถือสิทธิ 1 นั้นสิ้น recesses ในแต่ละมีรูปร่างครึ่ง รูป trapezoidal และเป็นรูปสามเหลี่ยมหัวกลับ3. วัฒนธรรม chamber ตามข้อถือสิทธิ 1 หรือ 2 นั้นพื้นที่ระหว่างสองrecesses ติดแบน และระยะห่างระหว่าง recesses สองในช่วงตั้งแต่เวลา 5 โมง 50 204. วัฒนธรรม chamber ตามใดของข้อถือสิทธิ 1 ถึง 3 นั้นวัฒนธรรมหอการค้าคือ เรซิ่นเป็นริ้วรูปแบบหนึ่งหรือการรวมกันของสอง หรือเลือกจากการกลุ่มที่ประกอบด้วยอคิ กรดเกิดสารประกอบเชิงซ้อน กรด polyglycolic สไตรีนอยาง สไตรีนอคริลิค 25 โคพอลิเมอร์เรซิ่น เรซิ่นโพลีคาร์บอเนต โพลีเอสเตอร์เรซิ่น เรซิ่นโพลีไวนิลแอลกอฮอล์ เอทิลีนไวนิล ยางโคพอลิเมอร์ของแอลกอฮอล์ จักรยานยนต์เทอร์โมพลาสติก ไวนิลคลอไรด์เรซิน กยางซิลิคอน5. วัฒนธรรม chamber ตามใดของข้อถือสิทธิ 1 4 นั้นการทำงาน กลุ่มจะเกิดขึ้นใน recesses โดยวิธีรักษาแก้ไขพื้นผิวใด ๆ รักษาพลาสม่า 30 เคลือบแก้ว ปรากฏการณ์ และ UV กัมมันต์ หรือชุดดังกล่าว และการรักษาจะดำเนินการเพื่อ ให้เป็นน้ำติดต่อมุมเป็น 45 องศา หรือน้อยกว่า6. วัฒนธรรม chamber ตามใดของข้อถือสิทธิ 1 5 นั้นเป็น hydrophilicโซ่พอลิเมอร์ที่ยับยั้งเซลล์ยึดเกาะถูกตรึงใน recesses ใน 237.วัฒนธรรมหอตามใดของข้อถือสิทธิ 1 กับ 6 นั้นเป็นฟอสโฟลิพิดหรือพอลิเมอร์ฟอสโฟลิพิดที่ซับซ้อนถูกตรึงใน recesses ใน5 8 วัฒนธรรม chamber ตามอย่างใดอย่างหนึ่ง 1 ถึง 7 ข้อถือสิทธินั้นแต่ละrecesses มีพื้นผิวไม่ใช่กาวเซลล์ในโพลิเมอร์ที่น้อยของพอลิเมอร์ hydrophilic เป็นห่วงโซ่ที่ยับยั้งเซลล์ยึด เกาะ และฟอสโฟลิพิดเป็น หรือพอลิเมอร์ฟอสโฟลิพิดที่ซับซ้อน หาหลังจากที่กลุ่ม functional จะเกิดขึ้นใน recesses ใน โดยปรับเปลี่ยนพื้นผิว วิธีการรักษาของหนึ่งรักษาจอพลาสม่า เคลือบแก้ว ปรากฏการณ์ และ UV กัมมันต์ 10 หรือชุดดังกล่าว และการรักษาเป็น perfoiined เพื่อให้น้ำติดต่อมุม กลายเป็น 45 องศา หรือน้อยกว่านั้น9.วัฒนธรรมหอตามข้อถือสิทธิ 8 นั้นโซ่พอลิเมอร์ hydrophilic คือ poly(hydroxyethyl methacrylate)1510.วัฒนธรรมหอตามข้อถือสิทธิ 9 นั้นมีน้ำหนักโมเลกุลเฉลี่ยของ poly(hydroxyethyl methacrylate) เป็น 100000 หรือมากกว่า11. วัฒนธรรมวิธีการที่ใช้เป็นหอวัฒนธรรมตามหนึ่งข้อถือสิทธิ 1 20 10 ซึ่งประกอบรวมด้วยวิธีวัฒนธรรม:สลายเซลล์เป็นสื่อ รวมจำนวนเซลล์เท่ากับ หรือมากกว่าจำนวน N recesses ของหอวัฒนธรรม และเท่ากับ หรือน้อยกว่าตัวเลขที่ได้คูณจำนวน N recesses โดยค่าที่ได้จากการหารปริมาตร V1 ของการ กำหนด โดยปริมาตร V2 ของเซลล์สามารถ seeded โดย recesses ในแต่ละพื้นที่ และ25 เพิ่มสื่อหอวัฒนธรรม12. วัฒนธรรมวิธีการตามข้อถือสิทธิ 11 ทรงคล้ายทรงกลมหนึ่งจะเกิดขึ้นในพื้นที่หนึ่งที่กำหนด โดยแต่ละ recesses ในนั้น30 13 วิธีวัฒนธรรมตามข้อถือสิทธิ 12 นั้นทรงคล้ายทรงกลมมีรูปแบบในการพื้นที่และทรงคล้ายทรงกลมที่สามารถเติบโต14.วิธีวัฒนธรรมตามข้อถือสิทธิ 12 หรือ 13 นั้นทรงคล้ายทรงกลมเกิดขึ้นในพื้นที่จะแตกต่างกัน และเกิด 2415. วัฒนธรรมวิธีการตามอย่างใดอย่างหนึ่งข้อถือสิทธิ 11 กับ 14 นั้น 60% หรือมากกว่าของจำนวน spheroids ที่เกิดขึ้นในหอวัฒนธรรมมีเส้นผ่าศูนย์กลางที่ มี 15% ของเส้นผ่าศูนย์กลางทรงคล้ายทรงกลมโดยเฉลี่ย516.วัฒนธรรมวิธีตามหนึ่ง 11 กับ 15 ข้อถือสิทธินั้นเซลล์ใน recesses การกู้คืน โดย agitating สื่อการ17. วัฒนธรรมวิธีตามข้อถือสิทธิ 16 นั้นอาการกังวลต่อกลางคือ 10 ทำได้ โดยวิธีต่อไปนี้หนึ่งใด ๆ: ปั่นป่วนของสื่อโดยวัฒนธรรมสั่นคลื่น หอการค้า อาการกังวลต่อกลางดูด และปล่อยกลาง ปั่นป่วนของคลื่น โดยทิ้งใบมีด stirring ในหอวัฒนธรรม ปานกลาง และปั่นป่วนของสื่อโดยคลื่น ทำเป็นช้อนคนในหอวัฒนธรรม หรือชุดดังกล่าว15 18 วิธีวัฒนธรรมตามหนึ่งข้อถือสิทธิ 11 กับ 17, wherein สื่อถูกแทนอย่างน้อยหนึ่งครั้ง และ 20% หรือมากกว่าของสื่อจะถูกแทน19. วัฒนธรรมวิธีการปลูกเซลล์ การเพาะเลี้ยงเซลล์ แทนสื่อ และเก็บเกี่ยวเซลล์โดยหอวัฒนธรรมตามหนึ่งข้อถือสิทธิ 1-10 ซึ่งประกอบรวมด้วยวัฒนธรรม 20 วิธีการขั้นตอน:ก) สลายเซลล์เป็นสื่อ จำนวนเซลล์จะเท่ากับ หรือมากกว่าตัวเลข n ของ recesses ของหอวัฒนธรรม และเท่ากับ หรือน้อยกว่าตัวเลขที่ได้คูณ n ของ recesses โดยค่าที่ได้จากการหารปริมาตร V recesses ด้วย v ปริมาตรของเซลล์จะ seeded แต่ละหมายเลข และเพิ่มสื่อหอวัฒนธรรม25 บี) culturing เซลล์ในหอวัฒนธรรมใน 12 ชั่วโมงหรือมากกว่าเพื่อเป็นทรงคล้ายทรงกลมc) ดูด 20% หรือมากกว่าของสื่อ และ injecting สดกลาง จำนวนเดียวกันแล้วd) ทำซ้ำขั้นตอน) ถึง c) ได้เวลาให้ทรงคล้ายทรงกลมโตอี) ให้ทรงคล้ายทรงกลมโตขนาดต้อง และ agitating ปานกลางถึง 30 แล้ว ระงับเซลล์ภายใน recesses ในกลาง และf) ดูดสื่อรวมถึงเซลล์ โดยเครื่องดูดเซลล์การกู้คืน 25บทคัดย่อMicrospace โครงสร้างการผลิต spheroids ขนาดสม่ำเสมอได้อย่างมีประสิทธิภาพสูง และแทนได้ และการกู้คืนสื่อวัฒนธรรมแห่ง และเรือวัฒนธรรมมีโครงสร้าง microspace ที่ออกแบบไว้ หลายฝ่ายของ recesses (10) ประกอบด้วยส่วนล่าง (11) และส่วนเปิด (12) จะถูกจัดเรียงในเรือวัฒนธรรม ที่ ส่วนล่าง (11) มีรูปร่างเป็นซีกโลกหรือกรวยตัด และ เปิดส่วน (12) จะทะลัก ด้วยกำแพงที่มีความเรียวมุมจาก 1° ถึง 20° และ รอบพื้นที่จากขอบกับส่วนล่าง (11) ไปยังส่วนท้ายของย่อมุม (10) นอกจากนี้ เส้นผ่าศูนย์กลางเท่ากับขอบเขตที่มาจาก 50 pm 2 มม. ลึกจากด้านล่างของส่วนล่าง (11) ส่วนสุดท้ายคือ 0.6 ถึง 3 เท่าเทียบเท่ากับเส้นผ่าศูนย์กลาง ผนัง พ.ศ.2542 (12) ส่วนเปิดฟอร์มแบบต่อเนื่อง พื้นผิวส่วนล่าง (11), และความชันของการเปลี่ยนแปลงผิวอย่างต่อเนื่องในขอบเขต

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ข้อถือสิทธิ1 ห้องที่วัฒนธรรมซึ่งประกอบรวมด้วยส่วนใหญ่ของซุ้มแต่ละเกิดขึ้นจากส่วนล่างและส่วนที่เปิดประเด็น5 ส่วนด้านล่างมีหนึ่งในรูปทรงครึ่งวงกลมและรูปทรงกรวยที่ถูกตัดทอนส่วนการเปิดตัวจะถูกกำหนดโดยกำแพงที่ล้อมรอบพื้นที่จากเขตแดนระหว่างส่วนการเปิดและส่วนล่างไปยังจุดสิ้นสุดของแต่ละซุ้มที่เป็นผนังที่มีมุมเรียวในช่วงตั้งแต่วันที่ 1 องศาถึง 20 องศาเส้นผ่าศูนย์กลางเทียบเท่าเขตแดนอยู่ในช่วงจาก50 กรัม 2 มิลลิเมตรและความลึก 10 จากด้านล่างของส่วนล่างไปยังจุดสิ้นสุดของแต่ละซุ้มที่เป็นอยู่ในช่วงจาก 0.6 หรือครั้งถึง3 หรือน้อยกว่าครั้งเส้นผ่าศูนย์กลางเทียบเท่าและผนังกำหนดส่วนการเปิดตัวรูปแบบพื้นผิวอย่างต่อเนื่องกับส่วนล่างและความโน้มเอียงของพื้นผิวการเปลี่ยนแปลงอย่างต่อเนื่องในขอบเขตที่. 15 2. ห้องวัฒนธรรมตามข้อถือสิทธิที่ 1 นั้นในตอนท้ายของแต่ละซุ้มที่มีหนึ่งในรูปทรงครึ่งวงกลม, รูปทรงสี่เหลี่ยมคางหมู และรูปสามเหลี่ยมคว่ำ. 3 ห้องวัฒนธรรมตามข้อถือสิทธิ 1 หรือ 2 ประเด็นพื้นที่ระหว่างสองซุ้มที่อยู่ติดกันจะแบนและระยะทางระหว่างสองซุ้มอยู่ในช่วงตั้งแต่ 05:00 ถึง 50 20 4 ห้องวัฒนธรรมตามที่คนใดคนหนึ่งของข้อถือ สิทธิ 1-3 ประเด็นวัฒนธรรมห้องเป็นปั้นเรซินที่เกิดขึ้นอย่างใดอย่างหนึ่งหรือรวมกันของสองคนหรือมากกว่าเลือกจากกลุ่มประกอบด้วยเรซินอะคริลิpolylactic กรดกรด polyglycolic ยางสไตรีนสไตรีนคริลิค 25 เรซินลิเมอร์เรซินโพลีคาร์บอเนต เรซินโพลีเอสเตอร์เรซินโพลีไวนิลแอลกอฮอล์, เอทิลีนไวนิลเรซินลิเมอร์เครื่องดื่มแอลกอฮอล์ยางเทอร์โมยางไวนิลคลอไรด์และเรซินซิลิกอน. 5 ห้องวัฒนธรรมตามที่คนใดคนหนึ่งของข้อถือสิทธิ 1-4 ประเด็นการทำงานกลุ่มที่จะเกิดขึ้นบนซุ้มโดยการปรับเปลี่ยนพื้นผิววิธีการรักษาของคนใดคนหนึ่งของ30 รักษาพลาสม่าเคลือบแก้วปล่อยโคโรนาและโอโซนรังสียูวีหรือ รวมกันดังกล่าวและการรักษาที่จะดำเนินการเพื่อให้มุมสัมผัสน้ำจะกลายเป็น45 องศาหรือน้อยกว่า. 6 ห้องวัฒนธรรมตามที่คนใดคนหนึ่งของข้อถือสิทธิ 1-5 ขัดแย้งน้ำห่วงโซ่ลิเมอร์ที่ยับยั้งการยึดเกาะเซลล์ตรึงในหลืบ. 23 7 ห้องวัฒนธรรมตามที่คนใดคนหนึ่งของข้อถือสิทธิ 1-6, ฟอสโฟขัดแย้งหรือมีความซับซ้อนพอลิเมอเรียมถูกตรึงในหลืบ. 5 ห้อง 8. วัฒนธรรมตามที่คนใดคนหนึ่งของข้อถือสิทธิ 1-7 ประเด็นแต่ละ ของซุ้มมีเซลล์ผิวที่ไม่ใช่กาวที่อย่างน้อยหนึ่งลิเมอร์ของพอลิเมอhydrophilic ห่วงโซ่ที่ยับยั้งการยึดเกาะของเซลล์และฟอสโฟหรือซับซ้อนเรียมลิเมอร์ที่ถูกตรึงหลังจากที่กลุ่มการทำงานจะเกิดขึ้นในหลืบโดยพื้นผิวการปรับเปลี่ยนวิธีการรักษาของคนใดคนหนึ่งของการรักษาพลาสม่าเคลือบแก้วปล่อยโคโรนาและรังสียูวี10 โอโซนหรือการรวมกันดังกล่าวและการรักษาจะ perfoiined เพื่อให้มุมสัมผัสน้ำจะกลายเป็น45 องศาหรือน้อยกว่า. 9 ห้องวัฒนธรรมตามข้อถือสิทธิที่ 8 นั้นห่วงโซ่ลิเมอร์ที่ชอบน้ำเป็นโพลี (hydroxyethyl methacrylate). 15 10 ห้องวัฒนธรรมให้เป็นไปตามข้อถือสิทธิที่ 9 ประเด็นที่มีน้ำหนักโมเลกุลเฉลี่ยของโพลี (hydroxyethyl methacrylate) เป็น 100,000 หรือมากกว่า. 11 วิธีการเพาะเลี้ยงที่ใช้ห้องวัฒนธรรมตามที่คนใดคนหนึ่งของข้อถือสิทธิ 01-20 ตุลาคมวิธีวัฒนธรรมซึ่งประกอบรวมด้วย: กระจายเซลล์เข้ากลางเป็นจำนวนของเซลล์เท่ากับหรือมากกว่าจำนวนไม่มี ของซุ้มของห้องวัฒนธรรมและเท่ากับหรือน้อยกว่าจำนวนที่ได้รับจากการคูณจำนวน n หลืบโดยค่าที่ได้จากการหารปริมาณ V1 ของที่พื้นที่ที่กำหนดโดยแต่ละซุ้มโดยV2 ปริมาณของเซลล์ที่จะเป็น เมล็ด; และ25 เพิ่มสื่อไปยังห้องวัฒนธรรม. 12 วิธีการเพาะเลี้ยงตามข้อถือสิทธิ 11 ประเด็นหนึ่งลูกกลมจะเกิดขึ้นในพื้นที่หนึ่งที่กำหนดโดยแต่ละหลืบ. 30 13. วิธีการเพาะเลี้ยงตามข้อถือสิทธิ 12 ลูกกลมขัดแย้งจะเกิดขึ้นในพื้นที่และลูกกลมเป็นได้รับอนุญาตที่จะเติบโต. 14 วิธีการเพาะเลี้ยงตามข้อถือสิทธิ 12 หรือ 13 ลูกกลมขัดแย้งจะเกิดขึ้นในพื้นที่และที่แตกต่างและเหนี่ยวนำให้เกิด. 24 15 วิธีวัฒนธรรมตามที่คนใดคนหนึ่งของข้อถือสิทธิ 11-14 ประเด็น 60% หรือมากกว่าของจำนวนเสียงทั้งหมดของ spheroids ที่เกิดขึ้นในห้องวัฒนธรรมมีขนาดเส้นผ่านศูนย์กลางอยู่ในช่วง 15% ของลูกกลมขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางเฉลี่ยที่. 5 16 วิธีการเพาะเลี้ยงตามที่คนใดคนหนึ่งของข้อถือสิทธิ 11 ถึง 15 ประเด็นเซลล์ในซุ้มที่มีการกู้คืนโดยก่อกวนกลาง. 17 วิธีการเพาะเลี้ยงตามข้อถือสิทธิ 16 ประเด็นความปั่นป่วนของกลางคือ 10 ทำโดยคนใดคนหนึ่งของวิธีการต่อไปนี้: ความปั่นป่วนของกลางด้วยการเขย่าวัฒนธรรมห้อง; ความปั่นป่วนของกลางโดยการดูดและการปลดกลาง; ความปั่นป่วนของกลางโดยทิ้งใบมีดกวนในห้องวัฒนธรรม; และความปั่นป่วนของกลางโดยวางกวนในห้องวัฒนธรรมหรือการรวมกันวินิจฉัยนั้น15 18. วิธีการเพาะเลี้ยงตามที่คนใดคนหนึ่งของข้อถือสิทธิ 11-17 ขัดแย้งกลางจะถูกแทนที่อย่างน้อยหนึ่งครั้งและ20% หรือมากกว่า ของกลางจะถูกแทนที่. 19 วิธีวัฒนธรรมการเพาะเซลล์เพาะเลี้ยงเซลล์แทนของสื่อและการเก็บเกี่ยวของเซลล์โดยใช้ห้องวัฒนธรรมตามที่คนใดคนหนึ่งของข้อถือสิทธิ 1-10 วัฒนธรรม 20 วิธีการซึ่งประกอบรวมด้วยขั้นตอนดังนี้ก) กระจายเซลล์ลงในกลางจำนวนของเซลล์ที่ถูกเท่ากับหรือมากกว่าจำนวน n หลืบของห้องวัฒนธรรมและเท่ากับหรือน้อยกว่าจำนวนที่ได้รับจากการคูณจำนวน n ของซุ้มโดยค่าที่ได้จากการหารได้ที่ ปริมาณ V ของแต่ละซุ้มโดยโวลต์ปริมาณของเซลล์ที่จะเป็นเมล็ดและการเพิ่มสื่อไปยังห้องวัฒนธรรม; 25 ข) การเพาะเลี้ยงเซลล์ในห้องวัฒนธรรมเป็นเวลา 12 ชั่วโมงหรือมากกว่าในรูปแบบลูกกลม; c) ดูด 20 % หรือมากกว่าของกลางแล้วฉีดจำนวนเดียวกันของกลางสดง) ทำซ้ำขั้นตอน) เพื่อค) ส่วนใหญ่ของเวลาที่จะอนุญาตให้ลูกกลมที่จะเติบโต; จ) ที่ช่วยให้ลูกกลมที่จะเติบโตให้มีขนาดที่ต้องการแล้ว ก่อกวนกลาง 30 ระงับเซลล์ภายในซุ้มในสื่อนั้น และฉ) ดูดกลางรวมทั้งเซลล์โดยเครื่องดูดในการกู้คืนเซลล์ที่. 25 บทคัดย่อโครงสร้าง Microspace สำหรับสูงได้อย่างมีประสิทธิภาพการผลิต spheroids ขนาดสม่ำเสมอและได้อย่างง่ายดายเปลี่ยนและการกู้คืนอาหารเลี้ยงได้รับการออกแบบและเรือวัฒนธรรมมีโครงสร้างMicrospace ออกแบบ มีให้ ส่วนใหญ่ของซุ้ม (10) ประกอบไปด้วยส่วนล่าง (11) และเป็นส่วนหนึ่งที่เปิด (12) จะจัดในเรือวัฒนธรรม ส่วนล่าง (11) มีรูปทรงของทั้งซีกโลกหรือกรวยที่ถูกตัดทอนและที่เปิดส่วน(12) ตั้งขึ้นตามผนังที่มีมุมเรียวตั้งแต่วันที่ 1 °ถึง 20 °และพื้นที่โดยรอบจากเขตแดนกับด้านล่างส่วนหนึ่ง (11) เพื่อเป็นส่วนหนึ่งในตอนท้ายของการพักผ่อนที่ (10) นอกจากนี้ขนาดเส้นผ่าศูนย์กลางเทียบเท่าเขตแดนจาก 50 โมงถึง 2 มิลลิเมตรความลึกจากด้านล่างของส่วนล่าง (11) เพื่อเป็นส่วนหนึ่งที่ได้คือ 0.6-3 เท่าของเส้นผ่าศูนย์กลางเทียบเท่าผนัง constituting เปิดส่วน (12 ) อย่างต่อเนื่องในรูปแบบพื้นผิวที่มีส่วนล่าง(11) และความลาดเอียงของพื้นผิวที่มีการเปลี่ยนแปลงอย่างต่อเนื่องในขอบเขตที่

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ข้อถือสิทธิ

1 หอวัฒนธรรมซึ่งประกอบรวมด้วยเสียงข้างมากของรกแต่ละรูปแบบของส่วนล่างและเปิดส่วนนั้น
5 ส่วนล่างมีรูปร่างครึ่งวงกลมและตัดกรวยรูปร่าง
ส่วนการกำหนดโดยกำแพงที่ล้อมรอบพื้นที่จากรอยต่อระหว่างส่วนการเปิดและส่วนด้านล่างไปยังจุดสิ้นสุดของแต่ละจริง ผนังมีมุมเรียวในช่วงจาก 1 องศา 20 องศา
เทียบเท่าขนาดของขอบเขตในช่วง 50 กรัม 2 มม. และความลึกที่ 10 จากด้านล่างของส่วนล่างสุดของแต่ละจริง อยู่ในช่วงจาก 0.6 หรือ
ครั้งที่ 3 หรือน้อยกว่าครั้งเทียบเท่ากับเส้นผ่าศูนย์กลางและ
ผนังส่วนรูปแบบการเปิด พื้นผิวอย่างต่อเนื่องกับส่วนด้านล่างและมีความเอียงของพื้นผิวอย่างต่อเนื่องการเปลี่ยนแปลงที่เขตแดน


15 2 วัฒนธรรมตามข้อถือสิทธิ 1 ห้อง ซึ่งตอนท้ายของแต่ละรก
มีรูปร่างครึ่งวงกลมเป็นรูปสี่เหลี่ยมคางหมูและรูปสามเหลี่ยมกลับหัว


3 วัฒนธรรมห้องตามข้อถือสิทธิ 1 หรือ 2 ซึ่งพื้นที่ระหว่างสอง
ติดจริงจะแบนและระยะห่างระหว่างสองจริง อยู่ในช่วงตั้งแต่ 5 ทุ่ม 50 20


4 . วัฒนธรรมห้องตามหนึ่งข้อถือสิทธิ 1 ซึ่งวัฒนธรรม
ห้องเป็นเรซินพลาสติกรูปแบบหนึ่งหรือการรวมกันของสองคนหรือมากกว่าเลือกจาก
กลุ่มประกอบด้วยอะคริลิกเรซิน , Polylactic acid polyglycolic สไตรีนเรซิน , กรดอะคริลิกเรซินพอลิสไตรีน 25 , โพลีคาร์บอเนตเรซินเรซินโพลีเอสเตอร์เรซินโพลีไวนิลแอลกอฮอล์ , แอลกอฮอล์พอลิเอทิลีนไวนิล
เรซินเทอร์โมพลาสติกอีลาสโตเมอร์ ยางไวนิล คลอไรด์ และซิลิโคน เรซิ่น
5 วัฒนธรรมห้องตามหนึ่งข้อถือสิทธิ 1 ถึง 4 ซึ่งการทำงาน
กลุ่มที่เกิดขึ้นจริง โดยการปรับเปลี่ยนวิธีการรักษาพื้นผิวใด ๆ หนึ่ง
30 พลาสมา การรักษา , เคลือบแก้ว , โคโรน่าดิสชาร์จ และ ยูวี โอโซน หรือรวมกัน
และการรักษาจะดำเนินการเพื่อให้มุมน้ำติดต่อกลายเป็น 45 องศาหรือน้อยกว่า


6 วัฒนธรรมห้องตามหนึ่งข้อถือสิทธิ 1 ถึง 5 ซึ่งมีน้ำ
สายโซ่พอลิเมอร์ที่ยับยั้งเซลล์ยึดเกาะถูกตรึงใน recesses .





23

7