A standard inoculum was prepared by inoculating the 100 ml of nutrient broth contained in 250 mL conical flasks with a loop of the culture. The inoculated flasks were incubated on rotary shaker (150 rpm) at 35ºC for 24 h. This was used as inoculum (1.0 mL contained 6 X 105 viable cells) for all the experiments. After 24 h of cultivation, cells were harvested by centrifugation at 10,000 rpm at 4ºC for 15 min, washed aseptically with sterile distilled water and re-suspended into 1 l Erlenmeyer flasks containing 400 mL of production medium containing (g/l): NH4Cl 1.0, NaHCO3 0.5, KH2PO4 2.0, Na2 HPO4. 2H2O 2.0, MgSO4.7H2O 0.5, CaCl2. 2H2O 0.01, Fe (NH4) citrate 0.05, trace elements solution: 5.0 mL of the solution (containing ZnSO4.7H2O 0.08, MnCl2.4H2O 0.03, H3BO3 0.3, CoCl2.6H2O 0.2, CuCl2.2H2O 0.01, NiCl2.6H2O 0.02, Na2 MoO4.2H2O 0.03). Sugarcane molasses was added as the sole carbon source at a concentration of 2%. The culture medium was inoculated with 2% of the seed culture and incubated on rotary shaker at 150 rpm at 35°C for 72 h. The pH was maintained at 7.0 by the manual addition of NaOH (10%), or HCl (10%) (Sharma et al. 2007).
มีเตรียม inoculum มาตรฐาน โดย inoculating 100 มลของซุปที่ธาตุอาหารอยู่ใน 250 mL ทรงกรวยน้ำคล้องของวัฒนธรรม น้ำ inoculated มี incubated บนโรตารี่เชคเกอร์ (150 rpm) ที่ 35ºC สำหรับ 24 ชม นี้ใช้เป็น inoculum (1.0 mL อยู่ 6 X 105 เซลล์ทำงานได้) สำหรับการทดลองทั้งหมด หลังจาก 24 ชมของการเพาะปลูก เซลล์เก็บเกี่ยว โดย centrifugation ที่ 10000 rpm ที่ 4ºC สำหรับ 15 นาที น้ำ Erlenmeyer หิน aseptically น้ำกลั่นที่ฆ่าเชื้อ และระงับอีกครั้งเป็น 1 l ประกอบด้วย 400 mL ของกลางการผลิตที่ประกอบด้วย (g/l): NH4Cl 1.0, NaHCO3 0.5, KH2PO4 2.0, Na2 HPO4 2H2O MgSO4.7H2O 0.5, CaCl2, 2.0 2H2O 0.01, Fe (NH4) ซิเตรต 0.05 ติดตามแก้ไขปัญหาองค์ประกอบ: 5.0 mL ของการแก้ปัญหา (ประกอบด้วย ZnSO4.7H2O 0.08, MnCl2.4H2O 0.03, H3BO3 0.3, CoCl2.6H2O 0.2, CuCl2.2H2O 0.01, NiCl2.6H2O 0.02, Na2 MoO4.2H2O 0.03) มีเพิ่มอ้อยกากน้ำตาลเป็นแหล่งคาร์บอนแต่เพียงผู้เดียวที่ความเข้มข้น 2% สื่อวัฒนธรรม inoculated % 2 วัฒนธรรมเมล็ด และ incubated ในเชคเกอร์โรตารี่ที่ 150 รอบต่อนาทีที่ 35° C สำหรับ 72 h PH ที่คงที่ 7.0 โดยการเพิ่มด้วยตนเองของ NaOH (10%), HCl (10%) (Sharma et al. 2007)
การแปล กรุณารอสักครู่..

เชื้อมาตรฐานที่จัดทำโดยการฉีดวัคซีน 100 มล. ของน้ำซุปสารอาหารที่มีอยู่ใน 250 มิลลิลิตรขวดรูปกรวยกับวงของวัฒนธรรม ขวดถูกบ่มเชื้อในเครื่องปั่นหมุน (150 รอบต่อนาที) ที่35ºCเป็นเวลา 24 ชั่วโมง นี้ถูกนำมาใช้เป็นหัวเชื้อ (1.0 มิลลิลิตรมี 6 X 105 เซลล์ทำงานได้) สำหรับการทดลองทั้งหมด หลังจาก 24 ชั่วโมงของการเพาะปลูกเซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 รอบต่อนาทีที่4ºCนาน 15 นาทีล้างปลอดเชื้อด้วยน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อและอีกครั้งที่ถูกระงับเป็น 1 ลิตรขวด Erlenmeyer มี 400 มิลลิลิตรของกลางการผลิตที่มี (g / l): NH4Cl 1.0 , NaHCO3 0.5, KH2PO4 2.0 Na2 HPO4 2H2O 2.0 MgSO4.7H2O 0.5, CaCl2 2H2O 0.01, Fe (NH4) ซิเตรต 0.05, การแก้ปัญหาธาตุ: 5.0 มิลลิลิตรของการแก้ปัญหา (ที่มี ZnSO4.7H2O 0.08, 0.03 MnCl2.4H2O, H3BO3 0.3 CoCl2.6H2O 0.2 CuCl2.2H2O 0.01, NiCl2.6H2O 0.02, Na2 MoO4.2H2O 0.03) กากน้ำตาลอ้อยถูกบันทึกเป็นแหล่งคาร์บอนที่มีความเข้มข้น 2% สื่อวัฒนธรรมได้รับเชื้อด้วย 2% ของวัฒนธรรมเมล็ดและบ่มในเครื่องปั่นหมุนที่ 150 รอบต่อนาทีที่ 35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมง พีเอชที่ได้รับการเก็บรักษาไว้ที่ 7.0 โดยนอกเหนือจากคู่มือของ NaOH (10%) หรือ HCl (10%) (Sharma et al. 2007)
การแปล กรุณารอสักครู่..
