Total RNA of the samples was extrac

Total RNA of the samples was extracted using the TRIsure kit (Bioline, Taunton, MA, USA) following the protocol for RNA isolation. Briefly, total RNA was extracted from 100 mg of shrimp tissue using 1 ml of TRIsure and homogenization. After incubation for 5 min at room temperature, 200 μl of chloroform was added and the solution was vigorously mixed. The tube was incubated for 3 min before centrifugation at 12,000 × g for 15 min at 4 °C. The aqueous phase was transferred to a fresh tube, 500 μl of 100% cold isopropyl alcohol was added and gentle mixed. After incubation for 10 min at room temperature, the tube was centrifuged at 12,000 × g for 10 min at 4 °C and the pellet was rinsed with 75% (v/v) ethanol, air dried, and dissolved in 50 μl of RNase-free water. RNA concentration and quality were assessed by spectrophotometer at wavelengths of 260 and 280 nm (NanoDrop 2000c Spectrophotometer, Thermo Fisher Scientific, Wilmington, DE, USA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

อาร์เอ็นเอรวมตัวอย่างถูกสกัดโดยใช้ชุด TRIsure (Bioline, Taunton, MA, USA) โพรโทคอลสำหรับ RNA แยกต่อไป สั้น ๆ RNA รวมถูกสกัดจากเนื้อเยื่อกุ้งที่ใช้ 1 มิลลิลิตรของ TRIsure และ homogenization 100 มก. หลังจากบ่มที่อุณหภูมิห้อง 5 นาที เพิ่ม μl 200 ของคลอโรฟอร์ม และแก้ปัญหาถูกผสมอย่างจริงจัง หลอดมี incubated 3 นาทีก่อนหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 × g 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส เฟสอโอนย้ายไปหลอดที่สด 500 μl 100% ดื่มเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ isopropyl เย็นถูก และอ่อนโยนผสม หลังจากบ่ม 10 นาทีที่อุณหภูมิห้อง หลอดถูกจากที่ 12,000 × g 10 นาทีที่อุณหภูมิ 4 ° C และเม็ดถูกล้าง ด้วยเอทานอล 75% (v/v) อากาศแห้ง และละลายใน μl 50 น้ำ RNase ฟรี คุณภาพและความเข้มข้นของ RNA ถูกประเมิน โดยสเปคที่ความยาวคลื่นของ 260 และ 280 nm (NanoDrop 2000 c สเปค เทอร์โม Fisher วิทยาศาสตร์ วิลมิลตัน DE สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

RNA รวมของกลุ่มตัวอย่างถูกสกัดโดยใช้ชุด TRIsure (Bioline ทอน, MA, USA) ดังต่อไปนี้โปรโตคอลสำหรับการแยกอาร์เอ็นเอ สั้น ๆ , RNA ทั้งหมดถูกสกัดจาก 100 มิลลิกรัมของเนื้อเยื่อกุ้งใช้ 1 มิลลิลิตรของ TRIsure และเป็นเนื้อเดียวกัน หลังจากการบ่มเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง 200 ไมโครลิตรคลอโรฟอร์มถูกเพิ่มเข้ามาและวิธีการแก้ปัญหาที่ถูกผสมอย่างจริงจัง หลอดถูกบ่มเป็นเวลา 3 นาทีก่อนที่จะหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 ×กรัมเป็นเวลา 15 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส เฟสน้ำถูกย้ายไปยังหลอดสด 500 ไมโครลิตรของเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ isopropyl เย็น 100% ถูกบันทึกและอ่อนโยนผสม หลังจากการบ่มเป็นเวลา 10 นาทีที่อุณหภูมิห้องหลอดถูกหมุนเหวี่ยงที่ 12,000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาทีที่ 4 ° C และเม็ดที่ถูกล้างด้วย 75% (v / v) เอทานอลที่มีอากาศแห้งและละลายใน 50 ไมโครลิตรของ RNase- น้ำฟรี ความเข้มข้นของอาร์เอ็นเอและคุณภาพที่ได้รับการประเมินโดย spectrophotometer ที่ความยาวคลื่น 260 และ 280 นาโนเมตร (NanoDrop 2000c Spectrophotometer, Thermo Fisher Scientific, Wilmington, DE, สหรัฐอเมริกา)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

อาร์เอ็นเอทั้งหมดของตัวอย่างที่สกัดโดยใช้ trisure Kit ( bioline Taunton , MA , USA ) ดังต่อไปนี้โปรโตคอลเพื่อแยก RNA สั้น ๆ , อาร์เอ็นเอทั้งหมดถูกสกัดจาก 100 มิลลิกรัมต่อ 1 มิลลิลิตร โดยใช้เนื้อเยื่อกุ้ง และการ trisure . หลังจากบ่มเป็นเวลา 5 นาทีที่อุณหภูมิห้อง , 200 μชั้นคลอโรฟอร์มได้เพิ่ม และสารละลายผสมอย่างแข็งขัน หลอดมันบ่มนาน 3 นาที ก่อนปั่นที่ 12000 × G สำหรับ 15 นาทีที่ 4 องศา ระยะที่น้ำถูกย้ายไปยังหลอดสด 500 μ L 100% แอลกอฮอล์ isopropyl และเย็นเป็นอ่อนโยนผสม หลังจากบ่มเป็นเวลา 10 นาที ที่อุณหภูมิห้อง , ท่อไฟฟ้าที่ 12000 × G สำหรับ 10 นาทีที่ 4 ° C และเม็ดถูกล้างด้วย 75 % ( v / v ) เอทานอล อากาศแห้ง และละลายในน้ำ 50 ลิตรμเลสฟรี ความเข้มข้นของ RNA และคุณภาพที่ได้ถูกประเมิน โดยวัสดุที่ความยาวคลื่น 260 และ 280 nm ( nanodrop 2000c วัสดุเทอร์โมฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์ , Wilmington , DE , USA )