Materials and MethodsBacterial stra

Materials and Methods
Bacterial strains, plasmids, and growth conditions
Bacterial strains and plasmids used in this study are in Table 1. The metagenomic libraries
AK10, AK14, AK16, and AK18 are in the vector pCF430 [19] and are reported elsewhere [2].
Metagenomic libraries were expressed in TransforMax EPI300 Escherichia coli cells (Epicentre,
Madison, WI, USA) for antibiotic resistance screening purposes. Metagenomic libraries were
selected on eight β-lactam antibiotics at 24°C and 37°C as described [2]. The recombinant
clone designated as βLR16 (Table 1) was recovered only on carbenicillin (50μg ml-1) after
growth at 24°C. Subsequent growth of the parent clone and subclones was in Luria-Bertani
(LB) medium at 24–28°C. Growth media was amended with tetracycline at 20 μg ml-1 or kanamycin
at 20 μg ml-1 for plasmid maintenance where appropriate. The DNA sequence of the
βLR16 DNA insert was previously submitted to GenBank (EU408353.1).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการสายพันธุ์แบคทีเรีย plasmids และสภาพการเจริญเติบโตสายพันธุ์แบคทีเรียและ plasmids ที่ใช้ในการศึกษานี้อยู่ในตารางที่ 1 รี metagenomicAK10, AK14, AK16 และ AK18 อยู่ใน pCF430 เวกเตอร์ [19] และมีรายงานอื่น [2]Metagenomic ไลบรารีถูกแสดงในเซลล์ TransforMax EPI300 Escherichia coli (ลอตเมดิสัน WI สหรัฐอเมริกา) สำหรับวัตถุประสงค์การตรวจคัดกรองความต้านทานยาปฏิชีวนะ Metagenomic ไลบรารีได้เลือกยาβ-lactam แปดที่ 24° C และ 37° C เป็นอธิบาย [2] วททชโคลนที่กำหนดให้เป็น βLR16 (ตารางที่ 1) ถูกกู้คืนใน carbenicillin (50μg ml-1) หลังจากเจริญเติบโตที่ 24 องศาเซลเซียส เติบโตหลักโคลนและ subclones ต่อมาถูก Luria Bertaniปานกลาง (ปอนด์) ที่ 24 – 28 องศาเซลเซียส เจริญเติบโตของสื่อถูกแก้ไขกับเตตราไซคลีน 20 μg ml-1 หรือกานามัยซิน20 μg ml-1 สำหรับการบำรุงรักษา plasmid ที่เหมาะสม ลำดับดีเอ็นเอของการΒLR16 ดีเอ็นเอแทรกก่อนหน้านี้ส่ง GenBank (EU408353.1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วัสดุและวิธีการ
สายพันธุ์แบคทีเรีย, พลาสมิดและสภาวะการเจริญเติบโต
ของแบคทีเรียสายพันธุ์และพลาสมิดที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้อยู่ในตารางที่ 1 ห้องสมุด Metagenomic
AK10, AK14, AK16, AK18 และอยู่ใน pCF430 เวกเตอร์ [19] และจะมีการรายงานในที่อื่น [2] .
ห้องสมุด Metagenomic ถูกแสดงใน TransforMax EPI300 Escherichia coli เซลล์ (ศูนย์กลาง,
Madison, WI, USA) เพื่อวัตถุประสงค์ในการคัดกรองความต้านทานยาปฏิชีวนะ ห้องสมุด Metagenomic ถูก
เลือกยาปฏิชีวนะแปดβ-lactam ที่ 24 องศาเซลเซียสและ 37 องศาเซลเซียสตามที่อธิบายไว้ [2] recombinant
โคลนกำหนดให้เป็นβLR16 (ตารางที่ 1) หายเฉพาะใน carbenicillin (50μg ml-1) หลังจากที่
การเจริญเติบโตที่ 24 ° C การเจริญเติบโตที่ตามมาของโคลนแม่และ subclones อยู่ใน Luria-Bertani
(LB) กลางที่ 24-28 องศาเซลเซียส สื่อการเจริญเติบโตแก้ไขเพิ่มเติมกับ tetracycline ที่ 20 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร-1 หรือ kanamycin
ที่ 20 ไมโครกรัมต่อมิลลิลิตร-1 สำหรับการบำรุงรักษาพลาสมิดที่เหมาะสม ลำดับดีเอ็นเอของ
ดีเอ็นเอแทรกβLR16ถูกส่งมาก่อนหน้านี้ GenBank (EU408353.1)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วัสดุและวิธีการ
แบคทีเรียสายพันธุ์ ) และเงื่อนไขการเจริญเติบโต
แบคทีเรียเพื่อใช้ในการศึกษาและในตารางที่ 1 จากเมตาจีโนมิคห้องสมุด
ak10 ak14 ak16 , , , และ ak18 ในเวกเตอร์ pcf430 [ 19 ] และมีรายงานอื่น ๆ [ 2 ] .
ห้องสมุดเมตาจีโนมิคถูกแสดงออกใน transformax epi300 Escherichia coli เซลล์ ( ศูนย์กลาง
, Madison , WI ,สหรัฐอเมริกา ) ต้านทานยาปฏิชีวนะสำหรับการคัดกรอง ห้องสมุดเมตาจีโนมิคถูก
เลือกแปดบีตา - ชุดขนสัตว์ที่ 24 ° C และ 37 ° C ตามที่อธิบายไว้ [ 1 ] การโคลนยีนบีตา lr16
เขต ( ตารางที่ 1 ) พบเฉพาะในคาร์เบนิซิลลิน ( 50 μกรัมแน่นอน ) หลังจาก
การเจริญเติบโตที่ 24 องศา ต่อการเจริญเติบโตของผู้ปกครองระดับสายพันธุ์บริสุทธิ์ในโคลนและลุเรียแบร์ตานิ
( LB ) กลางที่ 24 – 28 องศาสื่อการแก้ไขเพิ่มเติมกับเตตราซัยคลิน 20 กรัม หรือμแน่นอนน
ที่ 20 μกรัมแน่นอนสำหรับพลาสมิด การบำรุงรักษาที่เหมาะสม ดีเอ็นเอลำดับ
บีตา lr16 ดีเอ็นเอแทรกก่อนหน้านี้ยื่นให้พบ ( eu408353.1 )