MATERIALS AND METHODS
All the experimental procedures used in this study were approved by the Ethics Committee of the Universidad Politécnica de Madrid and were in compliance with the Spanish guidelines for the care and use of animals in research (Government of Spain, 2005).
Husbandry
Thirty-six pigs [(Landrace × Large White) sires × (Duroc × Large White) dams], weaned at approximately 23 ± 3 d of age and weighing 7.4 ± 1.2 kg, were obtained from a commercial farm. On arrival at the research station, the pigs were weighed, placed in individual flat-deck pens (1 × 1 m), and provided with an individual feeder and a nipple drinker. Room temperature was maintained at 31 ± 1°C for the first week of the trial, and then the temperature was reduced by approximately 2°C per week until reaching 26°C. The pigs had free access to water throughout the trial.
Ingredients, Diets, and Experimental Design
A batch of broken rice (Oryza sativa, Japonica variety; 800 g of the Senia cultivar and 200 g of the Tainato cultivar per kg) was obtained from a commercial supplier (Esasa, Valladolid, Spain), sieved, cleaned, and split into 2 portions. The first portion was ground through a hammer mill fitted with a 2.5-mm screen. The second portion was steam cooked (30% moisture) in a hydrothermal reactor (Amandus Kahl, Reinbek, Germany) for 60 min. Briefly, steam was injected in the main compartment of the cooker and mixed with the ground cereal for 10 min at 105°C. The mixture then passed down the cooker (15 min at approximately 100°C) and was allowed to sit for 35 min. A similar procedure was used for the batch of corn, but the second portion of the cereal was steam cooked (30% moisture) for 60 min (15 min at 90°C, 10 min at 117°C, and then allowed to sit for 35 min). After cooking, the 2 HP cereals were air-dried at 150°C for 15 min. The determined chemical composition of the experimental cereals is shown in Table 1.
View Full Table | Close Full ViewTable 1.
The experimental design was completely randomized, with 4 treatments and 9 individual pigs (5 males and 4 females) per treatment. The diets were formulated to meet or exceed the nutrient requirements recommended by the NRC (1998) and were fed in mash form. The only difference among diets was the cereal used (520 g/kg of diet), which was corn or rice, either raw or steam-cooked (Table 2). No antibiotics or growth-promoting additives were included in these diets. Celite (acid-washed diatomaceous earth) was added at 6 g/kg to all diets as an additional AIA source and was used as a marker for the nutrient digestibility studies. The nutrient composition of the experimental diets is shown in Table 3.
View Full Table | Close Full ViewTable 2.
View Full Table | Close Full ViewTable 3.
Blood Sampling and Hormone Concentrations
Pigs were fed their respective experimental diets under ad libitum conditions from 23 to 36 d of age, and then a 21-h study was begun in which the pigs were fasted overnight for 12 h, refed ad libitum for 3 h, and then deprived of feed again for 6 h. Blood was collected at the end of the 12-h overnight fasting period (−12 h), 3 h after meal ingestion (0 h), and 3 (early postprandial period) and 6 h (late postprandial period) after food deprivation. The data generated were used to assess the effects of diet on fasting and postprandial concentrations of insulin and acylated and total (acylated + des-acylated) ghrelin. Blood (3 to 6 mL) was obtained by jugular venipuncture in polystyrene tubes (12 × 75 mm, Soria Genlab, Madrid, Spain) and was kept on ice until centrifugation (2,000 × g for 10 min) at 4°C, and 50 μL of phenylmethane-sulfonylfloride (10 mg/mL of solution) and 50 μL of 1 N HCl were added to each milliliter of serum before storage at −80°C. Serum insulin and acylated and total ghrelin were quantified by using commercial RIA kits (PI-12K, GHRT-88HK, and GHRT-89HK, respectively; Linco Research, Saint Charles, MO). The intra- and interassay CV were less than 10%. Sensitivity for total ghrelin, acylated ghrelin, and insulin was 46.5 pg/mL, 7.8 pg/mL, and 0.28 mU/mL, respectively.
Pig Performance and Apparent Total Tract Digestibility of Dietary Components
Body weight gain and FI were recorded from 23 to 47 d of age. Representative samples (100 g) of feces were individually collected by rectal massage at 43, 44, and 45 d of age to estimate the apparent total tract digestibility (ATTD) of dietary components. The samples were frozen (−20°C) immediately after collection and stored until further analysis. Before analysis, fecal samples were thawed overnight, dried (60°C for 72 h), ground (1-mm screen), mixed (3 samples from each individual pig), and homogenized. Cereals, feeds, and feces were determined for moisture by the oven-drying method (method 930.15) and ash was determined by muffle furnace (method 942.05) as indicated by AOAC International (2000). Ether extract (EE) was analyzed after HCl hydrolysis by Soxhlet fat analysis (Government of Spain, 1999). The CP content (N × 6.25) was determined using an analyzer (FP-528 N, Leco Corp., St. Joseph, MI) and the GE was determined with an adiabatic bomb calorimeter (Parr 1356, Parr Instrument Co., Moline, IL). The AIA of feeds and feces were determined as described by Vogtmann et al. (1975). Total starch in cereals and ileal content was measured by the α-amylase glucosidase method (method 996.11; AOAC International, 2000). The gelatinized starch was determined by enzymatic hydrolysis as described by Medel et al. (1999), and the amylose, amylopectin, and resistant starch content was determined by using the corresponding assay kits (K-Amyl-04/06 and Rstar 11/02, Megazyme International Ireland Ltd., Wicklow, Ireland).
Apparent Ileal Digestibility of Dietary Components
At the end of the trial (47 d of age), pigs were deprived of food for 12 h, and then were refed under ad libitum conditions for 6 h to achieve as homogeneous an FI as possible. A single intramuscular injection of 20 mg of ketamine chlorhydrate/kg of BW (Imalgene 500, Merial Laboratories S.A., Lyon, France), plus xylazine (2.2 mg of Xylazil-20/kg of BW, Calier Laboratories S.A., Barcelona, Spain) was then administered to all pigs to induce general anesthesia. The pigs were satisfactorily anesthetized within 9 to 11 min postinjection, and they were then weighed and slaughtered by exsanguination to reduce blood contamination during the sample collection procedure. To determine the apparent ileal digestibility (AID) of OM, GE, CP, and starch, approximately 20 g of fresh digesta collected from the last 25 to 30 cm of the ileum was taken from each pig and frozen at −20°C. Digesta samples were analyzed as described for feces.
Statistical Analyses
Data on growth performance and nutrient digestibility were analyzed by 2-way ANOVA, with cereal type (corn or rice), HP of the cereal (raw or cooked), and their interactions as the main effects, by using the GLM procedure (SAS Inst. Inc., Cary, NC).
Data on serum metabolite dynamics were analyzed by repeated measures using the MIXED procedure of SAS. Significant interactions between the main effects (cereal, HP, and time) were decomposed by using the SLICE option in the LSMEANS statement to identify differences between cereal type and HP of the cereal within each blood sampling time. The experimental unit was the individual pig for all response criteria. For all analyses, a P-value
วัสดุและวิธีการขั้นตอนทดลองทั้งหมดที่ใช้ในการศึกษานี้ได้รับการอนุมัติ โดยคณะกรรมการจริยธรรมของ Universidad Politécnica เดมาดริด และได้ปฏิบัติตามคำแนะนำภาษาสเปนสำหรับการดูแลและการใช้สัตว์ในงานวิจัย (รัฐบาลสเปน 2005)เลี้ยงสามสิบหกสุกร [(แม่ซื้อสีขาวขนาดใหญ่) พ่อพันธุ์โคสาย× (× Duroc สีขาวขนาดใหญ่)], หย่านมถึงที่ประมาณ 23 ± 3 d ของอายุและน้ำหนัก 7.4 ± 1.2 กก. ได้รับมาจากฟาร์มเพื่อการค้า เมื่อมาถึงที่สถานีวิจัย สุกรน้ำหนัก วางในแต่ละชั้นแบนปากกา (1 × 1 เมตร), และมีการป้อนแต่ละและ drinker หัวนม มีรักษาอุณหภูมิห้องที่ 31 ± 1° C สำหรับสัปดาห์แรกของการทดลอง และจากนั้น อุณหภูมิลดลงประมาณ 2° C ต่อสัปดาห์จนถึง 26 องศาเซลเซียส สุกรได้ฟรีถึงน้ำตลอดการทดลองส่วนผสม อาหาร และออกแบบการทดลองชุดของข้าวหัก (Oryza ซา Japonica หลากหลาย g 800 ของ cultivar เนีย และ 200 g ของ cultivar Tainato ต่อกิโลกรัม) รับจากผู้ค้า (Esasa อาลีคานเต้ สเปน), sieved ทำความสะอาด และแบ่งออกเป็น 2 ส่วน ส่วนแรกถูกพื้นดินผ่านโรงงานผลิตค้อนที่มีหน้าจอขนาด 2.5 มม. ส่วนที่สองถูกไอน้ำสุก (ความชื้น 30%) ในแบบ hydrothermal เครื่องปฏิกรณ์ (Amandus Kahl, Reinbek เยอรมนี) สำหรับ 60 นาทีสั้น ๆ อบไอน้ำถูกฉีดในช่องหลักของเตา และผสมธัญพืชล่างสำหรับ 10 นาทีที่ 105 องศาเซลเซียส ผสมแล้วทอดเตา (15 นาทีที่ประมาณ 100° C) และได้รับอนุญาตให้นั่ง 35 นาที ใช้ขั้นตอนที่คล้ายกันสำหรับชุดของข้าวโพด แต่ส่วนที่สองของธัญพืชมีไอน้ำที่ต้ม (ความชื้น 30%) สำหรับ 60 นาที (15 นาทีที่ 90° C, 10 นาทีที่ 117° C และได้รับอนุญาตแล้ว นั่ง 35 นาที) หลังจากการทำอาหาร ธัญพืช 2 HP ได้ air-dried ที่ 150° C สำหรับ 15 นาที องค์ประกอบทางเคมีที่กำหนดของธัญญาหารทดลองแสดงในตารางที่ 1ดูตารางเต็ม | ปิด ViewTable เต็ม 1 การออกแบบการทดลองได้อย่างสมบูรณ์ randomized ด้วยการบำบัดที่ 4 และ 9 แต่ละสุกร (ชาย 5 และหญิง 4) ต่อการรักษา อาหารมีสูตรตรงกับ หรือเกินความต้องการธาตุอาหารที่แนะนำ โดย NRC (1998) และได้รับในแบบฟอร์มหน่วย ข้อแตกต่างระหว่างอาหารถูกธัญพืชใช้ (520 กรัม/กิโลกรัมของอาหาร), ซึ่งเป็นข้าวโพดหรือข้าว ดิบ หรือ ต้มไอน้ำ (ตารางที่ 2) ยาปฏิชีวนะหรือสารส่งเสริมการเจริญเติบโตไม่ได้รวมอยู่ในอาหารเหล่านี้ Celite (กรดล้างดินเบา) ถูกเพิ่มที่ 6 กรัม/กิโลกรัมอาหารทั้งหมดเป็น AIA เพิ่มเติม และใช้เป็นเครื่องหมายสำหรับศึกษา digestibility ธาตุอาหาร ส่วนประกอบธาตุอาหารของอาหารทดลองแสดงในตาราง 3ดูตารางเต็ม | ปิด ViewTable เต็ม 2 ดูตารางเต็ม | ปิด ViewTable ทั้ง 3 สุ่มตัวอย่างเลือดและความเข้มข้นของฮอร์โมนสุกรได้ติดตามบริโภคอาหารทดลองแต่ละ ad libitum สภาวะจาก 23 d 36 อายุ และจากนั้น การศึกษา 21 h ถูกเริ่มที่สุกรอดค้างคืนสำหรับ 12 h, refed ad libitum สำหรับ 3 h และปราศฟีดอีกครั้งสำหรับ 6 h. เลือดถูกรวบรวมที่สุดของ 12 h ค้างคืนถือศีลอด (−12 h) , h 3 หลังจากกินอาหาร (0 h), และ 3 (ช่วงระยะเวลา postprandial) และ h 6 (ระยะปลาย postprandial) หลังจากภาวะขาดอาหาร ข้อมูลที่สร้างขึ้นใช้ในการประเมินผลกระทบของอาหารในการถือศีลอด และ postprandial ความเข้มข้นของอินซูลิน และ acylated รวม (acylated + des acylated) ghrelin เลือด (3-6 mL) กล่าว โดยการเจาะหลอดเลือดดำ jugular ในหลอดโฟม (12 × 75 mm, Soria Genlab มาดริด สเปน) และถูกเก็บไว้บนน้ำแข็งจน centrifugation (2000 × g สำหรับ 10 นาที) ที่ 4° C และ 50 μL ของ phenylmethane-sulfonylfloride (10 mg/mL ของโซลูชั่น) และ μL 50 ของ 1 N HCl ได้เพิ่มแต่ละ milliliter ของซีรั่มก่อนเก็บที่ −80 องศาเซลเซียส เซรั่มอินซูลิน และ acylated และ ghrelin รวมได้ quantified โดยชุดเรียพาณิชย์ (PI - 12K, GHRT 88HK และ GHRT-89HK ตามลำดับ Linco วิจัย เซนต์ชาร์ลส์ MO) อินทราและ interassay CV ได้ไม่น้อยกว่า 10% ความไวใน การรวม ghrelin, acylated ghrelin อินซูลินเป็น 46.5 pg/mL, 7.8 pg/mL และหมู่ 0.28/mL ตามลำดับประสิทธิภาพการทำงานของหมูและ Digestibility ชัดเจนรวมระบบทางเดินอาหารประกอบน้ำหนักและความเร็วสูงถูกบันทึกจาก 23 d 47 อายุ ตัวอย่าง (100 กรัม) ตัวแทนของอุจจาระถูกเก็บรวบรวม โดยไส้นวดที่ 43, 44 และ 45 d อายุการประเมินทางเดินรวมชัดเจน digestibility (ATTD) ของส่วนประกอบของอาหารแต่ละ ตัวอย่างถูกแช่แข็ง (−20 ° C) ทันทีหลังจากเก็บรวบรวม และเก็บไว้จนกว่าจะวิเคราะห์ต่อไป ก่อนการวิเคราะห์ ตัวอย่าง fecal thawed ค้างคืน แห้ง (60° C สำหรับ 72 h), พื้น (1 มม.จอ), ผสม (ตัวอย่าง 3 จากหมูแต่ละแต่ละ), และ homogenized เป็นกลุ่ม ธัญพืช เนื้อหาสรุป อุจจาระถูกกำหนด และสำหรับความชื้น โดยวิธีอบแห้งเตาอบ (วิธี 930.15) และเถ้าถูกกำหนด โดยเตาเตา (วิธี 942.05) ตามที่ระบุ โดยนานา AOAC (2000) สารสกัดอีเทอร์ (EE) ได้วิเคราะห์หลังไฮโตรไลซ์ HCl โดย Soxhlet วิเคราะห์ไขมัน (รัฐบาลสเปน 1999) กำหนดเนื้อหา CP (N × 6.25) การวิเคราะห์โดยใช้ (N FP-528, Leco Corp. เซนต์โจเซฟ MI) และ GE ที่กำหนดกับแคลอรีมิเตอร์ระเบิดการอะเดียแบติก (พารร์ 1356 พารร์ จำกัดตราสาร โมลีน IL) AIA เนื้อหาสรุปและอุจจาระถูกกำหนดตามที่อธิบายไว้โดย Vogtmann et al. (1975) รวมแป้งธัญพืชและ ileal เนื้อหาถูกวัด โดยวิธี glucosidase ด้วยกองทัพ-amylase (วิธี 996.11 AOAC International, 2000) แป้ง gelatinized ได้กำหนด โดยเอนไซม์ในระบบไฮโตรไลซ์ดังที่ Medel et al. (1999), และปรับ amylopectin และแป้งทนเนื้อหาถูกกำหนดโดยชุดทดสอบที่สอดคล้องกัน (K-Amyl-04/06 และ Rstar 11/02, Wicklow ไอร์แลนด์ ไอร์แลนด์ Megazyme อินเตอร์เนชั่นแนล จำกัด)Digestibility Ileal ชัดเจนของส่วนประกอบอาหารเมื่อสิ้นสุดการทดลอง (อายุ 47 d), สุกรถูกเปลื้องอาหาร 12 h กแล้ว มี refed ภายใต้เงื่อนไข ad libitum สำหรับ h 6 เพื่อให้เป็นเหมือนเป็นไร้สายได้ ฉีดบาดทะยักจากเดียว chlorhydrate/กก. คีตามีนยเบย์ (Imalgene 500, Merial ห้อง S.A. ลียง ฝรั่งเศส), และ xylazine (2.2 มิลลิกรัมต่อ Xylazil-20/กก. ของ BW, Calier ห้อง S.A. บาร์เซโลนา สเปน) 20 มก.มีแล้วจัดการกับสุกรทั้งหมดเพื่อก่อให้เกิดการสลบ สุกรได้ผ่านด้วยภายใน 9-11 นาที postinjection และพวกเขามีน้ำหนัก แล้วฆ่า โดย exsanguination เพื่อลดการปนเปื้อนเลือดในระหว่างขั้นตอนการเก็บตัวอย่าง การกำหนดที่ชัดเจน ileal digestibility (ช่วยเหลือ) ของออม GE, CP แป้ง digesta ที่รวบรวมจาก cm 25 ถึง 30 หลังสุดของ ileum สดประมาณ 20 กรัมมาจากหมูแต่ละ และแช่แข็งที่ −20 องศาเซลเซียส มีวิเคราะห์ตัวอย่าง Digesta ดังที่ในอุจจาระวิเคราะห์ทางสถิติข้อมูล digestibility ประสิทธิภาพและระบบการเจริญเติบโตได้วิเคราะห์ โดยวิธีที่ 2 การวิเคราะห์ความ แปรปรวน ธัญพืชชนิด (ข้าวโพดหรือข้าว), HP เยอะ (ดิบ หรือสุก), และการโต้ตอบเป็นผลหลัก โดยใช้กระบวนการ GLM (SAS Inst. Inc. แครีแกรนต์ NC)ข้อมูลเกี่ยวกับเซรั่ม metabolite dynamics ถูกวิเคราะห์ โดยวัดซ้ำโดยใช้วิธีผสมของ SAS โต้ตอบอย่างมีนัยสำคัญระหว่างผลกระทบหลัก (ธัญพืช HP และเวลา) ถูกแยก โดยใช้ตัวเลือก SLICE ในงบ LSMEANS เพื่อระบุความแตกต่างระหว่างชนิดของธัญพืชและ HP ที่เยอะในแต่ละครั้งที่เก็บตัวอย่างเลือด หน่วยทดลองมีหมูแต่ละเงื่อนไขการตอบสนองทั้งหมด การวิเคราะห์ทั้งหมด ค่า P < 0.05 ถือเป็นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ และ ค่า P < 0.10 ถือเป็นแนวโน้ม
การแปล กรุณารอสักครู่..

วัสดุและวิธีการทุกขั้นตอนการทดลองใช้ในการศึกษาครั้งนี้ได้รับอนุมัติจากคณะกรรมการจริยธรรมของ Universidad Politécnicaมาดริดและมีความสอดคล้องกับแนวทางสเปนสำหรับการดูแลและการใช้สัตว์ในการวิจัย (รัฐบาลของสเปน 2005). การเลี้ยงสามสิบ-six หมู [(แลนด์เรซ×ขนาดใหญ่สีขาว) ตระกูล× (Duroc ×ขนาดใหญ่สีขาว) เขื่อน] หย่านมประมาณ 23 ± 3 d อายุและน้ำหนัก 7.4 ± 1.2 กิโลกรัมที่ได้รับจากฟาร์มเชิงพาณิชย์ เมื่อมาถึงที่สถานีวิจัยหมูถูกชั่งน้ำหนักที่วางไว้ในแต่ละปากกาแบนดาดฟ้า (1 × 1 เมตร) และให้มีการป้อนของแต่ละบุคคลและดื่มหัวนม อุณหภูมิห้องถูกเก็บรักษาไว้ ณ วันที่ 31 ± 1 ° C เป็นสัปดาห์แรกของการทดลองและจากนั้นอุณหภูมิจะลดลงประมาณ 2 องศาเซลเซียสต่อสัปดาห์จนกว่าจะถึง 26 ° C สุกรมีอิสระที่จะเข้าถึงน้ำตลอดการพิจารณาคดี. ส่วนผสมอาหารและทดลองออกแบบชุดของข้าวหัก A (Oryza sativa, Japonica หลากหลาย; 800 กรัมพันธุ์ Senia และ 200 กรัมพันธุ์ Tainato ต่อกิโลกรัม) ที่ได้รับจาก ผู้จัดจำหน่ายในเชิงพาณิชย์ (Esasa บายาโดลิด, สเปน) ร่อนทำความสะอาดและแยกออกเป็น 2 ส่วน ส่วนแรกที่ถูกบดผ่านโรงสีค้อนพอดีกับหน้าจอ 2.5 มม ส่วนที่สองได้รับการปรุงสุกด้วยไอน้ำ (ความชื้น 30%) ในเครื่องปฏิกรณ์ร้อน (ทื Kahl, เรนเบก, เยอรมนี) 60 นาที สั้น ๆ , อบไอน้ำถูกฉีดในช่องหลักของหม้อหุงและผสมกับธัญพืชพื้นดินเป็นเวลา 10 นาทีที่ 105 ° C ส่วนผสมที่แล้วผ่านลงหม้อหุง (15 นาทีที่ประมาณ 100 ° C) และได้รับอนุญาตให้นั่งเป็นเวลา 35 นาที ขั้นตอนที่คล้ายกันถูกนำมาใช้สำหรับชุดของข้าวโพด แต่ส่วนที่สองของธัญพืชที่ถูกปรุงสุกด้วยไอน้ำ (ความชื้น 30%) 60 นาที (15 นาทีที่ 90 องศาเซลเซียส 10 นาทีที่ 117 องศาเซลเซียสและได้รับอนุญาตให้นั่ง 35 นาที) หลังจากการปรุงอาหาร 2 ธัญพืช HP มีอากาศแห้งที่ 150 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที องค์ประกอบทางเคมีของธัญพืชกำหนดทดลองจะแสดงในตารางที่ 1 View Full ตาราง | ปิดเต็ม ViewTable 1. การออกแบบการทดลองแบบสุ่มสมบูรณ์มี 4 วิธีการรักษาและ 9 หมูของแต่ละบุคคล (5 เพศชายและเพศหญิง 4) ต่อการรักษา อาหารสูตรที่จะได้รับการตอบสนองหรือเกินความต้องการสารอาหารที่แนะนำโดยอาร์ซี (1998) และได้รับการเลี้ยงดูในรูปแบบผสม ข้อแตกต่างในหมู่อาหารที่เป็นธัญพืชที่ใช้ (520 กรัม / กิโลกรัมของอาหาร) ซึ่งเป็นข้าวโพดหรือข้าวทั้งดิบหรือสุกไอ (ตารางที่ 2) ไม่มียาปฏิชีวนะหรือสารเติมแต่งการเจริญเติบโตของการส่งเสริมการรวมอยู่ในอาหารเหล่านี้ Celite (กรดล้างดินเบา) ถูกเพิ่มเข้ามา 6 กรัม / กิโลกรัมอาหารทั้งหมดเป็นแหล่งที่เอไอเอเพิ่มเติมและถูกใช้เป็นเครื่องหมายสำหรับการศึกษาการย่อยสารอาหาร องค์ประกอบของสารอาหารของอาหารทดลองแสดงในตารางที่ 3 View Full ตาราง | ปิดเต็ม ViewTable 2. View Full ตาราง | ปิดเต็ม ViewTable 3. เลือดชักตัวอย่างและฮอร์โมนความเข้มข้นสุกรถูกเลี้ยงอาหารทดลองของตนภายใต้เงื่อนไขโฆษณา libitum จาก 23 36 d อายุแล้ว 21 ชั่วโมงศึกษาได้เริ่มที่หมูถูกอดอาหารค้างคืน 12 ชั่วโมง, โฆษณา libitum refed เวลา 3 ชั่วโมงและขาดแคลนอาหารแล้วอีกครั้งเป็นเวลา 6 ชั่วโมง เลือดที่เก็บในตอนท้ายของ 12 ชั่วโมงระยะเวลาการอดอาหารข้ามคืน (-12 เอช) 3 ชั่วโมงหลังการกลืนกินอาหาร (0 ชั่วโมง) และ 3 (ระยะเวลาภายหลังตอนกลางวันต้น) และ 6 ชั่วโมง (ปลายระยะเวลาภายหลังตอนกลางวัน) หลังจากการกีดกันอาหาร ข้อมูลที่สร้างขึ้นถูกนำมาใช้ในการประเมินผลของอาหารในการอดอาหารและความเข้มข้นภายหลังตอนกลางวันของอินซูลินและ acylated และรวม (acylated + des-acylated) ghrelin เลือด (3-6 มิลลิลิตร) ได้มาจากการเจาะเลือดคอในท่อไตรีน (12 × 75 มมโซเรีย Genlab, มาดริด, สเปน) และถูกเก็บไว้บนน้ำแข็งจนหมุนเหวี่ยง (2,000 ×กรัมเป็นเวลา 10 นาที) ที่ 4 ° C และ 50 ไมโครลิตรของ phenylmethane-sulfonylfloride (10 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรของการแก้ปัญหา) และ 50 ไมโครลิตรของ 1 N HCl ถูกเพิ่มเข้าไปในมิลลิลิตรของแต่ละเซรั่มก่อนที่จะจัดเก็บที่ -80 องศาเซลเซียส เซรั่มอินซูลินและ ghrelin acylated และรวมถูกวัดโดยใช้ชุด RIA เชิงพาณิชย์ (PI-12K, GHRT-88HK และ GHRT-89HK ตามลำดับ; Linco วิจัยเซนต์ชาร์ลส์, มิสซูรี่) intra- และ CV กันมีน้อยกว่า 10% ความไวแสงสำหรับ ghrelin รวม ghrelin acylated และอินซูลินเป็น 46.5 pg / มิลลิลิตร 7.8 pg / มิลลิลิตรและ 0.28 MU / มิลลิลิตรตามลำดับ. หมูประสิทธิภาพและชัดเจนรวมทางเดินย่อยได้ของส่วนประกอบของอาหารการเพิ่มของน้ำหนักร่างกายและ FI ถูกบันทึกไว้ 23-47 d อายุ ตัวอย่างแทน (100 กรัม) ของอุจจาระที่ถูกเก็บรวบรวมเป็นรายบุคคลโดยการนวดทางทวารหนักที่ 43, 44, และ 45 d อายุการประมาณย่อยได้ในระบบทางเดินรวมที่ชัดเจน (ATTD) ส่วนประกอบของอาหาร กลุ่มตัวอย่างที่ถูกแช่แข็ง (-20 ° C) ทันทีหลังจากที่การเก็บรวบรวมและจัดเก็บไว้จนกว่าการวิเคราะห์ต่อไป ก่อนที่จะวิเคราะห์ตัวอย่างอุจจาระถูกละลายในชั่วข้ามคืนแห้ง (60 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมง) พื้นดิน (หน้าจอ 1 มิลลิเมตร) ผสม (3 ตัวอย่างจากแต่ละหมูของแต่ละบุคคล) และหดหาย ธัญพืชฟีดและอุจจาระได้รับการพิจารณาสำหรับความชื้นโดยวิธีอบแห้ง (วิธี 930.15) และเถ้าถูกกำหนดโดยเตาเผา (วิธี 942.05) ตามที่ระบุโดย AOAC อินเตอร์เนชั่นแนล (2000) สารสกัดจากอีเธอร์ (EE) หลังจากที่ได้รับการวิเคราะห์การย่อยสลาย HCl โดยการวิเคราะห์วิธีการสกัดแบบไขมัน (รัฐบาลของสเปน, 1999) เนื้อหา CP (ยังไม่มี× 6.25) ถูกกำหนดโดยใช้การวิเคราะห์ (FP-528 N, Leco คอร์ปเซนต์โจเซฟ, มิชิแกน) และจีอีมุ่งมั่นที่มีระเบิดอะเดียแบติกร้อน (พาร์ 1,356 พาร์ Instrument Co. , ลีน IL) เอไอเอฟีดและอุจจาระได้รับการพิจารณาตามที่อธิบาย Vogtmann et al, (1975) แป้งทั้งหมดในธัญพืชและเนื้อหา ileal วัดโดยวิธีกลูโคอะไมเลสα (วิธี 996.11; AOAC นานาชาติ, 2000) แป้ง gelatinized ถูกกำหนดโดยการย่อยของเอนไซม์ตามที่อธิบายไว้โดยเมเดล, et al (1999) และอะไมโลสที่ amylopectin และปริมาณแป้งทนต่อการถูกกำหนดโดยใช้ชุดทดสอบที่สอดคล้องกัน (K-amyl-06/04 และ 02/11 Rstar, Megazyme ระหว่างประเทศไอร์แลนด์ จำกัด วิกโคลว์ไอร์แลนด์). ปรากฏ ileal ย่อย ส่วนประกอบของอาหารในตอนท้ายของการพิจารณาคดี(47 d อายุ) หมูจะถูกตัดสิทธิ์ของอาหารเป็นเวลา 12 ชั่วโมงและจากนั้นถูก refed ภายใต้เงื่อนไขโฆษณา libitum เวลา 6 ชั่วโมงเพื่อให้เกิดความเป็นเนื้อเดียวกัน FI เป็นไปได้ ฉีดเข้ากล้ามเนื้อเดียวของ 20 มิลลิกรัมของคีตา chlorhydrate / กิโลกรัมของ BW (Imalgene 500, Merial ห้องปฏิบัติการ SA, ลียง, ฝรั่งเศส) บวก xylazine (2.2 มิลลิกรัม Xylazil-20 / กิโลกรัมของ BW, Calier ห้องปฏิบัติการ SA, บาร์เซโลนา, สเปน) เป็น ยาแล้วไปยังสุกรทั้งหมดที่จะทำให้เกิดการดมยาสลบ สุกรถูกอสัญญีที่น่าพอใจภายใน 9-11 นาที postinjection และพวกเขาก็ชั่งน้ำหนักแล้วและฆ่าด้วยการเอาเพื่อลดการปนเปื้อนในเลือดในระหว่างขั้นตอนการเก็บตัวอย่าง การตรวจสอบการย่อย ileal ชัดเจน (AID) ของ OM จีอีซีพีและแป้งประมาณ 20 กรัม digesta สดที่เก็บได้จากในช่วง 25 ถึง 30 เซนติเมตร ileum ถูกนำตัวออกจากกันและหมูแช่แข็งที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส ตัวอย่าง Digesta วิเคราะห์ตามที่อธิบายไว้สำหรับอุจจาระ. สถิติการวิเคราะห์ข้อมูลเกี่ยวกับการเจริญเติบโตและการย่อยสารอาหารที่ได้รับการวิเคราะห์โดย 2 way ANOVA กับประเภทธัญพืช (ข้าวโพดหรือข้าว) HP ของธัญพืช (ดิบหรือสุก) และปฏิสัมพันธ์ของพวกเขาเป็น ผลกระทบหลักโดยใช้ขั้นตอน GLM (SAS Inst. อิงค์นิวเคลียส NC). ข้อมูลเกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงของสารซีรั่มที่ได้มาวิเคราะห์โดยการวัดซ้ำโดยใช้ขั้นตอนการผสมของเอสเอ ปฏิสัมพันธ์ที่สำคัญระหว่างผลกระทบหลัก (ธัญพืช, HP, และเวลา) ถูกย่อยสลายโดยใช้ตัวเลือก SLICE ในงบ LSMEANS ในการระบุความแตกต่างระหว่างประเภทธัญพืชและ HP ของธัญพืชในแต่ละครั้งเก็บตัวอย่างเลือด หน่วยทดลองหมูส่วนบุคคลสำหรับเกณฑ์ในการตอบสนองทั้งหมด สำหรับการวิเคราะห์ทุก P-value <0.05 ได้รับการพิจารณาอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติและ P-value <0.10 ได้รับการพิจารณาแนวโน้ม
การแปล กรุณารอสักครู่..
