parameters (kmax and spectral fine structure % III/II) compared to
standards and to data available in literature, (c) co-chromatography
with standards and (d) chemical reactions to verify the type
and position of the substituents in the xanthophylls (Pfander,
Riesen, & Niggli, 1994; Schiedt & Liaaen-Jense, 1995). The chemical
reactions were acetylation of secondary hydroxyl groups with
acetic anhydride, methylation of hydroxyl groups in allylic
position with acidified methanol, iodine catalysed isomerisation
and epoxide-furanoxide rearrangement (5,6-epoxide–5,8-epoxide)
with dilute HCl (Rodriguez-Amaya, 1999).
The major carotenoids in each sample were quantified by using
calibration curves prepared from standards, and the results were
expressed as lg/g of sample. Standard curves were constructed
with five different concentrations for each carotenoid, each point
in duplicate, with lines passing by origin and coefficients of
co-relation greater than or similar to 0.95. Violaxanthin was quantified
with the standard curve of lutein, and the cis-isomers of bcarotene
with the standard curve of all-trans isomer (Assunção &
Mercadante, 2003). Due to the difficulty of isolating the f-carotene
standard, its quantification was performed through the standard
curve of the all-trans-b-carotene.
2.3.2. Isolation and purification of the standards
The standards used in this work were isolated from other plant
species, such as carrots and green vegetables, by using open column
chromatography (OCC), according to Kimura and Rodriguez-Amaya
(2002), with a glass column of 2.5 25 cm packed with MgO:Hyflosupercel
(1:1), activated for 2 h at 110 C and developed with
petroleum ether containing varying quantities of acetone and ethyl
ether. Concentrations of the standard solutions were determined
through a spectrophotometer (Hitachi, U-1800, Tokyo, Japan) and
corrected according to their purity through HPLC, considering 90%
as minimum purity to be used as standard.
2.3.3. Determination of carotenoid retention during the process
Manystudies that propose to investigate retention of carotenoids
in processed foods do not take into account the gain or loss of weight
during processing through incorporation or through loss of water or
water soluble solids. This could cause either underestimation or
overestimation of the true retention value. A simple calculation on
dry basis may also overestimate the retention of these compounds
(De Sá & Rodriguez-Amaya, 2004; Rodriguez-Amaya, 1999).
Therefore, besides the results being expressed as lg/g of sample,
they were also presented based on the mass of raw food, multiplying
the concentration obtained for the sample by the ratio of the food
mass after processing and of the food mass prior to processing.
Therefore, true retention (% TR) was calculated by the equation
proposed by Murphy, Criner and Gray (1975) cited by De Sá and
Rodriguez-Amaya (2004), as follows: % TR = 100 (nutrient content
per g of processed food g of food after processing)/(nutrient
content per g of raw food g of food before processing).
2.4. Statistical analysis
The results were submitted to analysis of variance (ANOVA) and
to Tukey test for any significant differences (P 6 0.05). In all the
statistical analyses, the ANOVA assumptions, such as independence
and normal distribution of the residues and homogeneity
of variances, were considered.
3. Results and discussion
The composition of carotenoids in the raw samples, in the
cooked samples, and in the C. moschata ‘Menina Brasileira’ and C.
maxima ‘Exposição’ pumpkin purees were determined by reverse
phase HPLC (Fig. 1). The parameters used for the identification of
the peaks are shown in Table 1.
As expected, epoxy-carotenoids and hydroxy-carotenoids, such
as violaxanthin and lutein, were the first to elute in the reverse
phase column, followed by f-carotene, a-carotene, all-trans-bcarotene
and cis-b-carotene, respectively. Peak 3 was not identified.
Peaks 4 and 5 showed chromatographic data and UV–visible
absorption spectra similar to those described for the carotenoids
zeaxanthin and a-cryptoxanthin, respectively, as had already been
noted in another study involving the same species of pumpkins
(Azevedo-Meleiro & Rodriguez-Amaya, 2007). However, because
they are present in low concentrations, it was not possible to obtain
isolation by OCC, therefore the spectra were not determined in
other solvent systems nor were the necessary reactions of identification
carried out, and thus only one indication of the identity of
those carotenoids was considered. Other minor peaks were also
ignored. Typically, one to four carotenoids are predominant in the
pumpkin species, with several other compounds detected in low
concentrations or traces. The separation, identification, and quantification
of these carotenoids were not the aim of this work; they can
be better studied with the use of a mass spectrophotometer
(Azevedo-Meleiro & Rodriguez-Amaya, 2004).
The concentration of the major carotenoids identified by HPLC
in raw C. moschata ‘Menina Brasileira’ and C. maxima ‘Exposição’
pumpkins are shown in Table 2. The purity of the standard used
was of 92% for lutein and 98% for a-carotene e all-trans-b-carotene,
with coefficient of co-relation of (R2) of the standard curves of
0.9928, 0.9941 and 0.9933, respectively. Figs. 2 and 3 show the true
retention of carotenoids (% TR) during production of C. moschata
‘Menina Brasileira’ and C. maxima ‘Exposição’ pumpkin purees,
respectively.
For the C. moschata ‘Menina Brasileira’ samples, the major
carotenoids were all-trans-b-carotene and a-carotene, with lower
amounts of f-carotene, violaxanthin and lutein. In the samples of
C. maxima ‘Exposição’, the major carotenoid was all-trans-bcarotene,
with good amounts of violaxanthin and lutein in raw
pumpkins.
Although they are still considered interesting when compared
with other plant species, concentrations of carotenoids in raw
pumpkins are lower than those reported in other studies regarding
the same species and varieties of pumpkins. Azevedo-Meleiro and
Rodriguez-Amaya (2007) also noted the all-trans-b-carotene and
a-carotene as the major carotenoids in C. moschata ‘Menina
Brasileira’ pumpkins, but with higher concentrations, 66.7 ±
9.1 lg/g to all-trans-b-carotene and 26.8 ± 5.1 lg/g to a-carotene.
In the C. maxima ‘Exposição’ species, authors noted violaxanthin
(20.6 ± 3.3 lg/g) as its major carotenoid. The all-trans-b-carotene
was the second in concentration, 15.4 ± 4.2 vs 13.38 ± 2.25 lg/g
detected in this present study, where it was the major carotenoid.
Indeed, the concentration ranges cited in literature are wide.
Rodriguez-Amaya et al. (2008) detected concentrations of 14–
79 lg/g of all-trans-b-carotene and 8.3–42 lg/g of a-carotene for
C. moschata ‘Menina Brasileira’ pumpkins, and 3.1–28 lg/g of
all-trans-b-carotene for C. maxima ‘Exposição’ pumpkins. Major
qualitative and quantitative differences in carotenoids, even within
the same species and variety, can be noted depending on the cultivar,
differences in growing environment, such as temperature,
nutrient availability, soil, intensity of sunlight, ripening stage,
post harvesting, amongst other factors that can significantly affect
the biosynthesis and metabolism of carotenoids in vegetables
(Cazzonelli & Pogson, 2010; Rodriguez-Amaya, 1999). The studies
mentioned above, for example, were conducted with pumpkins
harvested in the northeast and southeast regions of Brazil, where
the average temperatures are higher than those in the southern
region of the country, where the pumpkins used in this study
were cultivated.
พารามิเตอร์ ( kmax สเปกตรัมและโครงสร้างดี % 3 / 2 ) เปรียบเทียบกับ
มาตรฐานและข้อมูลที่มีอยู่ในวรรณคดี , ( C ) Co โครม
ด้วยมาตรฐานและ ( d ) ปฏิกิริยาทางเคมีในการตรวจสอบประเภท
และตำแหน่งของหมู่แทนที่ในแซนโทฟิลล์ ( pfander
รีเซิ่น , & niggli , 2537 ; schiedt & liaaen jense , 1995 ) สารเคมี
ปฏิกิริยาของกลุ่มไฮดรอกซิลกับมัธยม
ทิเลชันสารอเซติก แอนไฮไดรด์ methylation ของกลุ่มไฮดรอกซิลใน allylic
ปรับตำแหน่งด้วยเมทานอล สารไอโอดีนและ catalysed isomerisation
วอมแวม furanoxide ใหม่ ( 5,6-epoxide – 5,8-epoxide )
กับเจือจาง HCl ( โรดริเกซ Amaya , 1999 ) .
carotenoids สำคัญในแต่ละตัวอย่างถูกวัดโดยใช้
เส้นโค้งสอบเทียบที่เตรียมจากมาตรฐานและผลลัพธ์ที่ได้
แสดงเป็น LG / g ของกลุ่มตัวอย่างเส้นโค้งมาตรฐานขึ้น
5 ความเข้มข้นที่แตกต่างกันสำหรับแต่ละในแต่ละจุด
ในซ้ำ กับสายผ่านต้นและค่าสัมประสิทธิ์ของความสัมพันธ์
Co มากกว่าหรือใกล้เคียงกับคน . ไวโอลาแซนทินเป็น quantified
กับเส้นโค้งมาตรฐานของลูทีน และ ซิสไอโซเมอร์ของ bcarotene
กับเส้นโค้งมาตรฐานของทรานส์ไอโซเมอร์ ( assun çã&
o mercadante , 2003 )เนื่องจากความยากของการมาตรฐาน f-carotene
, ปริมาณการผ่านเส้นโค้งมาตรฐานของ all-trans-b-carotene
.
2.3.2 . การแยกและการทำให้บริสุทธิ์ของมาตรฐาน
มาตรฐานที่ใช้ในงานนี้ที่แยกได้จากพืช
อื่น ๆ เช่น แครอท และผักสีเขียว โดยใช้คอลัมน์โครมาโทกราฟี
เปิด ( OCC ) ตามคิมุระกับ Rodriguez Amaya
( 2002 ) , กับคอลัมน์ 2.5 25 ซม. บรรจุด้วย MgO : hyflosupercel
( 1 : 1 ) , เปิดใช้งาน 2 ชั่วโมงที่ 110 C และพัฒนาปิโตรเลียมอีเธอร์ที่มีปริมาณแตกต่างกัน
) และเอทิลอีเทอร์ ความเข้มข้นของโซลูชั่นมาตรฐานวิเคราะห์
ผ่าน Spectrophotometer ( ฮิตาชิ u-1800 , โตเกียว , ญี่ปุ่น ) และ
แก้ไขตามความบริสุทธิ์ของพวกเขาผ่าน 90 %
2 พิจารณาโดยความบริสุทธิ์ขั้นต่ำ เพื่อใช้เป็นมาตรฐาน
2.3.3 . การหาปริมาณคาโรทีนอยด์ความคงทนในระหว่างกระบวนการ
manystudies ที่เสนอเพื่อศึกษาความคงทนของ carotenoids
ในอาหารแปรรูปไม่พิจารณารับหรือการสูญเสียน้ำหนัก
ในระหว่างการประมวลผลผ่านนิติบุคคล หรือ ผ่านการสูญเสียน้ำหรือ
น้ำ soluble solids . นี้อาจก่อให้เกิดทั้งการการประเมินค่าต่ำไปหรือ
ประเมินมากเกินไปของมูลค่าการเก็บรักษาจริง การคำนวณง่าย
บริการพื้นฐานอาจ overestimate ความคงทนของสารเหล่านี้
( de S . kgm & Rodriguez Amaya , 2004 ; Rodriguez Amaya , 1999 ) .
ดังนั้น นอกจากนั้นยังถูกแสดงเป็น LG / กรัมตัวอย่าง
พวกเขายังนำเสนอขึ้นอยู่กับมวลของอาหารดิบ , คูณ
ความเข้มข้น สำหรับตัวอย่างได้ โดยอัตราส่วนของอาหาร
หลังจากการประมวลผล และมวลของมวลอาหารก่อนที่จะประมวลผล .
ดังนั้นจริงความคงทน ( % TR ) คำนวณได้จากสมการ
เสนอโดยเมอร์ฟี่ criner และสีเทา ( 1975 ) โดยอ้าง de S . kgm
Rodriguez และ Amaya ( 2004 ) ดังนี้ : TR = 100 ( สารอาหาร
/ กรัม อาหารแปรรูป กรัมของอาหารหลังจากการประมวลผล ) / ( สารอาหาร
เนื้อหาต่อกรัมของอาหารดิบ กรัมของอาหารก่อนการประมวลผล ) .
2.4 .การวิเคราะห์ทางสถิติ
ผลลัพธ์ที่ถูกส่งไปยังการวิเคราะห์ความแปรปรวน ( ANOVA ) และการทดสอบเพื่อทดสอบ
มีความแตกต่างทางสถิติ ( P 6 ระดับ ) ในทั้งหมด
การวิเคราะห์สถิติ , สมมติฐาน ANOVA เช่นความเป็นอิสระ
และการกระจายปกติของที่ตกค้าง และความสม่ำเสมอของความแปรปรวน
มีการพิจารณา .
3 ผลและการอภิปราย
องค์ประกอบของแคโรทีนอยด์ในตัวอย่างดิบใน
อาหารตัวอย่าง และในค . moschata ' สาวน้อย brasileira ' และ C .
' O ' Maxima exposi çã purees ฟักทองซึ่งย้อนกลับ
เฟส HPLC ( รูปที่ 1 ) พารามิเตอร์ที่ใช้เพื่อระบุตัวตนของ
ยอดแสดงในตารางที่ 1 .
เป็นไปตามคาด คาโรทีนอยด์ อีพ็อกซี่และไฮดรอกซีคาร์โรทีนอยด์ เช่น
เป็นไวโอลาแซนทิน และลูทีน เป็นคนแรกที่ elute ในย้อนกลับ
เฟส f-carotene คอลัมน์ตามด้วย ,a-carotene ทั้งหมดและทรานส์ bcarotene
cis-b-carotene ตามลำดับ สูงสุดที่ 3 ไม่ระบุ .
ยอด 4 และ 5 พบข้อมูลโครมาโทกราฟีและ UV –มองเห็น
การดูดกลืนรังสีที่คล้ายกับที่อธิบาย carotenoids
และซีแซน a-cryptoxanthin ตามลำดับ ตามที่ได้ระบุไว้ในงานวิจัยอีก
เกี่ยวข้องกับชนิดเดียวกันของฟักทอง
( ซเวโด้ meleiro & Rodriguez Amaya , 2007 ) อย่างไรก็ตามเพราะพวกเขามีอยู่ในความเข้มข้นต่ำ
ก็เป็นไปได้เพื่อขอรับ
แยกโดยโอซีซี , ดังนั้นนี้ไม่ได้กำหนดในระบบตัวทำละลายอื่น
หรือปฏิกิริยาที่จำเป็นของประชาชน
ดำเนินการ ดังนั้นเพียงหนึ่งแสดงเอกลักษณ์ของ carotenoids เหล่านี้ถือว่า
. ยอดเล็กๆอีกยัง
ละเว้น โดยทั่วไปแล้วหนึ่งถึงสี่คาร์โรทีนอยด์จะโดดใน
ฟักทองกับหลาย ๆชนิด สารประกอบที่พบในความเข้มข้นต่ำ
หรือร่องรอย การแยก จำแนก และปริมาณ
ของ carotenoids เหล่านี้ไม่ได้เป็นเป้าหมายของงานนี้ พวกเขาสามารถ
ดีกว่าเรียนด้วยการใช้มวลวัสดุ
( ซเวโด้ meleiro & Rodriguez Amaya
, 2004 )ความเข้มข้นของ carotenoids สำคัญระบุ HPLC
ดิบ C moschata ' สาวน้อย ' C . maxima ' brasileira exposi çã O '
แตงแสดงในตารางที่ 2 ความบริสุทธิ์ของมาตรฐานใช้
เป็น 92% สำหรับลูทีนและ 98% a-carotene E all-trans-b-carotene
กับ , สัมประสิทธิ์ Co . ( R2 ) ของเส้นโค้งมาตรฐานของ
0.9928 0.9941 0.9933 , และ ตามลำดับ มะเดื่อ . 2 และ 3 แสดงจริง
ความคงทนของแคโรทีนอยด์ ( % TR ) ในระหว่างการผลิตของ moschata
'menina brasileira ' C . maxima ' exposi çã O '
purees ฟักทอง , ตามลำดับ สำหรับตัวอย่าง C moschata ' สาวน้อย brasileira ' , carotenoids และเป็นหลัก
all-trans-b-carotene a-carotene ที่มีปริมาณต่ำของ f-carotene ไวโอลาแซนทิน และลูทีน
, . ในตัวอย่างของ
C . maxima ' exposi çã O 'ที่สำคัญคือ แคโรทีนอยด์ทั้งหมด bcarotene ทรานส์ , เงินดีและไวโอลาแซนทิน
ลูทีนในดิบ ฟักทอง ถึงแม้ว่าพวกเขาจะยังคงพิจารณาที่น่าสนใจเมื่อเทียบกับพืชชนิดอื่น
ปริมาณแคโรทีนอยด์ในดิบ
แตงกว่าที่รายงานในการศึกษาอื่น ๆเกี่ยวกับ
สายพันธุ์เดียวกันและพันธุ์แตง meleiro
ซเวโด้ และRodriguez Amaya ( 2007 ) ยังตั้งข้อสังเกต all-trans-b-carotene และ
a-carotene เป็นแคโรทีนอยด์ที่สำคัญใน C moschata ' สาวน้อย
brasileira ' ฟักทอง แต่ที่มีความเข้มข้นสูงกว่าร้อยละ±
9.1 LG / กรัมและ all-trans-b-carotene 26.8 ± 5.1 LG / G a-carotene .
ใน C . maxima ' exposi çã O ' ชนิด ผู้เขียนกล่าว ไวโอลาแซนทิน
( 20.6 ± LG / 3.3 กรัม ) เป็นคาโรทีนอยด์ที่สำคัญของมัน การ all-trans-b-carotene
เป็นครั้งที่สองในความเข้มข้น , 15.4 ± 4.2 กก. VS ± 2.25 LG / g
ที่ตรวจพบในการศึกษานี้ ซึ่งมันเป็นเชื้อที่สำคัญ
แน่นอน อ้างในวรรณคดี มีช่วงความเข้มข้นกว้าง
Rodriguez Amaya et al . ( 2008 ) ตรวจพบความเข้มข้นของ 14 –
79 LG / กรัม และ all-trans-b-carotene 8.3 – 42 LG / กรัม a-carotene สำหรับ
C moschata ' สาวน้อย brasileira ' ฟักทอง และ 3.1 – 28 LG / g
all-trans-b-carotene C . maxima ' exposi çã O ' ฟักทอง สาขา
คุณภาพและปริมาณความแตกต่างใน carotenoids , แม้แต่ใน
สายพันธุ์เดียวกันและความหลากหลายที่สามารถสังเกต ทั้งนี้ขึ้นอยู่กับพันธุ์
ความแตกต่างในการเจริญเติบโต สภาพแวดล้อม เช่น อุณหภูมิ ,
ว่าง , ธาตุดิน , ความเข้มของแสงอาทิตย์ เมื่อเวที
หลังการเก็บเกี่ยว ท่ามกลางปัจจัยอื่น ๆที่สามารถส่งผลกระทบต่อ
กระบวนการและการเผาผลาญของแคโรทีนในผัก
( cazzonelli &พอกสัน , 2010 ; Rodriguez Amaya , 1999 ) การศึกษา
ดังกล่าวข้างต้น ตัวอย่างเช่น การทดลองกับฟักทอง
เก็บเกี่ยวในพื้นที่ภาคตะวันออกเฉียงเหนือและตะวันออกเฉียงใต้ของประเทศบราซิลที่
อุณหภูมิเฉลี่ยสูงกว่าผู้ที่อยู่ในภาคใต้
ภาคของประเทศ ที่แตงใช้ในการศึกษา
ปลูก .
การแปล กรุณารอสักครู่..
