A total of 104 retail chicken meat (n=54: 15 thigh, 8 skin, 6 inner fillet, 5 mix of thigh and breast, 5 neck meat, 4 mince, 3 breast and 8 uncertain meat) and giblet (n=50: 42 liver, 4 crop, 2 heart and 2 reproductive tract) samples were collected from 10 supermarkets in Fukuoka Prefecture, Japan, between June and October 2014. Samples were incubated in 9 volumes of buffered peptone water (BPW) (Oxoid, Basingstoke, U.K.) at 35°C for 18 hr. Aliquots of each BPW culture were then centrifuged at 13,800 × g for 5 min, and the supernatant was discarded. The pellet was resuspended in normal saline (1 ml) and centrifuged at 13,800 × g for 5 min. The supernatant was discarded, and the pellet was resuspended in 1 ml of 0.1× TE buffer with 5% Chelex 100 (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, U.S.A.) before being boiled for 10 min, and then centrifuged at 13,800 × g for 10 min. The supernatant was used as a template for a PCR assay to detect E. albertii using primer pair lysP107F/lysP358R, as described previously [6].
จำนวน 104 ขายปลีกไก่เนื้อ (n =สะโพก 54:15, 8 ผิว เนื้อภายใน 6 ผสม 5 สะโพก และเต้านม เนื้อคอ 5, 4 ไส้ เต้านม 3 และ 8 เนื้อแน่) และอย่างไร giblet (n =ตับ 50:42, 4 ตัด 2 หัวใจ และทางเดินสืบพันธุ์ 2) ตัวอย่างถูกเก็บรวบรวมจากซุปเปอร์มาร์เก็ต 10 ในฟูกูโอกะจังหวัด ญี่ปุ่น ระหว่างเดือนมิถุนายนและ 2557 ตุลาคม ตัวอย่างที่ incubated ในปริมาณ 9 น้ำ peptone ถูกบัฟเฟอร์ (สมาคมฯ) (Oxoid, Basingstoke สหราชอาณาจักร) ที่ 35° C สำหรับ Aliquots 18 ชั่วโมงของแต่ละสมาคมฯ ได้ centrifuged แล้วที่ 13,800 × g สำหรับ 5 นาที และ supernatant ถูกละทิ้ง เม็ดถูก resuspended ในน้ำเกลือปกติ (1 ml) และ centrifuged ที่ g × 13,800 ใน 5 นาที Supernatant ถูกละทิ้ง และเม็ดถูก resuspended ใน 1 ml ของบัฟเฟอร์ TE × 0.1% 5 100 Chelex (ห้องปฏิบัติการชีวภาพ Rad เฮอร์คิวลิส CA สหรัฐอเมริกา) ก่อนที่จะถูกต้มใน 10 นาที และ centrifuged แล้ว ที่ 13,800 × g สำหรับ 10 นาที Supernatant ถูกใช้เป็นแม่แบบสำหรับทดสอบ PCR ตรวจหา E. albertii ใช้รองพื้นคู่ lysP107F/lysP358R ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [6]
การแปล กรุณารอสักครู่..
รวมเป็นเนื้อไก่ค้าปลีก 104 (n = 54: 15 ต้นขา, 8 ผิว, 6 เนื้อภายใน 5 ส่วนผสมของต้นขาและเต้านม 5 เนื้อคอ 4 สับ 3 เต้านมและ 8 เนื้อสัตว์ที่ไม่แน่นอน) และ giblet (n = 50: 42 ตับ 4 พืช 2 หัวใจและระบบสืบพันธุ์ 2) ตัวอย่างที่ถูกเก็บมาจากซูเปอร์มาร์เก็ต 10 จังหวัดฟุกุโอกะญี่ปุ่นระหว่างเดือนมิถุนายนและตุลาคม 2014 ตัวอย่างถูกบ่มใน 9 ปริมาณน้ำเปปโตนบัฟเฟอร์ (BPW) (Oxoid เบซิง, สหราชอาณาจักร ) ที่ 35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 18 ชั่วโมง aliquots ของแต่ละวัฒนธรรม BPW ถูกปั่นแล้วที่ 13,800 ×กรัมเป็นเวลา 5 นาทีและสารละลายที่ถูกทิ้ง เม็ดถูก resuspended ในน้ำเกลือ (1 มล.) และหมุนเหวี่ยงที่ 13,800 ×กรัมเป็นเวลา 5 นาที สารละลายทิ้งและเม็ดที่ถูก resuspended ใน 1 มิลลิลิตร 0.1 ×บัฟเฟอร์ TE 5% Chelex 100 (ห้องปฏิบัติการ Bio-Rad ดาว, CA, USA) ก่อนที่จะถูกนำมาต้มเป็นเวลา 10 นาทีและปั่นแล้วที่ 13,800 ×กรัม 10 นาที สารละลายที่ใช้เป็นแม่แบบสำหรับการทดสอบ PCR ในการตรวจสอบอี albertii ใช้คู่ไพรเมอร์ lysP107F / lysP358R ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [6]
การแปล กรุณารอสักครู่..
ทั้งหมด 104 ขายปลีกไก่เนื้อ ( n = 8 ผิวต้นขา 54 : 15 , 6 ภายในเนื้อปลา 5 ผสมของต้นขาและหน้าอก 5 คอเนื้อเต้านม 4 สับ , 3 และ 8 ไม่แน่ใจเนื้อ ) และเครื่องในของสัตว์ปีก ( n = 50 : 42 4 พืช 2 ตับ หัวใจ และ 2 ระบบสืบพันธ์ ) ตัวอย่าง จำนวน 10 จากซุปเปอร์มาร์เก็ตในจังหวัดฟุกุโอะกะ ประเทศญี่ปุ่น ระหว่างเดือนมิถุนายนและตุลาคม 2014จำนวน 9 เล่ม ตามลำดับ ) ในน้ำ ( BPW ) ( oxoid Basingstoke , สหราชอาณาจักร ) ที่ 35 ° C เป็นเวลา 18 ชั่วโมง เฉยๆของแต่ละวัฒนธรรม แล้วปริมาณไฟฟ้าที่ BPW ×กรัมเป็นเวลา 5 นาที และนำมันทิ้ง เม็ดเป็น resuspended ในน้ำเกลือ ( 1 มิลลิลิตร ) และปริมาณไฟฟ้าที่× g 5 นาทีน่านถูกทิ้งและถูก resuspended เม็ดใน 1 มิลลิลิตรของ 01 × TE buffer 5% chelex 100 ( ไบโอ ราดห้องปฏิบัติการ , Hercules , CA , USA ) ก่อนที่จะถูกต้มนาน 10 นาที และระดับที่ผู้× G สำหรับ 10 นาทีที่นำมาใช้เป็นแม่แบบสำหรับ PCR assay เพื่อตรวจสอบ e albertii ใช้ไพรเมอร์คู่ lysp107f / lysp358r ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 6 ]
การแปล กรุณารอสักครู่..