HPLC analysis was performed using a

HPLC analysis was performed using an Alliance 2695 (Separation
Module, Waters, Milford, MA, USA) quaternary pump
equipped with an auto-sampler. A Restek C18 (Restek, Bellefonte,
PA, USA) column (2.1 100 mm, 5mm) was used at 28
C with
injected volume 5mL. The binary solvent system used for the
elution gradient consisted of 0.2% acetic acid in H2O (solvent B) and
MeOH (solvent A) at a constant flow rate of 200mL min1
. A linear
gradient profile with the following proportions (v/v) of solvent A
was applied (t (min), % A): (0, 40), (25, 80), with 7 min for reequilibration.
MS/MS was performed using a Micromass Quatro
UltimaTM “Pt” double quadrupole mass spectrometer (Micromass,
Manchester City, UK). All of the analyses were performed using a
turbo ion spray source in negative ion mode with the following
settings for SA, JA, ABA, and OPDA: capillary voltage 3000 V,
energy cone 35V, RF Lens1 (20), RF Lens2 (0.3), source temp 100
C,
de-solvation temp 380
C, gas cone 100 L h1
, gas de-solvation
70 L h1
, collision (50), and multiplier (650). The MS/MS parameters
were optimized in infusion experiments using individual
standard solutions of SA, JA, ABA and OPDA at a concentration of
10 ngmL1 diluted in mobile phase A/B (40:60, v/v). MS/MS
product ions were produced by collision-activated dissociation of
selected precursor ions in the collision cell of the mass
spectrometer, and mass was analyzed using the second analyzer
of the instrument. Quantification was performed in the multiple
reaction monitoring (MRM) mode.
2.2

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทำการวิเคราะห์ HPLC ใช้พันธมิตร 2695 (แยกโมดูล น้ำ ลฟอร์ด MA, USA) ปั๊มสี่พร้อมกับการตรวจวัดอัตโนมัติ C18 เป็น Restek (Restek, BellefontePA สหรัฐอเมริกา) ใช้ที่ 28 C กับคอลัมน์ (2.1 100 mm, 5 mm)ฉีดปริมาณ 5 มล. ระบบตัวทำละลายแบบไบนารีที่ใช้สำหรับการการไล่ระดับสีชะประกอบด้วยกรดซิตริก 0.2% ใน H2O (ตัวทำละลาย B) และเมธานอล (ตัวทำละลาย A) 200 มิลลิลิตร min1 อัตราไหลคงที่. การเชิงเส้นไล่ระดับสีรูปสัดส่วนต่อไปนี้ (v/v) ของตัวทำละลาย Aถูกนำไปใช้ (t (min), % A): (0, 40), (25, 80), 7 นาทีสำหรับ reequilibrationทำใช้ใน Micromass Quatro MS/MSUltimaTM "Pt" quadrupole คู่มวลสเปกโตรมิเตอร์ (Micromassเชสเตอร์ สหราชอาณาจักร) การวิเคราะห์ทั้งหมดดำเนินการโดยใช้การแหล่งสเปรย์ไอออนเทอร์โบในโหมดไอออนลบที่มีต่อไปนี้การตั้งค่า สำหรับ SA, JA, ABA, OPDA: ฝอยแรงดัน 3000 Vพลังงานกรวย 35V, RF Lens1 (20), RF Lens2 (0.3), แหล่งอุณหภูมิ 100 Cอนุภาคที่ยกเลิกนำอุณหภูมิ 380 C, h1 100 L กรวยแก๊สแก๊สอนุภาคที่นำยกเลิก70 ลิตร h1ชน (50), และคูณ (650) พารามิเตอร์ MS/MSได้ดีที่สุดในการทดลองยาที่ใช้แต่ละโซลูชั่นมาตรฐาน SA, JA, ABA และ OPDA ที่ความเข้มข้นของngmL1 10 ที่เจือจางในเฟสมือถือ A / B (40:60, v/v) MS/MSผลิตผลิตภัณฑ์ไอออน โดยเรียกชน dissociation ของเลือกปูชนียบุคคลไอออนในเซลล์ของมวลชนสเปกโตรมิเตอร์ และมวลถูกวิเคราะห์โดยใช้ตัววิเคราะห์สองของเครื่องดนตรี ดำเนินการในหลายการนับปฏิกิริยา (MRM) โหมดตรวจสอบ2.2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิเคราะห์ HPLC ถูกดำเนินการโดยใช้พันธมิตร 2695 (แยก
โมดูล Waters, ฟอร์ด, MA, USA) ปั๊มสี่
พร้อมกับอัตโนมัติตัวอย่าง Restek C18 (Restek, เบลลาฟอน,
PA, USA) และคอลัมน์ (2.1? 100 มม 5mm) ได้ถูกใช้ในวันที่ 28? C ที่มี
5ml ปริมาณการฉีด ระบบตัวทำละลายไบนารีที่ใช้สำหรับ
การไล่ระดับสีชะประกอบด้วยกรดอะซิติก 0.2% ใน H2O (ตัวทำละลาย B) และ
เมธานอล (ตัวทำละลาย) ที่มีอัตราการไหลคงที่ของ 200mL
min1 เชิงเส้น
รายละเอียดการไล่ระดับสีที่มีสัดส่วนต่อไปนี้ (v / v) ของตัวทำละลาย
ถูกนำมาใช้ (T (นาที),% A):. (0, 40), (25, 80), 7 นาที reequilibration
MS / MS เป็น ดำเนินการโดยใช้ Micromass Quatro
UltimaTM "จุด" สอง quadrupole มวลสเปกโตรมิเตอร์ (Micromass,
แมนเชสเตอร์ซิตี, สหราชอาณาจักร) ทั้งหมดของการวิเคราะห์ที่ถูกดำเนินการโดยใช้
เทอร์โบไอออนแหล่งสเปรย์ในโหมดไอออนลบมีดังต่อไปนี้
การตั้งค่าสำหรับ SA, JA, ABA และ OPDA: เส้นเลือดฝอยแรงดันไฟฟ้า 3000 V,
พลังงานกรวย 35V, RF Lens1 (20), RF Lens2 (0.3) แหล่งที่มาอุณหภูมิ 100? C,
อุณหภูมิ 380 de-solvation? C, กรวยก๊าซ 100 L H1
ก๊าซ de-solvation
70 L H1
ชน (50) และคูณ (650) พารามิเตอร์ MS / MS
มีประสิทธิภาพสูงสุดในการทดลองใช้ยาแต่ละ
โซลูชั่นมาตรฐาน SA, JA, ABA และ OPDA ที่มีความเข้มข้นของ
10 ngmL1 เจือจางในเฟสเคลื่อนที่ A / B (40:60, v / v) MS / MS
ไอออนสินค้าที่ผลิตโดยแยกออกจากการชนกันของการเปิดใช้งานของ
ไอออนสารตั้งต้นที่เลือกไว้ในมือถือการปะทะกันของมวล
สเปกโตรมิเตอร์และมวลได้รับการวิเคราะห์โดยใช้การวิเคราะห์ที่สอง
ของเครื่องดนตรี ปริมาณที่ได้ดำเนินการในหลาย
โหมดการตรวจสอบปฏิกิริยา (MRM).
2.2