The paper presents an PCR-RFLP-base

The paper presents an PCR-RFLP-based method to determine ABO blood groups at the genotype level. In order to ensure the applicability of the method to severely degraded DNA, new sets of primers were designed that amplify 103/104 bp and 64 bp sequences on exon 6 and exon 7 of chromosome 9, respectively. The amplification of the two PCR products and the subsequent RFLP analysis with four endonucleases was revealed to be an effective and reliable way to determine ABO bloodgroups at the genotype level, distinguishing the alleles A, B, O1, O1v, and O2. PCR analysis of severely degraded sample material may possibly require higher cycle numbers. Therefore, the experiments presented here including those on positive control samples, were carried out employing 45 amplification cycles in order to ensure the validity of the amplification and RFLP analysis. As positive controls, small amounts of modern intact DNA extracted from saliva samples of 12 individuals with known ABO phenotypes were used. The protocols for the ABO typing were then applied to ancient degraded DNA extracted from 15 archaeological bones and teeth about 250 and 3,000 years old, respectively. The results presented for the archaeological sample material are based on repeated analysis derived from two independently processed DNA extracts of each sample. Moreover, the authentification process for the results derived from the archaeological samples included repeated multiplex STR genotyping of the extracts, showing the genetic uniqueness of the extracts which is the strongest possible indicator for the authenticity of an unknown DNA sample. Additionally, it was possible to compare the STR typing results to those from previous studies using the same material. Both the ABO typing and the STR typing revealed fully reproducible results in all cases.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กระดาษที่มีการจัดวิธี PCR-RFLP ที่ใช้ในการตรวจสอบกลุ่มเลือด Abo ในระดับยีน เพื่อให้แน่ใจว่าการบังคับใช้วิธีการรุนแรง dna เสื่อมโทรมชุดใหม่ของไพรเมอร์ได้รับการออกแบบที่ขยาย 103/104 bp และ 64 bp ลำดับที่เอกซ์ซอนเอกซ์ซอน 6 และ 7 ของโครโมโซม 9 ตามลำดับการขยายของทั้งสองผลิตภัณฑ์พีซีอาร์และการวิเคราะห์ RFLP ต่อกับสี่ endonucleases เผยเป็นวิธีที่มีประสิทธิภาพและเชื่อถือได้เพื่อตรวจสอบ bloodgroups Abo ในระดับยีนเด่นอัลลีลข o1, o1v และ o2 pcr วิเคราะห์ตัวอย่างของวัสดุที่เสื่อมโทรมอย่างรุนแรงอาจจำเป็นต้องมีตัวเลขที่สูงขึ้นในรอบ ดังนั้นการทดลองที่นำเสนอนี้รวมถึงผู้ที่อยู่ในกลุ่มตัวอย่างควบคุมบวกได้ดำเนินการจ้างที่ 45 รอบการขยายเพื่อให้ความถูกต้องของการวิเคราะห์การขยายและ RFLP การควบคุมเชิงบวกเป็นจำนวนเงินขนาดเล็กของ dna ครบถ้วนทันสมัย​​สกัดจากตัวอย่างน้ำลายจาก 12 บุคคลที่มีที่รู้จักกัน Abo phenotypes ถูกนำมาใช้โปรโตคอลสำหรับการพิมพ์ Abo ที่ถูกนำไปใช้แล้ว dna เสื่อมโทรมโบราณที่สกัดจาก 15 กระดูกและฟันโบราณคดีประมาณ 250 และ 3,000 ปีตามลำดับ ผลที่นำเสนอสำหรับวัสดุตัวอย่างทางโบราณคดีอยู่บนพื้นฐานของการวิเคราะห์ซ้ำที่ได้มาจากสารสกัดจากสอง dna ดำเนินการเป็นอิสระของแต่ละตัวอย่าง ยิ่งไปกว่านั้นขั้นตอนการรับรองความถูกต้องเพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ได้จากตัวอย่างทางโบราณคดีรวมถึงซ้ำแล้วซ้ำอีกหลายที genotyping ของสารสกัดแสดงเอกลักษณ์ทางพันธุกรรมของสารสกัดซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ที่เป็นไปได้ที่แข็งแกร่งเพื่อความถูกต้องของตัวอย่างดีเอ็นเอที่ไม่รู้จัก นอกจากนี้มันเป็นไปได้ที่จะเปรียบเทียบผลการพิมพ์ทีให้ผู้ที่มาจากการศึกษาก่อนหน้าโดยใช้วัสดุเดียวกัน ทั้งการพิมพ์และการพิมพ์ Abo ทีเปิดเผยผลการทำซ้ำอย่างเต็มที่ในทุกกรณี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กระดาษแสดงวิธี PCR-RFLP ใช้เพื่อกำหนดกลุ่มเลือด ABO ในระดับลักษณะทางพันธุกรรม เพื่อให้แน่ใจว่า ความเกี่ยวข้องของของวิธีการดีเอ็นเอเสื่อมโทรมอย่างรุนแรง ชุดใหม่ของไพรเมอร์ถูกออกแบบที่ขยาย 103/104 bp และ 64 bp ลำดับ exon 6 และ exon 7 ของโครโมโซม 9 ตามลำดับ ขยายผลิตภัณฑ์ PCR 2 และการวิเคราะห์ RFLP ต่อ ด้วย endonucleases สี่ถูกเปิดเผยเป็น วิธีมีประสิทธิภาพ และเชื่อถือได้เพื่อกำหนด bloodgroups ABO ที่ระดับลักษณะทางพันธุกรรม แยก alleles A, B, O1, O1v และ O2 PCR วิเคราะห์วัสดุตัวอย่างเสื่อมโทรมอย่างรุนแรงอาจอาจต้องใช้ตัวเลขรอบสูง ดังนั้น ทดลองการนำเสนอที่นี่รวมทั้งผู้ควบคุมบวกตัวอย่าง ได้ดำเนินการใช้วงจรขยาย 45 เพื่อให้มีผลบังคับใช้ของการขยายและการวิเคราะห์ RFLP เป็นตัวควบคุมบวก มีใช้เงินดีเอ็นเอเหมือนเดิมที่ทันสมัยที่สกัดจากตัวอย่างน้ำลายของบุคคล 12 กับฟี ABO รู้จัก โปรโตคอลสำหรับ ABO พิมพ์ถูกแล้วประยุกต์ใช้ DNA เสื่อมโทรมโบราณสกัดจากกระดูกโบราณคดีและฟันเกี่ยวกับ 250 และ 3000 ปี 15 ตามลำดับ ผลการนำเสนอวัสดุอย่างโบราณคดีขึ้นอยู่กับการวิเคราะห์ซ้ำที่มาจากสารสกัดดีเอ็นเอสองดำเนินการโดยอิสระของแต่ละอย่าง นอกจากนี้ กระบวนการ authentification เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่ได้จากตัวอย่างทางโบราณคดีรวมซ้ำ multiplex STR genotyping สารสกัดจาก แสดงเอกลักษณ์ทางพันธุกรรมของสารสกัดซึ่งเป็นตัวบ่งชี้ได้แข็งแกร่งในความถูกต้องของตัวอย่างดีเอ็นเอไม่รู้จัก นอกจากนี้ สามารถเปรียบเทียบ STR ที่พิมพ์ผลลัพธ์จากการศึกษาก่อนหน้านี้โดยใช้วัสดุเดียวกับที่ได้ ABO ที่พิมพ์ทั้งพิมพ์ STR เปิดเผยผลการจำลองทั้งหมดในทุกกรณี

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กระดาษที่แสดงถึงวิธีการ pcr - rflp - ซึ่งใช้ในการตรวจสอบว่ากลุ่มเลือด abo ในระดับลักษณะสำคัญที่ ในการสั่งซื้อเพื่อตรวจสอบให้แน่ใจว่าการใช้ที่ของวิธีการที่จะดีเอ็นเอกลับลดลงอย่างรุนแรงของ primers ชุดใหม่ได้รับการออกแบบที่เพิ่ม BP 103/104 และ 64 ลำดับ BP บน exon exon 6 และ 7 ของโครโมโซม 9 ตามลำดับการขยายสัญญาณเสียงของ ผลิตภัณฑ์ ทั้งสอง pcr และการวิเคราะห์ rflp ตามมาด้วยสี่ endonucleases ได้รับการเปิดเผยเป็นแบบอย่างมี ประสิทธิภาพ และเชื่อถือได้ในการกำหนด bloodgroups abo ในระดับลักษณะสำคัญที่โดดเด่นที่ O 1 b alleles O 1 V และ O 2 การวิเคราะห์ pcr ของวัสดุเชื่อมต่อในตัวอย่าง ประสิทธิภาพ ลดลงอย่างรุนแรงอาจจำเป็นต้องมีหมายเลขวงจรสูงขึ้นอาจเป็นไปได้ ดังนั้นการทดลองที่ให้ไว้นี้รวมถึงผู้ที่อยู่ในตัวอย่างการควบคุมในเชิงบวกถูกหามออกมาออกมาใช้รอบ 45 การขยายสัญญาณเสียงในการสั่งซื้อเพื่อความมั่นใจความสมบูรณ์ของการวิเคราะห์ rflp และการขยายสัญญาณเสียง เป็นการควบคุมในเชิงบวกมากขนาดเล็กของดีเอ็นเอที่ทันสมัยอื่นๆไม่ว่าจะถูกดึงมาจากตัวอย่างน้ำลายของ 12 ผู้ใช้บริการแบบเฉพาะรายพร้อมด้วย phenotypes abo ที่รู้จักกันดีคือการใช้โปรโตคอลสำหรับการพิมพ์ abo ที่ถูกนำมาประยุกต์ใช้กับดีเอ็นเอลดโบราณถูกดึงมาจาก 15 กระดูกทางโบราณคดีและฟันประมาณ 250 และ 3 , 000 ปีตามลำดับแล้ว ผลที่ได้รับเอกสารตัวอย่างทางโบราณคดีที่มีพื้นฐานอยู่บนการวิเคราะห์ซ้ำที่ได้รับมาจากทั้งสองได้อย่างเป็นอิสระดำเนินการสกัดดีเอ็นเอจากตัวอย่างของแต่ละคน ยิ่งไปกว่านั้นขั้นตอนการตรวจสอบสำหรับผลการที่ได้มาจากตัวอย่างสถานที่ทางโบราณคดีที่มีอยู่ genotyping STR แบบมัลติเพล็กซ์ของสารสกัดจากสาหร่ายซ้ำแล้วซ้ำอีกที่แสดงความเป็นเอกลักษณ์ทางพันธุกรรมของสารสกัดจากสาหร่ายที่มีสัญลักษณ์แสดงเป็นไปได้มากที่สุดสำหรับ ผลิตภัณฑ์ ของแท้( Certificate of Authenticity ของตัวอย่างดีเอ็นเอที่ไม่รู้จัก นอกเหนือจากนี้มันเป็นเรื่องที่เป็นไปได้เพื่อทำการเปรียบเทียบผลการพิมพ์ STR ได้ให้กับผู้ที่จากการศึกษาครั้งก่อนการใช้วัสดุเดียวกัน การพิมพ์ abo และพิมพ์ STR ได้ให้ทั้งสองได้เปิดเผยผลการเกิดขึ้นซ้ำเดิมได้อย่างเต็มที่ในทุกกรณี