- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
ABTRACTTwo extraction methods, solv
ABTRACT
Two extraction methods, solvent extraction and solid phase extraction using Amberlite XAD-2
resin, were used to extract free and glycosidically-bound volatile compounds of fresh kaffir lime
leaves. The better result was obtained with solvent extraction method. Fifty-four free and thirty-nine
glycosidically-bound volatile compounds were obtained by solvent extraction method and their odor
descriptions related to kaffir lime leaf odors. For XAD-2 resin, fifty free and ten glycosidically-bound
volatile compounds were obtained but most of them did not relate to volatile compounds in kaffir lime
leaves. Most of free and glycosidically-bound volatile compounds extracted with XAD-2 resin had
lower concentration than those extracted with solvent extraction, especially the compounds that gave
kaffir lime leaf characteristic odor such as citronellal, β-citronellol, trans-geraniol, and
trans-β-caryophyllene.
Keywords: solvent extraction, XAD-2 resin, free and glycosidically-bound volatile compound, kaffir lime leaves
E-mail address: g4870038@ku.ac.th
INTRODUCTON
The kaffir lime (Citrus hystrix D.C., Rutaceae) is a Southeast Asian citrus plant with very
strong fragrance. Free volatile compounds in kaffir lime leaf oil distillated by steam have been
reported. Citronellal is the main volatile compound found in essential oil of kaffir lime leave. The other
volatile compounds found in kaffir lime leaf oil were α-pinene, camphene, β-pinene, sabinene,
myrcene limonene, trans-ocimene, γ-terpinene, ρ-cymene, terpinolene, copaene, linalool,
β-cubebene, isopulegol, caryophyllene, citronelly acetate, citronellol, geranyl acetate, δ-cadinene
(Lawrence et al., 1971). Glycosidically-bound volatile compounds of fresh kaffir lime leaves have not
1 ภาควิชาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีการอาหาร คณะอุตสาหกรรมเกษตร มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ กรุงเทพฯ 10900
1Department of Food Science and Technology, Faculty of Agro-Industry, Kasetsart University, Bangkok 10900
been studied to date, even if they are the potential precursors of the volatile compounds in many
plants. The glycosidically-bound volatile compounds are composed of two parts, aglycone and
glycone. The anomeric hydroxyl group of sugar (glycone) is linked to volatile compound (aglycone)
via glycosidic linkage (Chyau et al., 2003).
Solvent extraction is one of the simplest approaches for aroma isolation. This method gives a
board range for isolation of volatile compounds, but it consumes large volume of solvent. Solvent
extraction is the most useful method for non-lipid food. In the case of food containing lipid, the extract
will be re-extracted under high vacuum condition to separate lipid phase (Reineccius, 2006).
Solid phase extraction is a convenient and popular method. Solid phase, like Amberlite
XAD-2 resin, is often used for volatile compounds isolation. XAD-2 resin is hydrophobic crosslinked
polystyrene copolymer resin. Free and glycosidically-bound volatile compounds released from XAD-2
resin are fractionated by different polarity-solvents.
The aim of this study was to compare two isolation methods, solvent extraction and solid
phase extraction using XAD-2 resin, for free and glycosidically-bound volatile compounds of fresh
kaffir lime leaves.
MATERIALS AND METHODS
Materials
Kaffir lime leaves were purchased from a local market in Bangkok. They were cleaned with
distilled water, swiped to dry, and trimmed by cutting out the midrib of leaves with a scissor.
Reagents
The HPLC grade solvents and phosphate buffer were purchased from Lab-scan (Ireland).
Sodium chloride and anhydrous sodium sulfate were purchased from Fisher chemical (England).
Internal standards (tert-butyl benzene and 2-undecanol), n-alkanes (hydrocarbons, C4-C22) and resin
(Amberlite XAD-2) were purchased from Sigma Aldrich (USA).
Isolation/extraction
Solvent extraction
A 20 g of kaffir lime leaves was blended with 200 ml of liquid nitrogen and a 20 g NaCl in a
Waring blender for 20 s. The blend was extracted two times with 80 ml of dichloromethane and two
times with 80 ml of pentane, respectively, to isolate free volatile compound. The free volatile
compound extract was added with 50 μL of internal standard (tert-butyl benzene and 2-undecanol).
The mixture was concentrated to 50 ml under the steam of N2 before distillation under 10-5 torr at room
temperature for 2 h. Then, the extract was dried over with 2 g of Na2SO4 and purged to 1 ml with N2.
For glycosidically-bound fraction, the blend was re-extracted three times with 80 ml of methanol.
Solid phase extraction: Amberlite XAD-2 resin (modified from Chyau et al., 2003)
A 20 g of kaffir lime leaves was blended with 200 ml of liquid nitrogen in a Waring blender for
20 s. The blend was homogenized with NaCl solution for 5 min and then centrifuged at 6,430 g, 4OC
for 30 min. Methanol and deionized (DI) water was used for preconditioning XAD-2. The clear solution
was loaded pass through XAD-2 column at a flow rate of 2.2 ml/min. DI water was loaded to eliminate
sugars, acids and other water dissolved compounds. A 100 ml mixture of pentane/dichloromethane
(1:1) was loaded through the column to elute free volatile compounds. After that, a 100 ml methanol
was loaded through the column to elute glycosidically-bound volatile compounds. The free volatile
compound extract was then added with 50 μL of internal standard and concentrated to 50 ml under
the gentle steam of N2 before high vacuum distillation as mentioned above.
Acid hydrolysis (modified from Cai et al., 2002)
The methanol extracts were concentrated and dried using a rotary evaporator at 50OC and
252 torr. Subsequently, the fractions of glycosidically bound volatile compounds were re-dissolved in
a mixture of 100 ml DI water and 100 ml of phosphate buffer (pH 3.5). The mixtures were hydrolyzed
at 50OC for 2.5 h. The aglycones released from acid hydrolysis were extracted three times with 50 ml
of pentane/dichloromethane (1:1) to remove aglycones and a 50 μl of internal standard was added
before high vacuum distillation as mentioned before.
GC-MS and GC-FID analysis
The concentrated extract of 1 μL was analyzed on a Hewlett-Packard model HP 6890 GC
equipped with a mass selective detector model HP 5973. Capillary column, HP-5 (60 m length,
0.25 mm ID and 0.25 μm film thickness) was used and the carrier gas was helium with a flow rate of
2.2 ml/min. The injector was operated in a split mode (50:1). The oven temperature was initiated at
35OC for 1 min, raised at a rate of 10OC/min to 200 OC, and held at this temperature for 10 min. The
identity of volatile compounds and their relative index (RI) were done by comparing mass spectrum
with Wiley 275 library, NIST 98 library and n-alkanes (C4-C22) retention index.
The free and aglycone concentrated extracts were analyzed on a Hewlett-Packard model HP
6890N GC equipped with FID. Capillary column, HP-5 (30 m length, 0.25 mm ID and 0.25 μm film
thickness) was used and the same conditions as using in GC-MS. The relative concentration of
compounds was calculated by comparing peak areas with internal standard (tert-butyl benzene for
monoterpene and 2-undecanol for l-linalool).
RESULTS AND DISCUSSION
1. Free volatile compounds
Solvent extraction is a method in which a sample directly contact with a solvent. The board
range of volatile compounds was isolated as shown in Table 1. Fifty-four free volatile compounds
were identified as aldehydes (74.8%), hydrocarbons (12.2%), alcohols (6.4%), and esters (2.7%)
being the major components in fresh kaffir lime leaves. Citronellal (74.8%) was the most abundant
compound as in the kaffir lime leaf oil extracted by steam distillation and some compounds also have
been reported (Lawrence et al., 1971). Solvent extracted free volatile compounds had kaffir lime leaf
odor such as l-limonene, l-linalool and β-citronellol that have orange and citrus note.
For solid phase extraction using XAD-2 resin, the identity of free volatile compounds was
shown in Table 2. Fifty free volatile compounds were identified as hydrocarbons (90.4%), aldehydes
(8.2%), alcohols (1.3%) and ester (0.1%). The abundant compounds were 1-methyl-2-
phenylcyclopropane (48.6%) and 4-ethenyl-1,2-dimethylbenzene (22.4%). Free volatile compounds
extracted by XAD-2 resin did not show the odor characteristic of kaffir lime leaves and most of them
were benzyl compounds that showed the affinity of XAD-2 resin to benzyl compounds as found in the
grape isolating by Amberlite XAD-2 (Ibarz et al., 2006). Some compounds that had been reported in
kaffir lime leaf oil were not found in XAD-2 method such as α-pinene, β-pinene, sabinene, myrcene,
limonene, l-linalool, and citronellyl acetate.
Free volatile compounds found in both solvent extraction and XAD-2 resin methods were
shown in Fig.1. Most concentrations of XAD-2 extracted compounds were lower than those of solvent
extracts, except for 1-penten-3-ol, trans-2-hexanal, and geranial. The concentrations of free volatile
compounds that gave the kaffir lime leaf characteristic odor such as citronellal, β-citronellol, transgeraniol,
and trans-β-caryophyllene, extracted by XAD-2 resin were lower than those obtained by
solvent extraction.
2. Glycosidically-bound volatile compounds
For solvent extraction method, thirty-nine compounds were identified as alcohols (45.3%),
aldehydes (33.9%), hydrocarbons (10.5%), and esters (7.8%) (Table 1). Citronellal was the most
abundant compound as a free form. 2-(2-hydroxyl-2-propyl)-5-m-cyclohexanol and α-terpinene-4-ol
were the compounds found only in glycosidically-bound form of solvent extraction method and were
not found in XAD-2 resin method. Therefore, these two compounds could be formed during acid
hydrolysis. The chemical reactions involved in these formations were the formation of terpene alcohol
by acid catalyzed rearrangement of polyol and the oxidation of hydrocarbon terpene resulting in the
Two extraction methods, solvent extraction and solid phase extraction using Amberlite XAD-2
resin, were used to extract free and glycosidically-bound volatile compounds of fresh kaffir lime
leaves. The better result was obtained with solvent extraction method. Fifty-four free and thirty-nine
glycosidically-bound volatile compounds were obtained by solvent extraction method and their odor
descriptions related to kaffir lime leaf odors. For XAD-2 resin, fifty free and ten glycosidically-bound
volatile compounds were obtained but most of them did not relate to volatile compounds in kaffir lime
leaves. Most of free and glycosidically-bound volatile compounds extracted with XAD-2 resin had
lower concentration than those extracted with solvent extraction, especially the compounds that gave
kaffir lime leaf characteristic odor such as citronellal, β-citronellol, trans-geraniol, and
trans-β-caryophyllene.
Keywords: solvent extraction, XAD-2 resin, free and glycosidically-bound volatile compound, kaffir lime leaves
E-mail address: g4870038@ku.ac.th
INTRODUCTON
The kaffir lime (Citrus hystrix D.C., Rutaceae) is a Southeast Asian citrus plant with very
strong fragrance. Free volatile compounds in kaffir lime leaf oil distillated by steam have been
reported. Citronellal is the main volatile compound found in essential oil of kaffir lime leave. The other
volatile compounds found in kaffir lime leaf oil were α-pinene, camphene, β-pinene, sabinene,
myrcene limonene, trans-ocimene, γ-terpinene, ρ-cymene, terpinolene, copaene, linalool,
β-cubebene, isopulegol, caryophyllene, citronelly acetate, citronellol, geranyl acetate, δ-cadinene
(Lawrence et al., 1971). Glycosidically-bound volatile compounds of fresh kaffir lime leaves have not
1 ภาควิชาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีการอาหาร คณะอุตสาหกรรมเกษตร มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ กรุงเทพฯ 10900
1Department of Food Science and Technology, Faculty of Agro-Industry, Kasetsart University, Bangkok 10900
been studied to date, even if they are the potential precursors of the volatile compounds in many
plants. The glycosidically-bound volatile compounds are composed of two parts, aglycone and
glycone. The anomeric hydroxyl group of sugar (glycone) is linked to volatile compound (aglycone)
via glycosidic linkage (Chyau et al., 2003).
Solvent extraction is one of the simplest approaches for aroma isolation. This method gives a
board range for isolation of volatile compounds, but it consumes large volume of solvent. Solvent
extraction is the most useful method for non-lipid food. In the case of food containing lipid, the extract
will be re-extracted under high vacuum condition to separate lipid phase (Reineccius, 2006).
Solid phase extraction is a convenient and popular method. Solid phase, like Amberlite
XAD-2 resin, is often used for volatile compounds isolation. XAD-2 resin is hydrophobic crosslinked
polystyrene copolymer resin. Free and glycosidically-bound volatile compounds released from XAD-2
resin are fractionated by different polarity-solvents.
The aim of this study was to compare two isolation methods, solvent extraction and solid
phase extraction using XAD-2 resin, for free and glycosidically-bound volatile compounds of fresh
kaffir lime leaves.
MATERIALS AND METHODS
Materials
Kaffir lime leaves were purchased from a local market in Bangkok. They were cleaned with
distilled water, swiped to dry, and trimmed by cutting out the midrib of leaves with a scissor.
Reagents
The HPLC grade solvents and phosphate buffer were purchased from Lab-scan (Ireland).
Sodium chloride and anhydrous sodium sulfate were purchased from Fisher chemical (England).
Internal standards (tert-butyl benzene and 2-undecanol), n-alkanes (hydrocarbons, C4-C22) and resin
(Amberlite XAD-2) were purchased from Sigma Aldrich (USA).
Isolation/extraction
Solvent extraction
A 20 g of kaffir lime leaves was blended with 200 ml of liquid nitrogen and a 20 g NaCl in a
Waring blender for 20 s. The blend was extracted two times with 80 ml of dichloromethane and two
times with 80 ml of pentane, respectively, to isolate free volatile compound. The free volatile
compound extract was added with 50 μL of internal standard (tert-butyl benzene and 2-undecanol).
The mixture was concentrated to 50 ml under the steam of N2 before distillation under 10-5 torr at room
temperature for 2 h. Then, the extract was dried over with 2 g of Na2SO4 and purged to 1 ml with N2.
For glycosidically-bound fraction, the blend was re-extracted three times with 80 ml of methanol.
Solid phase extraction: Amberlite XAD-2 resin (modified from Chyau et al., 2003)
A 20 g of kaffir lime leaves was blended with 200 ml of liquid nitrogen in a Waring blender for
20 s. The blend was homogenized with NaCl solution for 5 min and then centrifuged at 6,430 g, 4OC
for 30 min. Methanol and deionized (DI) water was used for preconditioning XAD-2. The clear solution
was loaded pass through XAD-2 column at a flow rate of 2.2 ml/min. DI water was loaded to eliminate
sugars, acids and other water dissolved compounds. A 100 ml mixture of pentane/dichloromethane
(1:1) was loaded through the column to elute free volatile compounds. After that, a 100 ml methanol
was loaded through the column to elute glycosidically-bound volatile compounds. The free volatile
compound extract was then added with 50 μL of internal standard and concentrated to 50 ml under
the gentle steam of N2 before high vacuum distillation as mentioned above.
Acid hydrolysis (modified from Cai et al., 2002)
The methanol extracts were concentrated and dried using a rotary evaporator at 50OC and
252 torr. Subsequently, the fractions of glycosidically bound volatile compounds were re-dissolved in
a mixture of 100 ml DI water and 100 ml of phosphate buffer (pH 3.5). The mixtures were hydrolyzed
at 50OC for 2.5 h. The aglycones released from acid hydrolysis were extracted three times with 50 ml
of pentane/dichloromethane (1:1) to remove aglycones and a 50 μl of internal standard was added
before high vacuum distillation as mentioned before.
GC-MS and GC-FID analysis
The concentrated extract of 1 μL was analyzed on a Hewlett-Packard model HP 6890 GC
equipped with a mass selective detector model HP 5973. Capillary column, HP-5 (60 m length,
0.25 mm ID and 0.25 μm film thickness) was used and the carrier gas was helium with a flow rate of
2.2 ml/min. The injector was operated in a split mode (50:1). The oven temperature was initiated at
35OC for 1 min, raised at a rate of 10OC/min to 200 OC, and held at this temperature for 10 min. The
identity of volatile compounds and their relative index (RI) were done by comparing mass spectrum
with Wiley 275 library, NIST 98 library and n-alkanes (C4-C22) retention index.
The free and aglycone concentrated extracts were analyzed on a Hewlett-Packard model HP
6890N GC equipped with FID. Capillary column, HP-5 (30 m length, 0.25 mm ID and 0.25 μm film
thickness) was used and the same conditions as using in GC-MS. The relative concentration of
compounds was calculated by comparing peak areas with internal standard (tert-butyl benzene for
monoterpene and 2-undecanol for l-linalool).
RESULTS AND DISCUSSION
1. Free volatile compounds
Solvent extraction is a method in which a sample directly contact with a solvent. The board
range of volatile compounds was isolated as shown in Table 1. Fifty-four free volatile compounds
were identified as aldehydes (74.8%), hydrocarbons (12.2%), alcohols (6.4%), and esters (2.7%)
being the major components in fresh kaffir lime leaves. Citronellal (74.8%) was the most abundant
compound as in the kaffir lime leaf oil extracted by steam distillation and some compounds also have
been reported (Lawrence et al., 1971). Solvent extracted free volatile compounds had kaffir lime leaf
odor such as l-limonene, l-linalool and β-citronellol that have orange and citrus note.
For solid phase extraction using XAD-2 resin, the identity of free volatile compounds was
shown in Table 2. Fifty free volatile compounds were identified as hydrocarbons (90.4%), aldehydes
(8.2%), alcohols (1.3%) and ester (0.1%). The abundant compounds were 1-methyl-2-
phenylcyclopropane (48.6%) and 4-ethenyl-1,2-dimethylbenzene (22.4%). Free volatile compounds
extracted by XAD-2 resin did not show the odor characteristic of kaffir lime leaves and most of them
were benzyl compounds that showed the affinity of XAD-2 resin to benzyl compounds as found in the
grape isolating by Amberlite XAD-2 (Ibarz et al., 2006). Some compounds that had been reported in
kaffir lime leaf oil were not found in XAD-2 method such as α-pinene, β-pinene, sabinene, myrcene,
limonene, l-linalool, and citronellyl acetate.
Free volatile compounds found in both solvent extraction and XAD-2 resin methods were
shown in Fig.1. Most concentrations of XAD-2 extracted compounds were lower than those of solvent
extracts, except for 1-penten-3-ol, trans-2-hexanal, and geranial. The concentrations of free volatile
compounds that gave the kaffir lime leaf characteristic odor such as citronellal, β-citronellol, transgeraniol,
and trans-β-caryophyllene, extracted by XAD-2 resin were lower than those obtained by
solvent extraction.
2. Glycosidically-bound volatile compounds
For solvent extraction method, thirty-nine compounds were identified as alcohols (45.3%),
aldehydes (33.9%), hydrocarbons (10.5%), and esters (7.8%) (Table 1). Citronellal was the most
abundant compound as a free form. 2-(2-hydroxyl-2-propyl)-5-m-cyclohexanol and α-terpinene-4-ol
were the compounds found only in glycosidically-bound form of solvent extraction method and were
not found in XAD-2 resin method. Therefore, these two compounds could be formed during acid
hydrolysis. The chemical reactions involved in these formations were the formation of terpene alcohol
by acid catalyzed rearrangement of polyol and the oxidation of hydrocarbon terpene resulting in the
0/5000
ABTRACTวิธีแยก 2 แยกตัวทำละลาย และแยกเฟสของแข็งใช้ Amberlite XAD-2resin ใช้ในการแยกสารประกอบระเหยฟรี และผูก กับ glycosidically ของมะกรูดสดใบไม้ ผลดีกล่าว ด้วยวิธีการแยกตัวทำละลาย ห้าสิบสี่ฟรีและสามสิบเก้าสารระเหย glycosidically ผูกได้รับมา โดยวิธีการแยกตัวทำละลายและกลิ่นของพวกเขาคำอธิบายที่เกี่ยวข้องกับกลิ่นใบมะนาวมะกรูด ยาง XAD-2 ฟรีห้าสิบ และสิบ glycosidically ผูกได้รับสารระเหย แต่ส่วนใหญ่จะได้ไม่เกี่ยวข้องกับสารระเหยในมะกรูดใบไม้ มีทั้งฟรี และผูก กับ glycosidically ระเหยสารสกัด ด้วยเรซิน XAD-2ความเข้มข้นต่ำกว่าสกัด ด้วยตัวทำละลายสกัด โดยเฉพาะอย่างยิ่งสารที่ให้มะกรูดมะนาวใบลักษณะกลิ่นเช่นβ-citronellol, citronellal ทรานส์-geraniol และทรานส์-β-caryophylleneคำสำคัญ: ตัวทำละลายสกัด เรซิน XAD-2 ฟรี และผูกกับ glycosidically สารประกอบระเหย ใบมะกรูดที่อยู่อีเมล: g4870038@ku.ac.thINTRODUCTONมะกรูด (ส้มดีซี วงศ์ส้ม hystrix ใช้ผสม)เป็นพืชส้มเอเชียตะวันออกเฉียงใต้มีมากกลิ่นแรง ฟรีใบน้ำมันมะกรูด distillated โดยไอระเหยสารได้รายงาน Citronellal เป็นสารประกอบระเหยหลักที่พบในน้ำมันหอมระเหยมะกรูดมะนาวลา อื่น ๆสารระเหยที่พบในน้ำมันใบมะกรูดได้ด้วยกองทัพ-pinene, camphene β-pinene, sabinenemyrcene limonene ทรานส์ ocimene γ-terpinene ρ cymene, terpinolene, copaene, linaloolΒ-cubebene, isopulegol, caryophyllene, citronelly acetate, citronellol, geranyl acetate δ-cadinene(Lawrence et al., 1971) สารระเหย glycosidically ผูกสดหมกไม่ได้1 ภาควิชาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีการอาหารคณะอุตสาหกรรมเกษตรมหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์กรุงเทพฯ 109001Department วิทยาศาสตร์การอาหารและเทคโนโลยี คณะเกษตร มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ กรุงเทพมหานคร 10900การศึกษาวันที่ แม้ว่าพวกเขาจะ precursors ศักยภาพของสารระเหยในรดน้ำต้นไม้ สารระเหยผูกกับ glycosidically จะประกอบด้วยสองส่วน aglycone และglycone กลุ่มไฮดรอกซิล anomeric น้ำตาล (glycone) กับสารประกอบระเหย (aglycone)ผ่าน glycosidic เชื่อมโยง (Chyau et al., 2003)ตัวทำละลายสกัดเป็นหนึ่งในวิธีที่ง่ายที่สุดสำหรับแยกกลิ่นหอม วิธีนี้ทำให้การช่วงคณะสำหรับแยกสารระเหย แต่ใช้ตัวทำละลายปริมาณมาก ตัวทำละลายแยกเป็นวิธีมีประโยชน์มากที่สุดสำหรับอาหารไม่มีไขมัน ในกรณีของอาหารที่ประกอบด้วยไขมัน การดึงข้อมูลจะมีใหม่สกัดภายใต้สภาพสุญญากาศสูงเพื่อแยกไขมันระยะ (Reineccius, 2006)เฟสของแข็งแยกเป็นวิธีสะดวก และเป็นที่นิยม เฟสของแข็ง เช่น Amberliteมักใช้เรซิน XAD-2 การแยกสารที่ระเหย ยาง XAD 2 เป็น hydrophobic crosslinkedโคพอลิเมอร์โฟมยาง ฟรี และผูกกับ glycosidically สารประกอบระเหยออกจาก XAD-2ยางจะแบ่ง โดยต่างขั้วหรือสารทำละลายจุดมุ่งหมายของการศึกษานี้เป็นการ เปรียบเทียบวิธีแยก 2 แยกตัวทำละลาย และของแข็งขั้นตอนการสกัดโดยใช้เรซิน XAD-2 ฟรีและผูกกับ glycosidically สารระเหยของสดใบมะกรูดวัสดุและวิธีการวัสดุหมกอยู่ซื้อจากตลาดในกรุงเทพมหานคร พวกเขามีความสะอาดด้วยน้ำกลั่น รูดแห้ง และตัด โดยตัดออก midrib ของใบไม้กับสุนัขตัวนั้นReagentsHPLC เกรดหรือสารทำละลายและฟอสเฟตบัฟเฟอร์ถูกซื้อจากแล็บสแกน (ไอร์แลนด์)โซเดียมคลอไรด์และโซเดียมซัลเฟตไดถูกซื้อจากเคมีฟิชเชอร์ (อังกฤษ)ภายในมาตรฐาน (เบนซีน tert ด...และ 2-undecanol) n-alkanes (ไฮโดรคาร์บอน C4 C22) และเรซิน(Amberlite XAD-2) ซื้อจากซิก Aldrich (สหรัฐอเมริกา)แยก/สกัดแยกตัวทำละลายG 20 หมกถูกผสมกับ 200 ml ของไนโตรเจนเหลวและ 20 g NaCl ในตัวWaring blender สำหรับ 20 s ผสมที่แยกสองครั้งกับ 80 ml ของ dichloromethane และสองเท่ากับ 80 ml ของ pentane ตามลำดับ เพื่อแยกสารประกอบระเหยฟรี หอมระเหยฟรีเพิ่มสารสกัดที่ผสมกับ μL 50 ภายในมาตรฐาน (เบนซีน tert ด...และ 2-undecanol)The mixture was concentrated to 50 ml under the steam of N2 before distillation under 10-5 torr at roomtemperature for 2 h. Then, the extract was dried over with 2 g of Na2SO4 and purged to 1 ml with N2.For glycosidically-bound fraction, the blend was re-extracted three times with 80 ml of methanol.Solid phase extraction: Amberlite XAD-2 resin (modified from Chyau et al., 2003)A 20 g of kaffir lime leaves was blended with 200 ml of liquid nitrogen in a Waring blender for20 s. The blend was homogenized with NaCl solution for 5 min and then centrifuged at 6,430 g, 4OCfor 30 min. Methanol and deionized (DI) water was used for preconditioning XAD-2. The clear solutionwas loaded pass through XAD-2 column at a flow rate of 2.2 ml/min. DI water was loaded to eliminatesugars, acids and other water dissolved compounds. A 100 ml mixture of pentane/dichloromethane(1:1) was loaded through the column to elute free volatile compounds. After that, a 100 ml methanolwas loaded through the column to elute glycosidically-bound volatile compounds. The free volatilecompound extract was then added with 50 μL of internal standard and concentrated to 50 ml underthe gentle steam of N2 before high vacuum distillation as mentioned above.Acid hydrolysis (modified from Cai et al., 2002)The methanol extracts were concentrated and dried using a rotary evaporator at 50OC and252 torr. Subsequently, the fractions of glycosidically bound volatile compounds were re-dissolved ina mixture of 100 ml DI water and 100 ml of phosphate buffer (pH 3.5). The mixtures were hydrolyzedat 50OC for 2.5 h. The aglycones released from acid hydrolysis were extracted three times with 50 mlof pentane/dichloromethane (1:1) to remove aglycones and a 50 μl of internal standard was addedbefore high vacuum distillation as mentioned before.GC-MS and GC-FID analysisThe concentrated extract of 1 μL was analyzed on a Hewlett-Packard model HP 6890 GCequipped with a mass selective detector model HP 5973. Capillary column, HP-5 (60 m length,0.25 mm ID and 0.25 μm film thickness) was used and the carrier gas was helium with a flow rate of2.2 ml/min. The injector was operated in a split mode (50:1). The oven temperature was initiated at35OC for 1 min, raised at a rate of 10OC/min to 200 OC, and held at this temperature for 10 min. Theidentity of volatile compounds and their relative index (RI) were done by comparing mass spectrumwith Wiley 275 library, NIST 98 library and n-alkanes (C4-C22) retention index.The free and aglycone concentrated extracts were analyzed on a Hewlett-Packard model HP6890N GC equipped with FID. Capillary column, HP-5 (30 m length, 0.25 mm ID and 0.25 μm filmthickness) was used and the same conditions as using in GC-MS. The relative concentration ofcompounds was calculated by comparing peak areas with internal standard (tert-butyl benzene formonoterpene and 2-undecanol for l-linalool).RESULTS AND DISCUSSION1. Free volatile compoundsSolvent extraction is a method in which a sample directly contact with a solvent. The boardrange of volatile compounds was isolated as shown in Table 1. Fifty-four free volatile compoundswere identified as aldehydes (74.8%), hydrocarbons (12.2%), alcohols (6.4%), and esters (2.7%)being the major components in fresh kaffir lime leaves. Citronellal (74.8%) was the most abundantcompound as in the kaffir lime leaf oil extracted by steam distillation and some compounds also havebeen reported (Lawrence et al., 1971). Solvent extracted free volatile compounds had kaffir lime leafodor such as l-limonene, l-linalool and β-citronellol that have orange and citrus note.For solid phase extraction using XAD-2 resin, the identity of free volatile compounds wasshown in Table 2. Fifty free volatile compounds were identified as hydrocarbons (90.4%), aldehydes(8.2%), alcohols (1.3%) and ester (0.1%). The abundant compounds were 1-methyl-2-phenylcyclopropane (48.6%) and 4-ethenyl-1,2-dimethylbenzene (22.4%). Free volatile compoundsextracted by XAD-2 resin did not show the odor characteristic of kaffir lime leaves and most of themwere benzyl compounds that showed the affinity of XAD-2 resin to benzyl compounds as found in thegrape isolating by Amberlite XAD-2 (Ibarz et al., 2006). Some compounds that had been reported inkaffir lime leaf oil were not found in XAD-2 method such as α-pinene, β-pinene, sabinene, myrcene,limonene, l-linalool, and citronellyl acetate.
Free volatile compounds found in both solvent extraction and XAD-2 resin methods were
shown in Fig.1. Most concentrations of XAD-2 extracted compounds were lower than those of solvent
extracts, except for 1-penten-3-ol, trans-2-hexanal, and geranial. The concentrations of free volatile
compounds that gave the kaffir lime leaf characteristic odor such as citronellal, β-citronellol, transgeraniol,
and trans-β-caryophyllene, extracted by XAD-2 resin were lower than those obtained by
solvent extraction.
2. Glycosidically-bound volatile compounds
For solvent extraction method, thirty-nine compounds were identified as alcohols (45.3%),
aldehydes (33.9%), hydrocarbons (10.5%), and esters (7.8%) (Table 1). Citronellal was the most
abundant compound as a free form. 2-(2-hydroxyl-2-propyl)-5-m-cyclohexanol and α-terpinene-4-ol
were the compounds found only in glycosidically-bound form of solvent extraction method and were
not found in XAD-2 resin method. Therefore, these two compounds could be formed during acid
hydrolysis. The chemical reactions involved in these formations were the formation of terpene alcohol
by acid catalyzed rearrangement of polyol and the oxidation of hydrocarbon terpene resulting in the
Free volatile compounds found in both solvent extraction and XAD-2 resin methods were
shown in Fig.1. Most concentrations of XAD-2 extracted compounds were lower than those of solvent
extracts, except for 1-penten-3-ol, trans-2-hexanal, and geranial. The concentrations of free volatile
compounds that gave the kaffir lime leaf characteristic odor such as citronellal, β-citronellol, transgeraniol,
and trans-β-caryophyllene, extracted by XAD-2 resin were lower than those obtained by
solvent extraction.
2. Glycosidically-bound volatile compounds
For solvent extraction method, thirty-nine compounds were identified as alcohols (45.3%),
aldehydes (33.9%), hydrocarbons (10.5%), and esters (7.8%) (Table 1). Citronellal was the most
abundant compound as a free form. 2-(2-hydroxyl-2-propyl)-5-m-cyclohexanol and α-terpinene-4-ol
were the compounds found only in glycosidically-bound form of solvent extraction method and were
not found in XAD-2 resin method. Therefore, these two compounds could be formed during acid
hydrolysis. The chemical reactions involved in these formations were the formation of terpene alcohol
by acid catalyzed rearrangement of polyol and the oxidation of hydrocarbon terpene resulting in the
การแปล กรุณารอสักครู่..
ABTRACT
วิธีการสกัดสองสกัดและการสกัดของแข็ง Amberlite XAD ใช้-2
เม็ดถูกนำมาใช้เพื่อดึงฟรีและ glycosidically
ผูกพันสารระเหยของมะกรูดสดใบ ผลที่ดีขึ้นได้ด้วยวิธีการสกัดด้วยตัวทำละลาย ห้าสิบสี่ฟรีและสามสิบเก้า
glycosidically
ผูกพันสารระเหยที่ได้รับโดยวิธีการสกัดด้วยตัวทำละลายและกลิ่นของพวกเขารายละเอียดที่เกี่ยวข้องกับกลิ่นใบมะกรูด สำหรับเรซิน XAD-2, ห้าสิบฟรีและสิบ glycosidically
ผูกพันสารระเหยที่ได้รับแต่ส่วนใหญ่ของพวกเขาไม่ได้เกี่ยวข้องกับสารระเหยในมะกรูดใบ
ส่วนใหญ่ของฟรีและ glycosidically ผูกพันสารระเหยที่สกัดด้วยเรซิน XAD-2
มีความเข้มข้นต่ำกว่าที่สกัดด้วยตัวทำละลายในการสกัดโดยเฉพาะอย่างยิ่งสารที่ให้กลิ่นลักษณะใบมะกรูดเช่น
citronellal, β-citronellol, ทรานส์ geraniol และทรานส์ . β-caryophyllene คำสำคัญ: การสกัดด้วยตัวทำละลาย, XAD-2 ยางฟรีและสารประกอบ glycosidically ที่ถูกผูกไว้ระเหยใบมะกรูดที่อยู่E-mail: g4870038@ku.ac.th introducton มะนาวมะกรูด (Citrus hystrix DC, Rutaceae) เป็น พืชส้มเอเชียตะวันออกเฉียงใต้ที่มีมากกลิ่นหอมที่แข็งแกร่ง สารระเหยฟรีในน้ำมันใบมะกรูดอบไอน้ำกลั่นโดยได้รับรายงาน citronellal เป็นสารระเหยหลักที่พบในน้ำมันหอมระเหยจากใบมะกรูด อีกสารระเหยที่พบในน้ำมันใบมะกรูดเป็นα-pinene, camphene, β-pinene, sabinene, limonene myrcene, ทรานส์ ocimene, γ-terpinene, ρ-cymene, terpinolene, copaene, linalool, β-cubebene, isopulegol, caryophyllene น้ำนม citronelly, citronellol น้ำนม geranyl, δ-cadinene (อเรนซ์ et al., 1971) Glycosidically ผูกพันสารระเหยของใบมะกรูดสดยังไม่ได้1 คณะอุตสาหกรรมเกษตรมหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์กรุงเทพฯ 10900 1 ภาควิชาวิทยาศาสตร์การอาหารและเทคโนโลยี, คณะอุตสาหกรรมเกษตรมหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์กรุงเทพฯ 10900 ได้รับการศึกษาในวันที่แม้ว่าพวกเขาจะสารตั้งต้นที่มีศักยภาพของสารระเหยในหลายพืช สารระเหย glycosidically ที่ถูกผูกไว้จะประกอบด้วยสองส่วน aglycone และglycone กลุ่มไฮดรอกซิ anomeric น้ำตาล (glycone) จะเชื่อมโยงกับสารระเหย (aglycone) ผ่านการเชื่อมโยง glycosidic (Chyau et al., 2003). การสกัดตัวทำละลายเป็นหนึ่งในวิธีที่ง่ายที่สุดในการแยกกลิ่นหอม วิธีการนี้จะช่วยให้ช่วงกระดานสำหรับการแยกสารระเหย แต่มันกินปริมาณมากของตัวทำละลาย ตัวทำละลายในการสกัดเป็นวิธีที่มีประโยชน์มากที่สุดสำหรับอาหารที่ไม่ไขมัน ในกรณีของอาหารที่มีไขมัน, สารสกัดจะได้รับการสกัดภายใต้เงื่อนไขสูญญากาศสูงที่จะแยกเฟสไขมัน(Reineccius, 2006). สกัดสารในเฟสของแข็งเป็นวิธีที่สะดวกและเป็นที่นิยม ของแข็งเช่น Amberlite XAD-2 เรซินมักจะถูกนำมาใช้สำหรับการแยกสารระเหย XAD-2 เป็นเรซินเชื่อมขวางน้ำยางสไตรีนลิเมอร์ ฟรีและ glycosidically ผูกพันสารระเหยปล่อยออกมาจาก XAD-2 เรซินจะ fractionated โดยตัวทำละลายขั้วที่แตกต่างกัน. จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้เพื่อเปรียบเทียบสองวิธีการแยกสกัดด้วยตัวทำละลายที่เป็นของแข็งและสกัดสารในเฟสโดยใช้ XAD-2 เรซินได้ฟรีและ glycosidically- ผูกพันสารระเหยของสดใบมะกรูด. วัสดุและวิธีการวัสดุใบมะกรูดที่ซื้อมาจากตลาดในประเทศในเขตกรุงเทพมหานคร พวกเขาได้รับการทำความสะอาดด้วยน้ำกลั่น swiped ให้แห้งและตัดโดยการตัดออกเส้นกลางใบของใบที่มีขากรรไกร. น้ำยาตัวทำละลายระดับ HPLC และฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ซื้อมาจากแล็บสแกน (ไอร์แลนด์). โซเดียมคลอไรด์และโซเดียมซัลเฟตปราศจากกำลังซื้อ จากฟิชเชอร์เคมี (อังกฤษ). มาตรฐานภายใน (เบนซิน tert บิวทิลและ 2 Undecanol) n-แอลเคน (ไฮโดรคาร์บอน C4-C22) และเรซิ่น(Amberlite XAD-2) ที่ซื้อมาจากซิกม่าดิช (สหรัฐอเมริกา). การแยก / สกัดตัวทำละลายในการสกัด20 กรัมใบมะกรูดได้รับการผสมกับ 200 มลไนโตรเจนเหลวและ 20 กรัมโซเดียมคลอไรด์ในเครื่องปั่นWaring 20 s การผสมผสานการสกัดครั้งที่สองกับ 80 มิลลิลิตรไดคลอโรมีเทนและสองครั้งด้วย80 มล. ของเพ็นเทนตามลำดับเพื่อแยกสารที่ระเหยได้ฟรี ฟรีระเหยสารสกัดจากสารประกอบที่ถูกเพิ่มเข้ามา 50 ไมโครลิตรมาตรฐานภายใน (tert เบนซินบิวทิลและ 2 Undecanol). ส่วนผสมที่เข้มข้นถึง 50 มล. ภายใต้ไอน้ำกลั่น N2 ก่อนภายใต้ 10-5 Torr ที่ห้องอุณหภูมิเป็นเวลา2 ชั่วโมง จากนั้นสารสกัดแห้งไปด้วย 2 กรัม Na2SO4 และกำจัด 1 มล. กับ N2. สำหรับส่วน glycosidically ผูกพัน, ผสมผสานเป็นอีกครั้งที่แยกสามครั้ง 80 มล. ของเมทานอล. เฟสของแข็งสกัด: Amberlite XAD-2 เรซิน ( ดัดแปลงมาจาก Chyau et al., 2003) 20 กรัมใบมะกรูดได้รับการผสมกับ 200 มลไนโตรเจนเหลวในเครื่องปั่น Waring สำหรับ20 s การผสมผสานทำให้เป็นเนื้อเดียวกันกับการแก้ปัญหาโซเดียมคลอไรด์เป็นเวลา 5 นาทีและปั่นแล้วที่ 6,430 กรัมอุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา30 นาที เมทานอลและปราศจากไอออน (DI) น้ำที่ใช้สำหรับ preconditioning XAD-2 วิธีการแก้ปัญหาที่ชัดเจนถูกโหลดผ่านคอลัมน์ XAD-2 ในอัตราการไหล 2.2 มล. / นาที DI น้ำถูกโหลดในการกำจัดน้ำตาลกรดและน้ำอื่นๆ สารที่ละลายในน้ำ 100 มิลลิลิตรส่วนผสมของเพ็นเทน / ไดคลอโรมีเทน(1: 1) ถูกโหลดผ่านคอลัมน์เพื่อชะสารระเหยฟรี หลังจากนั้นเมทานอล 100 มล. ถูกโหลดผ่านคอลัมน์ชะ glycosidically ผูกพันสารระเหย ระเหยฟรีสารสกัดจากสารประกอบที่ถูกเพิ่มเข้ามาแล้วกับ 50 ไมโครลิตรมาตรฐานภายในและความเข้มข้น 50 มล. ภายใต้ไอน้ำอ่อนโยนของN2 ก่อนกลั่นสูญญากาศสูงดังกล่าวข้างต้น. การย่อยสลายกรด (ดัดแปลงมาจากซีเอไอ et al., 2002) สารสกัดเมทานอลมีความเข้มข้น และแห้งโดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุนที่ 50OC และ252 Torr ต่อจากนั้นเศษของผูกพัน glycosidically สารระเหยเป็นอีกครั้งที่ละลายในส่วนผสมของน้ำ100 มล. DI และ 100 มล. ของฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 3.5) ผสมด้วยเอนไซม์ที่ 50OC 2.5 ชั่วโมง aglycones ที่ปล่อยออกมาจากการย่อยสลายกรดสกัดสามครั้ง 50 มล. ของเพ็นเทน / ไดคลอโรมีเทน (1: 1) เพื่อเอา aglycones และ 50 ไมโครลิตรมาตรฐานภายในถูกเพิ่มเข้ามาก่อนที่จะกลั่นสูญญากาศสูงดังกล่าวก่อน. GC-MS และการวิเคราะห์ GC-FID สารสกัดเข้มข้นจาก 1 ไมโครลิตรได้รับการวิเคราะห์ในรูปแบบของ Hewlett-Packard HP 6890 GC การติดตั้งเครื่องตรวจจับมวลเลือกรุ่น HP 5973. คอลัมน์ฝอย, HP-5 (60 เมตรยาวID 0.25 มิลลิเมตรและ 0.25 ไมโครเมตรความหนาของฟิล์ม) และถูกนำมาใช้ ผู้ให้บริการก๊าซเป็นฮีเลียมที่มีอัตราการไหลของ2.2 มล. / นาที หัวฉีดที่ได้รับการดำเนินการในโหมดแยก (50: 1) อุณหภูมิเตาอบเป็นจุดเริ่มต้นที่35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาทีขึ้นในอัตรา 10OC / นาที 200 OC และจัดขึ้นที่อุณหภูมินี้เป็นเวลา 10 นาที ตัวตนของสารระเหยและดัชนีญาติของพวกเขา (RI) ได้ทำโดยการเปรียบเทียบสเปกตรัมมวลกับไวลีย์275 ห้องสมุด NIST 98 ห้องสมุดและ n-แอลเคน (C4-C22) ดัชนีการเก็บรักษา. ฟรีและสารสกัดเข้มข้น aglycone วิเคราะห์ใน Hewlett- Packard รุ่น HP 6890N GC พร้อมกับ FID คอลัมน์ฝอย, HP-5 (30 เมตรความยาว 0.25 มมประจำตัวประชาชนและ 0.25 ไมครอนฟิล์มหนา) ถูกนำมาใช้และเงื่อนไขเดียวกับที่ใช้ใน GC-MS ความเข้มข้นของญาติของสารประกอบที่คำนวณได้จากการเปรียบเทียบพื้นที่ยอดเขาที่มีมาตรฐานภายใน (เบนซีนบิวทิล tert สำหรับ monoterpene และ 2 Undecanol สำหรับ l-linalool). ผลและการอภิปราย1 สารระเหยฟรีสกัดตัวทำละลายเป็นวิธีการในการที่ตัวอย่างติดต่อโดยตรงกับตัวทำละลาย คณะกรรมการช่วงของสารระเหยที่แยกดังแสดงในตารางที่ 1 ห้าสิบสี่สารระเหยฟรีถูกระบุว่าเป็นลดีไฮด์(74.8%) ไฮโดรคาร์บอน (12.2%), แอลกอฮอล์ (6.4%) และเอสเทอ (2.7%) เป็นสำคัญ องค์ประกอบในใบมะกรูดสด citronellal (74.8%) เป็นมากที่สุดสารประกอบในขณะที่น้ำมันใบมะกรูดที่สกัดโดยการกลั่นไอน้ำและสารบางรายยังได้รับรายงาน(อเรนซ์ et al., 1971) ตัวทำละลายสกัดสารระเหยฟรีมีใบมะกรูดกลิ่นเช่น l-limonene, l-linalool และβ-citronellol ที่มีบันทึกสีส้มและสีส้ม. สำหรับการสกัดของแข็งใช้ XAD-2 เรซินตัวตนของสารระเหยอิสระได้แสดงในตารางที่2. ห้าสิบสารระเหยฟรีถูกระบุว่าเป็นสารไฮโดรคาร์บอน (90.4%) ลดีไฮด์(8.2%), แอลกอฮอล์ (1.3%) และเอสเตอร์ (0.1%) สารประกอบที่อุดมสมบูรณ์คือ 1-methyl-2- phenylcyclopropane (48.6%) และ 4 ethenyl-1,2-Dimethylbenzene (22.4%) สารระเหยฟรีสกัดโดย XAD-2 เม็ดไม่ได้แสดงลักษณะกลิ่นของใบมะกรูดและส่วนใหญ่ของพวกเขาเป็นสารเบนซิลที่แสดงให้เห็นความสัมพันธ์ของ XAD-2 เรซินสารประกอบเบนซิลเป็นที่พบใน Isolating องุ่นโดย Amberlite XAD-2 ( Ibarz et al., 2006) สารบางอย่างที่ได้รับรายงานในน้ำมันใบมะกรูดไม่พบวิธี XAD-2 เช่นα-pinene, β-pinene, sabinene, myrcene, limonene, l-linalool และอะซิเตท citronellyl. สารระเหยฟรีพบได้ทั้งในตัวทำละลาย การสกัดและการ XAD-2 วิธีเรซินถูกแสดงในรูปที่1 ความเข้มข้นมากที่สุดของ XAD-2 สารสกัดต่ำกว่าตัวทำละลายสารสกัดยกเว้น1 penten-3-เฒ่า, ทรานส์-2-hexanal และ geranial ความเข้มข้นของสารระเหยฟรีสารประกอบที่ให้กลิ่นลักษณะใบมะกรูดเช่น citronellal, β-citronellol, transgeraniol, และทรานส์β-caryophyllene สกัดโดย XAD-2 เรซินมีค่าต่ำกว่าที่ได้จากการสกัดด้วยตัวทำละลาย. 2 Glycosidically ผูกพันสารระเหยสำหรับวิธีการสกัดสารสามสิบเก้าถูกระบุว่าเป็นแอลกอฮอล์(45.3%) ลดีไฮด์ (33.9%) ไฮโดรคาร์บอน (10.5%) และเอสเทอ (7.8%) (ตารางที่ 1) citronellal เป็นส่วนใหญ่สารที่อุดมสมบูรณ์เป็นรูปแบบฟรี 2- (2 ไฮดรอกซิ-2-โพรพิ) -5-M-cyclohexanol และα-terpinene-4-เฒ่าถูกสารที่พบเฉพาะในรูปแบบที่ถูกผูกไว้glycosidically ของวิธีการสกัดด้วยตัวทำละลายและไม่พบในXAD-2 วิธีเรซิน ดังนั้นทั้งสองสารที่อาจจะเกิดขึ้นในระหว่างกรดไฮโดรไลซิ ปฏิกิริยาทางเคมีที่เกี่ยวข้องในการก่อตัวเหล่านี้เป็นรูปแบบของเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ terpene โดยปรับปรุงใหม่เร่งปฏิกิริยาของกรดโพลิออลและการเกิดออกซิเดชันของ terpene ไฮโดรคาร์บอนที่เกิดขึ้นในที่
วิธีการสกัดสองสกัดและการสกัดของแข็ง Amberlite XAD ใช้-2
เม็ดถูกนำมาใช้เพื่อดึงฟรีและ glycosidically
ผูกพันสารระเหยของมะกรูดสดใบ ผลที่ดีขึ้นได้ด้วยวิธีการสกัดด้วยตัวทำละลาย ห้าสิบสี่ฟรีและสามสิบเก้า
glycosidically
ผูกพันสารระเหยที่ได้รับโดยวิธีการสกัดด้วยตัวทำละลายและกลิ่นของพวกเขารายละเอียดที่เกี่ยวข้องกับกลิ่นใบมะกรูด สำหรับเรซิน XAD-2, ห้าสิบฟรีและสิบ glycosidically
ผูกพันสารระเหยที่ได้รับแต่ส่วนใหญ่ของพวกเขาไม่ได้เกี่ยวข้องกับสารระเหยในมะกรูดใบ
ส่วนใหญ่ของฟรีและ glycosidically ผูกพันสารระเหยที่สกัดด้วยเรซิน XAD-2
มีความเข้มข้นต่ำกว่าที่สกัดด้วยตัวทำละลายในการสกัดโดยเฉพาะอย่างยิ่งสารที่ให้กลิ่นลักษณะใบมะกรูดเช่น
citronellal, β-citronellol, ทรานส์ geraniol และทรานส์ . β-caryophyllene คำสำคัญ: การสกัดด้วยตัวทำละลาย, XAD-2 ยางฟรีและสารประกอบ glycosidically ที่ถูกผูกไว้ระเหยใบมะกรูดที่อยู่E-mail: g4870038@ku.ac.th introducton มะนาวมะกรูด (Citrus hystrix DC, Rutaceae) เป็น พืชส้มเอเชียตะวันออกเฉียงใต้ที่มีมากกลิ่นหอมที่แข็งแกร่ง สารระเหยฟรีในน้ำมันใบมะกรูดอบไอน้ำกลั่นโดยได้รับรายงาน citronellal เป็นสารระเหยหลักที่พบในน้ำมันหอมระเหยจากใบมะกรูด อีกสารระเหยที่พบในน้ำมันใบมะกรูดเป็นα-pinene, camphene, β-pinene, sabinene, limonene myrcene, ทรานส์ ocimene, γ-terpinene, ρ-cymene, terpinolene, copaene, linalool, β-cubebene, isopulegol, caryophyllene น้ำนม citronelly, citronellol น้ำนม geranyl, δ-cadinene (อเรนซ์ et al., 1971) Glycosidically ผูกพันสารระเหยของใบมะกรูดสดยังไม่ได้1 คณะอุตสาหกรรมเกษตรมหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์กรุงเทพฯ 10900 1 ภาควิชาวิทยาศาสตร์การอาหารและเทคโนโลยี, คณะอุตสาหกรรมเกษตรมหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์กรุงเทพฯ 10900 ได้รับการศึกษาในวันที่แม้ว่าพวกเขาจะสารตั้งต้นที่มีศักยภาพของสารระเหยในหลายพืช สารระเหย glycosidically ที่ถูกผูกไว้จะประกอบด้วยสองส่วน aglycone และglycone กลุ่มไฮดรอกซิ anomeric น้ำตาล (glycone) จะเชื่อมโยงกับสารระเหย (aglycone) ผ่านการเชื่อมโยง glycosidic (Chyau et al., 2003). การสกัดตัวทำละลายเป็นหนึ่งในวิธีที่ง่ายที่สุดในการแยกกลิ่นหอม วิธีการนี้จะช่วยให้ช่วงกระดานสำหรับการแยกสารระเหย แต่มันกินปริมาณมากของตัวทำละลาย ตัวทำละลายในการสกัดเป็นวิธีที่มีประโยชน์มากที่สุดสำหรับอาหารที่ไม่ไขมัน ในกรณีของอาหารที่มีไขมัน, สารสกัดจะได้รับการสกัดภายใต้เงื่อนไขสูญญากาศสูงที่จะแยกเฟสไขมัน(Reineccius, 2006). สกัดสารในเฟสของแข็งเป็นวิธีที่สะดวกและเป็นที่นิยม ของแข็งเช่น Amberlite XAD-2 เรซินมักจะถูกนำมาใช้สำหรับการแยกสารระเหย XAD-2 เป็นเรซินเชื่อมขวางน้ำยางสไตรีนลิเมอร์ ฟรีและ glycosidically ผูกพันสารระเหยปล่อยออกมาจาก XAD-2 เรซินจะ fractionated โดยตัวทำละลายขั้วที่แตกต่างกัน. จุดมุ่งหมายของการศึกษาครั้งนี้เพื่อเปรียบเทียบสองวิธีการแยกสกัดด้วยตัวทำละลายที่เป็นของแข็งและสกัดสารในเฟสโดยใช้ XAD-2 เรซินได้ฟรีและ glycosidically- ผูกพันสารระเหยของสดใบมะกรูด. วัสดุและวิธีการวัสดุใบมะกรูดที่ซื้อมาจากตลาดในประเทศในเขตกรุงเทพมหานคร พวกเขาได้รับการทำความสะอาดด้วยน้ำกลั่น swiped ให้แห้งและตัดโดยการตัดออกเส้นกลางใบของใบที่มีขากรรไกร. น้ำยาตัวทำละลายระดับ HPLC และฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ซื้อมาจากแล็บสแกน (ไอร์แลนด์). โซเดียมคลอไรด์และโซเดียมซัลเฟตปราศจากกำลังซื้อ จากฟิชเชอร์เคมี (อังกฤษ). มาตรฐานภายใน (เบนซิน tert บิวทิลและ 2 Undecanol) n-แอลเคน (ไฮโดรคาร์บอน C4-C22) และเรซิ่น(Amberlite XAD-2) ที่ซื้อมาจากซิกม่าดิช (สหรัฐอเมริกา). การแยก / สกัดตัวทำละลายในการสกัด20 กรัมใบมะกรูดได้รับการผสมกับ 200 มลไนโตรเจนเหลวและ 20 กรัมโซเดียมคลอไรด์ในเครื่องปั่นWaring 20 s การผสมผสานการสกัดครั้งที่สองกับ 80 มิลลิลิตรไดคลอโรมีเทนและสองครั้งด้วย80 มล. ของเพ็นเทนตามลำดับเพื่อแยกสารที่ระเหยได้ฟรี ฟรีระเหยสารสกัดจากสารประกอบที่ถูกเพิ่มเข้ามา 50 ไมโครลิตรมาตรฐานภายใน (tert เบนซินบิวทิลและ 2 Undecanol). ส่วนผสมที่เข้มข้นถึง 50 มล. ภายใต้ไอน้ำกลั่น N2 ก่อนภายใต้ 10-5 Torr ที่ห้องอุณหภูมิเป็นเวลา2 ชั่วโมง จากนั้นสารสกัดแห้งไปด้วย 2 กรัม Na2SO4 และกำจัด 1 มล. กับ N2. สำหรับส่วน glycosidically ผูกพัน, ผสมผสานเป็นอีกครั้งที่แยกสามครั้ง 80 มล. ของเมทานอล. เฟสของแข็งสกัด: Amberlite XAD-2 เรซิน ( ดัดแปลงมาจาก Chyau et al., 2003) 20 กรัมใบมะกรูดได้รับการผสมกับ 200 มลไนโตรเจนเหลวในเครื่องปั่น Waring สำหรับ20 s การผสมผสานทำให้เป็นเนื้อเดียวกันกับการแก้ปัญหาโซเดียมคลอไรด์เป็นเวลา 5 นาทีและปั่นแล้วที่ 6,430 กรัมอุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา30 นาที เมทานอลและปราศจากไอออน (DI) น้ำที่ใช้สำหรับ preconditioning XAD-2 วิธีการแก้ปัญหาที่ชัดเจนถูกโหลดผ่านคอลัมน์ XAD-2 ในอัตราการไหล 2.2 มล. / นาที DI น้ำถูกโหลดในการกำจัดน้ำตาลกรดและน้ำอื่นๆ สารที่ละลายในน้ำ 100 มิลลิลิตรส่วนผสมของเพ็นเทน / ไดคลอโรมีเทน(1: 1) ถูกโหลดผ่านคอลัมน์เพื่อชะสารระเหยฟรี หลังจากนั้นเมทานอล 100 มล. ถูกโหลดผ่านคอลัมน์ชะ glycosidically ผูกพันสารระเหย ระเหยฟรีสารสกัดจากสารประกอบที่ถูกเพิ่มเข้ามาแล้วกับ 50 ไมโครลิตรมาตรฐานภายในและความเข้มข้น 50 มล. ภายใต้ไอน้ำอ่อนโยนของN2 ก่อนกลั่นสูญญากาศสูงดังกล่าวข้างต้น. การย่อยสลายกรด (ดัดแปลงมาจากซีเอไอ et al., 2002) สารสกัดเมทานอลมีความเข้มข้น และแห้งโดยใช้เครื่องระเหยแบบหมุนที่ 50OC และ252 Torr ต่อจากนั้นเศษของผูกพัน glycosidically สารระเหยเป็นอีกครั้งที่ละลายในส่วนผสมของน้ำ100 มล. DI และ 100 มล. ของฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 3.5) ผสมด้วยเอนไซม์ที่ 50OC 2.5 ชั่วโมง aglycones ที่ปล่อยออกมาจากการย่อยสลายกรดสกัดสามครั้ง 50 มล. ของเพ็นเทน / ไดคลอโรมีเทน (1: 1) เพื่อเอา aglycones และ 50 ไมโครลิตรมาตรฐานภายในถูกเพิ่มเข้ามาก่อนที่จะกลั่นสูญญากาศสูงดังกล่าวก่อน. GC-MS และการวิเคราะห์ GC-FID สารสกัดเข้มข้นจาก 1 ไมโครลิตรได้รับการวิเคราะห์ในรูปแบบของ Hewlett-Packard HP 6890 GC การติดตั้งเครื่องตรวจจับมวลเลือกรุ่น HP 5973. คอลัมน์ฝอย, HP-5 (60 เมตรยาวID 0.25 มิลลิเมตรและ 0.25 ไมโครเมตรความหนาของฟิล์ม) และถูกนำมาใช้ ผู้ให้บริการก๊าซเป็นฮีเลียมที่มีอัตราการไหลของ2.2 มล. / นาที หัวฉีดที่ได้รับการดำเนินการในโหมดแยก (50: 1) อุณหภูมิเตาอบเป็นจุดเริ่มต้นที่35 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาทีขึ้นในอัตรา 10OC / นาที 200 OC และจัดขึ้นที่อุณหภูมินี้เป็นเวลา 10 นาที ตัวตนของสารระเหยและดัชนีญาติของพวกเขา (RI) ได้ทำโดยการเปรียบเทียบสเปกตรัมมวลกับไวลีย์275 ห้องสมุด NIST 98 ห้องสมุดและ n-แอลเคน (C4-C22) ดัชนีการเก็บรักษา. ฟรีและสารสกัดเข้มข้น aglycone วิเคราะห์ใน Hewlett- Packard รุ่น HP 6890N GC พร้อมกับ FID คอลัมน์ฝอย, HP-5 (30 เมตรความยาว 0.25 มมประจำตัวประชาชนและ 0.25 ไมครอนฟิล์มหนา) ถูกนำมาใช้และเงื่อนไขเดียวกับที่ใช้ใน GC-MS ความเข้มข้นของญาติของสารประกอบที่คำนวณได้จากการเปรียบเทียบพื้นที่ยอดเขาที่มีมาตรฐานภายใน (เบนซีนบิวทิล tert สำหรับ monoterpene และ 2 Undecanol สำหรับ l-linalool). ผลและการอภิปราย1 สารระเหยฟรีสกัดตัวทำละลายเป็นวิธีการในการที่ตัวอย่างติดต่อโดยตรงกับตัวทำละลาย คณะกรรมการช่วงของสารระเหยที่แยกดังแสดงในตารางที่ 1 ห้าสิบสี่สารระเหยฟรีถูกระบุว่าเป็นลดีไฮด์(74.8%) ไฮโดรคาร์บอน (12.2%), แอลกอฮอล์ (6.4%) และเอสเทอ (2.7%) เป็นสำคัญ องค์ประกอบในใบมะกรูดสด citronellal (74.8%) เป็นมากที่สุดสารประกอบในขณะที่น้ำมันใบมะกรูดที่สกัดโดยการกลั่นไอน้ำและสารบางรายยังได้รับรายงาน(อเรนซ์ et al., 1971) ตัวทำละลายสกัดสารระเหยฟรีมีใบมะกรูดกลิ่นเช่น l-limonene, l-linalool และβ-citronellol ที่มีบันทึกสีส้มและสีส้ม. สำหรับการสกัดของแข็งใช้ XAD-2 เรซินตัวตนของสารระเหยอิสระได้แสดงในตารางที่2. ห้าสิบสารระเหยฟรีถูกระบุว่าเป็นสารไฮโดรคาร์บอน (90.4%) ลดีไฮด์(8.2%), แอลกอฮอล์ (1.3%) และเอสเตอร์ (0.1%) สารประกอบที่อุดมสมบูรณ์คือ 1-methyl-2- phenylcyclopropane (48.6%) และ 4 ethenyl-1,2-Dimethylbenzene (22.4%) สารระเหยฟรีสกัดโดย XAD-2 เม็ดไม่ได้แสดงลักษณะกลิ่นของใบมะกรูดและส่วนใหญ่ของพวกเขาเป็นสารเบนซิลที่แสดงให้เห็นความสัมพันธ์ของ XAD-2 เรซินสารประกอบเบนซิลเป็นที่พบใน Isolating องุ่นโดย Amberlite XAD-2 ( Ibarz et al., 2006) สารบางอย่างที่ได้รับรายงานในน้ำมันใบมะกรูดไม่พบวิธี XAD-2 เช่นα-pinene, β-pinene, sabinene, myrcene, limonene, l-linalool และอะซิเตท citronellyl. สารระเหยฟรีพบได้ทั้งในตัวทำละลาย การสกัดและการ XAD-2 วิธีเรซินถูกแสดงในรูปที่1 ความเข้มข้นมากที่สุดของ XAD-2 สารสกัดต่ำกว่าตัวทำละลายสารสกัดยกเว้น1 penten-3-เฒ่า, ทรานส์-2-hexanal และ geranial ความเข้มข้นของสารระเหยฟรีสารประกอบที่ให้กลิ่นลักษณะใบมะกรูดเช่น citronellal, β-citronellol, transgeraniol, และทรานส์β-caryophyllene สกัดโดย XAD-2 เรซินมีค่าต่ำกว่าที่ได้จากการสกัดด้วยตัวทำละลาย. 2 Glycosidically ผูกพันสารระเหยสำหรับวิธีการสกัดสารสามสิบเก้าถูกระบุว่าเป็นแอลกอฮอล์(45.3%) ลดีไฮด์ (33.9%) ไฮโดรคาร์บอน (10.5%) และเอสเทอ (7.8%) (ตารางที่ 1) citronellal เป็นส่วนใหญ่สารที่อุดมสมบูรณ์เป็นรูปแบบฟรี 2- (2 ไฮดรอกซิ-2-โพรพิ) -5-M-cyclohexanol และα-terpinene-4-เฒ่าถูกสารที่พบเฉพาะในรูปแบบที่ถูกผูกไว้glycosidically ของวิธีการสกัดด้วยตัวทำละลายและไม่พบในXAD-2 วิธีเรซิน ดังนั้นทั้งสองสารที่อาจจะเกิดขึ้นในระหว่างกรดไฮโดรไลซิ ปฏิกิริยาทางเคมีที่เกี่ยวข้องในการก่อตัวเหล่านี้เป็นรูปแบบของเครื่องดื่มแอลกอฮอล์ terpene โดยปรับปรุงใหม่เร่งปฏิกิริยาของกรดโพลิออลและการเกิดออกซิเดชันของ terpene ไฮโดรคาร์บอนที่เกิดขึ้นในที่
การแปล กรุณารอสักครู่..
abtract
สองวิธีการสกัดด้วยตัวทำละลายการสกัดแยกด้วยเฟสของแข็งโดยใช้สารละลาย xad-2
เรซิ่น ใช้สารสกัดจากฟรีและ glycosidically ผูกพันระเหยมะกรูดสด
ใบ ผลที่ดีขึ้นได้ด้วยการสกัดด้วยตัวทำละลาย ห้าสิบสี่ฟรีและ 39
glycosidically ผูกพันได้โดยวิธีการระเหยตัวทำละลายในการสกัดและกลิ่น
คำอธิบายที่เกี่ยวข้องกับใบมะกรูด กลิ่นไม่พึงประสงค์ สำหรับ xad-2 เรซิน 50 ฟรี และสิบ glycosidically ผูกพัน
ระเหยได้ แต่ส่วนใหญ่ของพวกเขาไม่ได้เกี่ยวข้องกับสารระเหยในใบมะกรูด
. ที่สุดของฟรีและ glycosidically ผูกพันระเหยที่สกัดด้วย xad-2 เรซินมีความเข้มข้นสูงกว่าที่สกัด
การสกัดด้วยตัวทำละลายโดยเฉพาะอย่างยิ่ง สารประกอบที่ให้กลิ่น
ใบมะกรูดลักษณะเช่นซิโตรเนลลัลบีตา , - ซิโตรเนลเจอรานิออลทรานส์ , trans - บีตา - caryophyllene และ
.
คำสำคัญ : การสกัด xad-2 เรซินตัวทำละลายฟรีและ glycosidically ผูกพันระเหยสาร , ใบมะกรูด
e - mail address : g4870038 @ กู โดย introducton
ใบมะกรูด ( ส้ม hystrix ดีซีต้น ) เป็นพืชส้มเอเชียตะวันออกเฉียงใต้ด้วย
แข็งแรงน้ำหอม ฟรีสารระเหยในใบมะกรูดน้ำมัน distillated ด้วยไอน้ำมี
รายงาน ซิโตรเนลลัลเป็นหลักระเหยสารประกอบที่พบในน้ำมันหอมระเหยของใบมะกรูด . อีก
ระเหยที่พบในใบมะกรูดน้ำมันเป็นแอลฟาบีตา - โดโด , camphene , , ซาบินีน
ไมร์ซีน ocimene ทรานส์ลิโมนิน , , ,γ - terpinene มีρ - ไคมีนเทอร์พิโนลีน copaene ไลนาลูล , , , ,
cubebene บีตา - isopulegol caryophyllene , , , citronelly อะซีซิโตรเนล geranyl acetate , δ - คาดินีน
( Lawrence et al . , 1971 ) glycosidically ผูกพันระเหยของมะกรูดสดใบไม่ได้
1 ภาควิชาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีการอาหารคณะอุตสาหกรรมเกษตรมหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์กรุงเทพฯ 10900
สาขาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีการอาหาร คณะอุตสาหกรรมการเกษตร มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ บางเขน กรุงเทพมหานคร 10900
3 วัน แม้ว่าพวกเขาจะเป็นสารที่มีศักยภาพของสารระเหยในพืชมากมาย
การ glycosidically ผูกพันระเหย ประกอบด้วย 2 ส่วน glycone ี่และ
. การ anomeric หมู่ไฮดรอกซิลของน้ำตาล ( glycone ) เชื่อมโยงกับสารระเหย ( ไกลโคน )
ผ่านการเชื่อมโยงไกลโคซิดิก ( chyau et al . , 2003 ) .
การสกัดด้วยตัวทำละลาย เป็นหนึ่งในวิธีที่ง่ายที่สุดในการแยกกลิ่น วิธีนี้ให้
ช่วงบอร์ดเพื่อแยกสารระเหย ,แต่มันใช้ปริมาณมากของตัวทำละลาย การสกัดด้วยตัวทำละลาย
เป็นวิธีที่มีประโยชน์มากที่สุดไม่ใช่ ไขมันในอาหาร ในกรณีของอาหารที่มีไขมัน , สารสกัด
จะ re สกัดภายใต้สภาวะสุญญากาศสูงแยกเฟสไขมัน ( reineccius , 2006 ) .
การสกัดด้วยเฟสของแข็งคือสะดวกและนิยมใช้วิธี เฟสของสารละลายของแข็ง เช่น
xad-2 เรซินมักจะใช้สำหรับการแยกสารระเหย .xad-2 เรซินพอลิสไตรีนโคพอลิเมอร์เพิ่มขึ้น
) เรซิน ฟรีและ glycosidically ผูกพันระเหยออกจาก xad-2
เรซิ่นเป็นลำดับด้วยตัวทำละลายชนิดต่าง ๆ .
วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้เพื่อเปรียบเทียบสองแยกวิธี การสกัดด้วยตัวทำละลายการสกัดด้วยเฟสของแข็ง
ใช้ xad-2 เรซิน และสารระเหย ฟรี glycosidically ผูกพันสด
ใบมะกรูด
วัสดุวัสดุและวิธีการ ใบมะกรูด ซื้อจากตลาดในประเทศในเขตกรุงเทพมหานคร พวกเขาทำความสะอาดกับ
กลั่น ปัดแห้ง และตัดโดยการตัดออกจากเส้นกลางใบของใบไม้กับกรรไกร .
เกรดตัวทำละลายและสารเคมีฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ถูกซื้อจากแล็บสแกน
( ไอร์แลนด์ )โซเดียมคลอไรด์และซัลเฟต anhydrous โซเดียมถูกซื้อจาก Fisher Chemical ( อังกฤษ )
มาตรฐานภายใน ( เบนซินและบิวทิล tert 2-undecanol ) n-alkanes ( สารไฮโดรคาร์บอน c4-c22 ) และเรซิน
( สารละลาย xad-2 ) ซื้อจาก ซิกม่า Aldrich ( USA )
/ สกัดแยกตัวทำละลายการสกัด
20 กรัมของใบมะกรูด 200 มิลลิลิตร ผสมกับไนโตรเจนเหลวและ 20 กรัมของเกลือใน
ปั่นสินค้า 20 วินาที ผสมผสานสกัด 2 ครั้ง 80 มิลลิลิตร ไดคลอโรมีเทนและสอง
ครั้ง 80 มล เพนเทน ตามลำดับ เพื่อแยกสารระเหยฟรี ฟรีสารสกัดสารระเหย
เพิ่ม 50 μ L มาตรฐานภายใน ( เบนซินและบิวทิล tert 2-undecanol ) .
ส่วนผสมเข้มข้น 50 ml ภายใต้ไอน้ำ N2 ก่อนการกลั่นภายใต้ 10-5 ทอร์ที่ห้อง
อุณหภูมิเป็นเวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นน้ำก็แห้งไป 2 ต่อ 1 มิลลิลิตร และ na2so4 ลบด้วย 2 .
สำหรับ glycosidically ผูกพัน , สัดส่วนผสมเป็นอีกครั้งที่สกัด 3 ครั้ง กับ 80 มิลลิลิตรเมธา .
การสกัดแยกด้วยเฟสของแข็ง : xad-2 สารละลายเรซิน ( ดัดแปลงจาก chyau et al . , 2003 )
20 กรัมของใบมะกรูดเป็น 200 มิลลิลิตรผสมกับไนโตรเจนเหลวในสินค้าเครื่องปั่นสำหรับ
20 sผสมกับเกลือเป็นโฮโมโซลูชั่นสำหรับ 5 นาทีแล้ว ระดับที่ 6430 กรัม 4oc
เป็นเวลา 30 นาที เมทานอลและคล้ายเนื้อเยื่อประสาน ( DI ) น้ำที่ใช้สำหรับ preconditioning xad-2 .
ทางออกที่ชัดเจนคือ โหลดผ่าน xad-2 คอลัมน์ที่อัตราการไหล 2 มล. / นาที น้ำ DI ถูกโหลดเพื่อขจัด
น้ำตาล กรด และ น้ำอื่น ๆละลายสารประกอบ 100 มล. ผสมไดคลอโรมีเทนเพนเทน /
( 11 ) โหลดผ่านคอลัมน์ elute สารระเหยอิสระ . หลังจากนั้น 100 มล. เมทานอล
ถูกโหลดผ่านคอลัมน์ elute glycosidically ผูการระเหย ฟรีสารสกัดสารระเหย
ถูกเพิ่มแล้ว 50 μ L มาตรฐานภายในและเข้มข้น 50 ml ภายใต้
อ่อนโยนอบ N2 ก่อนการกลั่นสูญญากาศสูงดังกล่าวข้างต้น
กรด ( ดัดแปลงจากไค et al . , 2002 ) และสารสกัดเมทานอล (
เข้มข้นแห้งระเหยที่ใช้หมุนและ 50oc
252 ทอร์ จำนวนเศษส่วนของ glycosidically ผูกพันระเหยเป็นกำลังละลาย
ผสม 100 มล. ในน้ำ 100 มิลลิลิตร ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 3.5 ) ส่วนผสมที่ผ่านการย่อย
50oc 2.5 ชั่วโมงการ aglycones ออกจากกรดสกัด 3 ครั้ง กับ 50 ml
เพนเทน / ไดคลอโรมีเทน ( 1 : 1 ) เพื่อเอา aglycones และ 50 μ L มาตรฐานภายในเพิ่ม
ก่อนการกลั่นสูญญากาศสูงตามที่กล่าวไว้ก่อนหน้านี้ และ gc-fid
และการวิเคราะห์สารสกัดเข้มข้น 1 μผมวิเคราะห์ใน Hewlett Packard HP รุ่น 6890 GC
พร้อมระบบตรวจจับแบบใช้มวล 5973 .คอลัมน์ C ( , 60 hp-5 M ความยาว
0.25 มม. และความหนาของฟิล์มμ ID 0.25 เมตร ) และใช้แก๊สตัวพาเป็นฮีเลียมด้วยอัตราการไหล
2.2 มิลลิลิตร / นาที หัวฉีด ดำเนินการในโหมดแยก ( 50 : 1 ) เตาอบอุณหภูมิเริ่มต้นที่
35oc 1 นาที เลี้ยงในอัตรา 10oC / มิน ถึง 200 องศาเซลเซียส ซึ่งที่อุณหภูมินี้ 10 นาที
เอกลักษณ์ของสารระเหยและดัชนีสัมพัทธ์ ( RI ) ทำโดยการเปรียบเทียบสเปกตรัมมวล
กับห้องสมุดนิ่ง 275 , NIST 98 ห้องสมุดและ n-alkanes ( c4-c22 ) ดัชนีความคงทน .
ฟรีและวิเคราะห์บนี่เข้มข้นสารสกัดจาก Hewlett Packard รุ่น HP
6890n GC พร้อมสลัก . คอลัมน์ capillary hp-5 , ( ความยาว 30 เมตร 0.25 มม. ID และ 0.25 M
μฟิล์ม
สองวิธีการสกัดด้วยตัวทำละลายการสกัดแยกด้วยเฟสของแข็งโดยใช้สารละลาย xad-2
เรซิ่น ใช้สารสกัดจากฟรีและ glycosidically ผูกพันระเหยมะกรูดสด
ใบ ผลที่ดีขึ้นได้ด้วยการสกัดด้วยตัวทำละลาย ห้าสิบสี่ฟรีและ 39
glycosidically ผูกพันได้โดยวิธีการระเหยตัวทำละลายในการสกัดและกลิ่น
คำอธิบายที่เกี่ยวข้องกับใบมะกรูด กลิ่นไม่พึงประสงค์ สำหรับ xad-2 เรซิน 50 ฟรี และสิบ glycosidically ผูกพัน
ระเหยได้ แต่ส่วนใหญ่ของพวกเขาไม่ได้เกี่ยวข้องกับสารระเหยในใบมะกรูด
. ที่สุดของฟรีและ glycosidically ผูกพันระเหยที่สกัดด้วย xad-2 เรซินมีความเข้มข้นสูงกว่าที่สกัด
การสกัดด้วยตัวทำละลายโดยเฉพาะอย่างยิ่ง สารประกอบที่ให้กลิ่น
ใบมะกรูดลักษณะเช่นซิโตรเนลลัลบีตา , - ซิโตรเนลเจอรานิออลทรานส์ , trans - บีตา - caryophyllene และ
.
คำสำคัญ : การสกัด xad-2 เรซินตัวทำละลายฟรีและ glycosidically ผูกพันระเหยสาร , ใบมะกรูด
e - mail address : g4870038 @ กู โดย introducton
ใบมะกรูด ( ส้ม hystrix ดีซีต้น ) เป็นพืชส้มเอเชียตะวันออกเฉียงใต้ด้วย
แข็งแรงน้ำหอม ฟรีสารระเหยในใบมะกรูดน้ำมัน distillated ด้วยไอน้ำมี
รายงาน ซิโตรเนลลัลเป็นหลักระเหยสารประกอบที่พบในน้ำมันหอมระเหยของใบมะกรูด . อีก
ระเหยที่พบในใบมะกรูดน้ำมันเป็นแอลฟาบีตา - โดโด , camphene , , ซาบินีน
ไมร์ซีน ocimene ทรานส์ลิโมนิน , , ,γ - terpinene มีρ - ไคมีนเทอร์พิโนลีน copaene ไลนาลูล , , , ,
cubebene บีตา - isopulegol caryophyllene , , , citronelly อะซีซิโตรเนล geranyl acetate , δ - คาดินีน
( Lawrence et al . , 1971 ) glycosidically ผูกพันระเหยของมะกรูดสดใบไม่ได้
1 ภาควิชาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีการอาหารคณะอุตสาหกรรมเกษตรมหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์กรุงเทพฯ 10900
สาขาวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีการอาหาร คณะอุตสาหกรรมการเกษตร มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์ บางเขน กรุงเทพมหานคร 10900
3 วัน แม้ว่าพวกเขาจะเป็นสารที่มีศักยภาพของสารระเหยในพืชมากมาย
การ glycosidically ผูกพันระเหย ประกอบด้วย 2 ส่วน glycone ี่และ
. การ anomeric หมู่ไฮดรอกซิลของน้ำตาล ( glycone ) เชื่อมโยงกับสารระเหย ( ไกลโคน )
ผ่านการเชื่อมโยงไกลโคซิดิก ( chyau et al . , 2003 ) .
การสกัดด้วยตัวทำละลาย เป็นหนึ่งในวิธีที่ง่ายที่สุดในการแยกกลิ่น วิธีนี้ให้
ช่วงบอร์ดเพื่อแยกสารระเหย ,แต่มันใช้ปริมาณมากของตัวทำละลาย การสกัดด้วยตัวทำละลาย
เป็นวิธีที่มีประโยชน์มากที่สุดไม่ใช่ ไขมันในอาหาร ในกรณีของอาหารที่มีไขมัน , สารสกัด
จะ re สกัดภายใต้สภาวะสุญญากาศสูงแยกเฟสไขมัน ( reineccius , 2006 ) .
การสกัดด้วยเฟสของแข็งคือสะดวกและนิยมใช้วิธี เฟสของสารละลายของแข็ง เช่น
xad-2 เรซินมักจะใช้สำหรับการแยกสารระเหย .xad-2 เรซินพอลิสไตรีนโคพอลิเมอร์เพิ่มขึ้น
) เรซิน ฟรีและ glycosidically ผูกพันระเหยออกจาก xad-2
เรซิ่นเป็นลำดับด้วยตัวทำละลายชนิดต่าง ๆ .
วัตถุประสงค์ของการศึกษานี้เพื่อเปรียบเทียบสองแยกวิธี การสกัดด้วยตัวทำละลายการสกัดด้วยเฟสของแข็ง
ใช้ xad-2 เรซิน และสารระเหย ฟรี glycosidically ผูกพันสด
ใบมะกรูด
วัสดุวัสดุและวิธีการ ใบมะกรูด ซื้อจากตลาดในประเทศในเขตกรุงเทพมหานคร พวกเขาทำความสะอาดกับ
กลั่น ปัดแห้ง และตัดโดยการตัดออกจากเส้นกลางใบของใบไม้กับกรรไกร .
เกรดตัวทำละลายและสารเคมีฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ถูกซื้อจากแล็บสแกน
( ไอร์แลนด์ )โซเดียมคลอไรด์และซัลเฟต anhydrous โซเดียมถูกซื้อจาก Fisher Chemical ( อังกฤษ )
มาตรฐานภายใน ( เบนซินและบิวทิล tert 2-undecanol ) n-alkanes ( สารไฮโดรคาร์บอน c4-c22 ) และเรซิน
( สารละลาย xad-2 ) ซื้อจาก ซิกม่า Aldrich ( USA )
/ สกัดแยกตัวทำละลายการสกัด
20 กรัมของใบมะกรูด 200 มิลลิลิตร ผสมกับไนโตรเจนเหลวและ 20 กรัมของเกลือใน
ปั่นสินค้า 20 วินาที ผสมผสานสกัด 2 ครั้ง 80 มิลลิลิตร ไดคลอโรมีเทนและสอง
ครั้ง 80 มล เพนเทน ตามลำดับ เพื่อแยกสารระเหยฟรี ฟรีสารสกัดสารระเหย
เพิ่ม 50 μ L มาตรฐานภายใน ( เบนซินและบิวทิล tert 2-undecanol ) .
ส่วนผสมเข้มข้น 50 ml ภายใต้ไอน้ำ N2 ก่อนการกลั่นภายใต้ 10-5 ทอร์ที่ห้อง
อุณหภูมิเป็นเวลา 2 ชั่วโมง จากนั้นน้ำก็แห้งไป 2 ต่อ 1 มิลลิลิตร และ na2so4 ลบด้วย 2 .
สำหรับ glycosidically ผูกพัน , สัดส่วนผสมเป็นอีกครั้งที่สกัด 3 ครั้ง กับ 80 มิลลิลิตรเมธา .
การสกัดแยกด้วยเฟสของแข็ง : xad-2 สารละลายเรซิน ( ดัดแปลงจาก chyau et al . , 2003 )
20 กรัมของใบมะกรูดเป็น 200 มิลลิลิตรผสมกับไนโตรเจนเหลวในสินค้าเครื่องปั่นสำหรับ
20 sผสมกับเกลือเป็นโฮโมโซลูชั่นสำหรับ 5 นาทีแล้ว ระดับที่ 6430 กรัม 4oc
เป็นเวลา 30 นาที เมทานอลและคล้ายเนื้อเยื่อประสาน ( DI ) น้ำที่ใช้สำหรับ preconditioning xad-2 .
ทางออกที่ชัดเจนคือ โหลดผ่าน xad-2 คอลัมน์ที่อัตราการไหล 2 มล. / นาที น้ำ DI ถูกโหลดเพื่อขจัด
น้ำตาล กรด และ น้ำอื่น ๆละลายสารประกอบ 100 มล. ผสมไดคลอโรมีเทนเพนเทน /
( 11 ) โหลดผ่านคอลัมน์ elute สารระเหยอิสระ . หลังจากนั้น 100 มล. เมทานอล
ถูกโหลดผ่านคอลัมน์ elute glycosidically ผูการระเหย ฟรีสารสกัดสารระเหย
ถูกเพิ่มแล้ว 50 μ L มาตรฐานภายในและเข้มข้น 50 ml ภายใต้
อ่อนโยนอบ N2 ก่อนการกลั่นสูญญากาศสูงดังกล่าวข้างต้น
กรด ( ดัดแปลงจากไค et al . , 2002 ) และสารสกัดเมทานอล (
เข้มข้นแห้งระเหยที่ใช้หมุนและ 50oc
252 ทอร์ จำนวนเศษส่วนของ glycosidically ผูกพันระเหยเป็นกำลังละลาย
ผสม 100 มล. ในน้ำ 100 มิลลิลิตร ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ pH 3.5 ) ส่วนผสมที่ผ่านการย่อย
50oc 2.5 ชั่วโมงการ aglycones ออกจากกรดสกัด 3 ครั้ง กับ 50 ml
เพนเทน / ไดคลอโรมีเทน ( 1 : 1 ) เพื่อเอา aglycones และ 50 μ L มาตรฐานภายในเพิ่ม
ก่อนการกลั่นสูญญากาศสูงตามที่กล่าวไว้ก่อนหน้านี้ และ gc-fid
และการวิเคราะห์สารสกัดเข้มข้น 1 μผมวิเคราะห์ใน Hewlett Packard HP รุ่น 6890 GC
พร้อมระบบตรวจจับแบบใช้มวล 5973 .คอลัมน์ C ( , 60 hp-5 M ความยาว
0.25 มม. และความหนาของฟิล์มμ ID 0.25 เมตร ) และใช้แก๊สตัวพาเป็นฮีเลียมด้วยอัตราการไหล
2.2 มิลลิลิตร / นาที หัวฉีด ดำเนินการในโหมดแยก ( 50 : 1 ) เตาอบอุณหภูมิเริ่มต้นที่
35oc 1 นาที เลี้ยงในอัตรา 10oC / มิน ถึง 200 องศาเซลเซียส ซึ่งที่อุณหภูมินี้ 10 นาที
เอกลักษณ์ของสารระเหยและดัชนีสัมพัทธ์ ( RI ) ทำโดยการเปรียบเทียบสเปกตรัมมวล
กับห้องสมุดนิ่ง 275 , NIST 98 ห้องสมุดและ n-alkanes ( c4-c22 ) ดัชนีความคงทน .
ฟรีและวิเคราะห์บนี่เข้มข้นสารสกัดจาก Hewlett Packard รุ่น HP
6890n GC พร้อมสลัก . คอลัมน์ capillary hp-5 , ( ความยาว 30 เมตร 0.25 มม. ID และ 0.25 M
μฟิล์ม
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- จักรยาน
- กิจกรรม
- ผู้จัดการสถาบันกวดวิชา ติวเตอร์คลับ สาขา
- can have access to a wide range of infor
- เนื่องจากรหัสนี้ได้ถูกใช้ไปแล้ว
- it has done to its business information
- Cloud forest
- non-sense
- 한국말 잘하내
- และเขาต้องการที่จะบอกข่าวดีเกี่ยวกับเงิน
- GRILLE
- non-sense
- ผมพูดไม่ค่อยเก่ง
- สนุก
- เครื่องดื่มที่ฉันชอบคือ น้ำสตอเบอร์รี่ปั
- I no speak to him ba
- ดอกแคป่า
- ความคืบหน้า
- ชอบอะไรก็ซื้อ
- info
- จักรยาน
- ฉันอยากพิสูตร
- ระบุชื่อคนที่ทำ
- พื้นที่เปล่า
