2.3. Chemical analysisThe first ful

2.3. Chemical analysis
The first full expanded leaf, leaf number seven from the top was
harvested for chemical analysis. The main vein was removed
before being flash frozen in liquid nitrogen and stored at 80 C.
The samples were freeze dried and ground to a fine powder using
a steel ball mill (Retsch MM301, Retsch GmbH, Haan, Germany).
2.3.1. Extraction and determination of glucosinolates
Freeze dried plant material (40 mg) was extracted according to
Mellon, Bennett, Holst, and Williamson (2002) with some modifications.
The glucosinolates were quantified using 0.05 lmol/sample
glucotropaeolin as internal standard (AppliChem
(A5300.0020), Darmstadt, Germany) applied by an automated pipette
(HandyStep electronic repeating pipette, Brandtech Scientific
Inc., Essex, CT, USA). Seven biological replicates were extracted
per treatment and every tenth sample was extracted in duplicate
to verify reproducibility (within 95%). Glucosinolates were analysed
in randomised order by UHPLC–HR-MS on a Waters Acquity
UPLC (Milford, MA) coupled to Waters LCT-Premier time-of-flight
MS with electrospray ionisation. The glucosinolates were separated
on a Waters Acquity charged surface hybrid (CSH) C18 column
(2.1  50 mm, 1.7 lm) using a gradient of 2–30%

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.3 การวิเคราะห์ทางเคมีใบแรกขยายเต็มใบหมายเลขเจ็ดจากด้านบนได้รับการเก็บเกี่ยวสำหรับการวิเคราะห์ทางเคมี เส้นเลือดหลักจะถูกลบออกก่อนที่จะถูกแฟลชแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวและเก็บไว้ที่? 80? C. กลุ่มตัวอย่างที่ถูกแช่แข็งแห้งและบดให้เป็นผงละเอียดใช้เหล็กโรงงานลูกบอล (Retsch MM301, Retsch GmbH, Haan, เยอรมนี). 2.3 1 การสกัดและความมุ่งมั่นของ glucosinolates วัสดุจากพืชแห้งแช่แข็ง (40 มก.) ถูกสกัดตามเมลลอนเบนเน็ตต์โฮลส์และวิลเลียมสัน(2002) มีการปรับเปลี่ยนบางอย่าง. glucosinolates ถูกวัดโดยใช้ 0.05 lmol / ตัวอย่างglucotropaeolin เป็นมาตรฐานภายใน (AppliChem (A5300 0020), ดาร์มสตัด, เยอรมนี) นำไปใช้โดยอัตโนมัติปิเปต(ปิเปตซ้ำ HandyStep อิเล็กทรอนิกส์ Brandtech วิทยาศาสตร์อิงค์Essex, CT, USA) เซเว่นซ้ำถูกสกัดชีวภาพต่อการรักษาและทุกๆสิบตัวอย่างถูกสกัดในที่ซ้ำกันในการตรวจสอบการทำสำเนา(ภายใน 95%) glucosinolates วิเคราะห์เพื่อสุ่มโดยUHPLC-HR-MS ในน่านน้ำ Acquity UPLC (ฟอร์ด, แมสซาชูเซต) คู่กับน้ำ LCT นายกรัฐมนตรีเวลาของเที่ยวบินMS ที่ Ionisation electrospray glucosinolates ถูกแยกบนพื้นผิวที่เรียกเก็บน้ำAcquity ไฮบริด (CSH) คอลัมน์ C18 (2.1? 50 มิลลิเมตร 1.7 ไมครอน) โดยใช้ความลาดชัน 2-30% โดย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.3 การวิเคราะห์ทางเคมี
แรกเต็มขยายใบ จำนวนใบเจ็ดจากด้านบนคือ
เก็บเกี่ยวเพื่อการวิเคราะห์ทางเคมี เส้นเลือดหลักที่ถูกลบออก
ก่อนที่จะแฟลชแช่แข็งในไนโตรเจนเหลวที่อุณหภูมิ 80 องศาเซลเซียส และ  
จำนวนแช่แข็งตากแห้งและบดให้ละเอียดเป็นผงใช้
ลูกเหล็กบด ( mm301 retsch , แฮน retsch GmbH , Germany ) .
2.3.1 . การสกัดและการหาปริมาณกลูโคซิโนเลต
ตรึงวัสดุพืชแห้ง ( 40 มิลลิกรัมสกัดจาก
ออกแบบ เบนเน็ต โฮลส์และวิลเลียมสัน ( 2002 ) ที่มีการปรับเปลี่ยน กลูโคซิโนเลตมี quantified ใช้
+ lmol / ตัวอย่าง
glucotropaeolin เป็นมาตรฐานภายใน ( applichem
( a5300.0020 ) ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) ใช้โดยอัตโนมัติเปต
( handystep อิเล็กทรอนิกส์ซ้ำๆ เปต brandtech ทางวิทยาศาสตร์
, อิงค์ , Essex , CT , สหรัฐอเมริกา )เจ็ดนาทีสกัดชีวภาพ
ต่อการทุกสิบตัวอย่างที่สกัดด้วยซ้ำ
ตรวจสอบตรวจสอบ ( ภายใน 95% ) กลูโคซิโนเลตวิเคราะห์
ในการสั่งซื้อโดย uhplc หัวใจ– hr-ms บน uplc acquity
น้ำ ( Milford , MA ) คู่กับน้ำแอลซีที Premier เวลา - การบิน
MS ด้วยวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ionisation . การจากกัน
กลูโคซิโนเลตในน้ำ acquity ประจุพื้นผิว ไฮบริด ( csh ) c18 คอลัมน์
( 2.1  50 mm 1.7 LM ) โดยใช้การไล่ระดับสี 2 – 30%