ExperimentalPreparation of Mobile P

Experimental
Preparation of Mobile Phase
A 50-mM phosphate buffer solution to use as the mobile phase was prepared by dissolving 6.82 g of potassium phosphate monobasic (Fisher) in deionized water. The pH of the buffer was then adjusted to 2.80 by adding concentrated phosphoric acid drop-wise while monitoring with a calibrated pH meter. The solution was then diluted to 1.00 L with deionized water. To obtain an HPLC grade mobile phase the solution was filtered through a 0.22-μm nylon membrane by vacuum filtration. HPLC grade methanol was used before and after the experiment to prevent phase collapse.
Standard Preparation
Citric acid standards of 100, 200, 300, 500, and 1000 ppm were prepared from granular citric acid (Fisher) and deionized water. These were then transferred to autosampler vials for HPLC analysis.
Preparation of Samples
Eight orange juices were purchased at local supermarkets. Four were 100% orange juice: Kemps, Langers, Minute Maid, and Tropicana. Two were orange flavored drinks: Sunny D and Tang, and one was 100% mixed fruit juice: Juicy Juice. A navel orange from California was also used.
From each bottled juice a 10.00-mL aliquot was transferred to a 50-mL volumetric flask. The Tang, which had to be dissolved, was prepared by dissolving 1.01 g into a 50-mL volumetric flask. This mass was equivalent to a 10-mL sample of Tang prepared according to the instructions on the label. The navel orange sample was prepared by juicing an orange and then pipetting 10 mL of the liquid into a 50-mL volumetric flask. All 50-mL flasks were diluted to volume with deionized water. All dilute samples were filtered through a 0.45-μm filter membrane before HPLC analysis.
After an initial analysis by HPLC, all of the juices were further diluted by transferring 10 mL of the once diluted samples into new 50-mL volumetric flasks and diluting to volume with deionized water. This provided peaks that would be more accurately analyzed than the more highly concentrated samples except for Juicy Juice, which was kept at the higher concentration level for final analysis.
Instrument Preparation
An isocratic elution was carried out on a Varian ProStar HPLC system with a 50-mm × 4.6-mm Kinetex XB-C18 column (Phenomenex) with a 2.6-μm particle size and 100-Å pore size. The mobile phase was 100% 50-mM phosphate buffer at pH 2.80. The HPLC system operated at a flow rate of 0.5 mL/min, the injection volume was 5 μL, and the

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ทดลองการเตรียมความพร้อมของเฟสเคลื่อนที่
50 มม. สารละลายบัฟเฟอร์ฟอสเฟตเพื่อใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่ที่ถูกจัดทำขึ้นโดยการละลาย 6.82 กรัมของโพแทสเซียมฟอสเฟต monobasic (ฟิชเชอร์) ในน้ำกลั่นปราศจากไอออน ph ของกันชนมีการปรับไปแล้ว 2.80 โดยการเพิ่มกรดเข้มข้นหล่นฉลาดในขณะที่การตรวจสอบด้วยเครื่องวัด ph สอบเทียบ การแก้ปัญหาที่ถูกเจือจางแล้วถึง 100 ลิตรที่มีน้ำกลั่นปราศจากไอออน ที่จะได้รับเฟสเคลื่อนที่เกรด hplc การแก้ปัญหาที่ถูกกรองผ่านเยื่อไนลอน 0.22 ไมครอนโดยการกรองสูญญากาศ เมทานอล hplc เกรดถูกนำมาใช้ก่อนและหลังการทดลองเพื่อป้องกันไม่ให้ขั้นตอนการยุบ.

มาตรฐานการจัดทำมาตรฐานกรดซิตริก 100, 200, 300, 500, และ 1,000 ppm ที่เตรียมจากกรดซิตริกเม็ด (ฟิชเชอร์) และน้ำกลั่นปราศจากไอออนเหล่านี้ถูกย้ายไป autosampler ขว​​ดสำหรับการวิเคราะห์ hplc. เตรียม

ตัวอย่างน้ำผลไม้สีส้มแปดถูกซื้อได้ที่ซูเปอร์มาร์เก็ตท้องถิ่น สี่ 100% น้ำผลไม้สีส้ม: Kemps, langers สาวนาทีและทรอปิคานา สองคนเครื่องดื่มรสส้ม: แดดงและรสและเป็นหนึ่งในน้ำผลไม้ 100% ผสม: น้ำผลไม้ฉ่ำ สีส้มสะดือจากแคลิฟอร์เนียก็ใช้.
จากน้ำผลไม้บรรจุขวดแต่ละ 1000 มิลลิลิตรหารถูกย้ายไปขวดปริมาตร 50 มล. รสซึ่งต้องได้รับการละลายถูกจัดทำขึ้นโดยการละลาย 1.01 กรัมลงในขวดปริมาตร 50 มล. มวลนี้ก็เท่ากับตัวอย่าง 10 มิลลิลิตรของรสจัดทำตามคำแนะนำบนฉลาก ตัวอย่างสะดือสีส้มได้รับการจัดทำขึ้นโดยการคั้นน้ำสีส้มแล้วปิเปต 10 มล. ของของเหลวในขวดปริมาตร 50 มล.ทุกขวด 50 มล. ถูกปรับลดปริมาณการใช้น้ำกลั่นปราศจากไอออน ทั้งหมดเจือจางตัวอย่างถูกกรองผ่านเยื่อกรอง 0.45 ไมโครเมตรก่อนที่จะวิเคราะห์ hplc.
หลังจากเริ่มต้นการวิเคราะห์โดย hplc ทั้งหมดของน้ำผลไม้ที่ถูกปรับลดต่อไปโดยการโอน 10 มิลลิลิตรของสารตัวอย่างที่เจือจางครั้งใหม่ในขวดปริมาตร 50 มล. และเจือจางไป ปริมาณน้ำกลั่นปราศจากไอออนนี้ให้ยอดเขาที่จะมีมากขึ้นกว่าการวิเคราะห์อย่างถูกต้องมากขึ้นตัวอย่างที่มีความเข้มข้นสูงยกเว้นน้ำผลไม้ฉ่ำซึ่งถูกเก็บไว้ในระดับความเข้มข้นที่สูงขึ้นสำหรับการวิเคราะห์สุดท้าย. การเตรียมเครื่องมือ

elution isocratic ถูกหามออกในระบบ hplc prostar varian ด้วย 50 มม. × 4.6 มม. KINETEX คอลัมน์ XB-c18 (Phenomenex) ที่มีอนุภาคขนาด 2.6 ไมครอนและขนาดรูขุมขน 100 Åเฟสเคลื่อนที่เป็น 100% 50 มม. ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ ph 2.80 ระบบ hplc ดำเนินการที่อัตราการไหล 0.5 มล. / นาทีปริมาณการฉีดได้ 5 ไมโครลิตรและ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ทดลอง
ระยะเตรียมมือถือ
น้ำ deionized โซลูชันบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 50 มม.ใช้เป็นเฟสเคลื่อนที่เตรียม โดยยุบ g 6.82 ของโพแทสเซียมฟอสเฟต monobasic (Fisher) ในการ PH ของบัฟเฟอร์แล้วถูกปรับการ 2.80 โดยการเพิ่มกรดฟอสฟอริกเข้มข้น drop-wise ขณะตรวจสอบด้วยเครื่องวัดค่า pH calibrated โซลูชันถูกทำให้เจือจางแล้ว 1L 00 ด้วยน้ำ deionized รับระยะเคลื่อนเกรด HPLC โซลูชันที่ถูกกรองผ่านเยื่อไนล่อนเป็น$ 0.22-μm โดยเครื่องกรองสูญญากาศ HPLC เกรดเมทานอลถูกใช้ก่อน และ หลังการทดลองเพื่อทำให้ระยะยุบ
เตรียมมาตรฐาน
ถูกเตรียมจากกรดซิตริก granular (Fisher) และ deionized น้ำกรดซิตริกมาตรฐาน 100, 200, 300, 500 และ 1000 ppm เหล่านี้แล้วได้โอนไป autosampler vials สำหรับวิเคราะห์ HPLC.
เตรียมตัวอย่าง
8 น้ำส้มซื้อที่ซุปเปอร์มาร์เก็ตท้องถิ่น สี่ถูกน้ำส้ม 100%: เคมป์คอเนอร์ Langers แม่ บ้านนาที และทรอปิคานา สองได้เครื่องดื่ม flavored ส้ม: D แดด และถัง และหนึ่งเป็นน้ำผลไม้ 100% ผสม: น้ำฉ่ำ ยังใช้สะดือสีส้มจากแคลิฟอร์เนีย
จากขวดน้ำ 1000 mL ส่วนลงตัวถูกถ่ายโอนไปยังหนาว volumetric 50 mL ถัง ซึ่งมีการละลาย ถูกเตรียม โดยยุบ 1.01 g เป็นหนาวเป็น volumetric 50 mL มวลนี้เทียบเท่ากับตัวอย่าง 10 mL ถังที่เตรียมไว้ตามคำแนะนำบนฉลากได้ ตัวอย่างสีส้มสะดือถูกเตรียม โดย juicing ลูกส้ม pipetting 10 mL ของของเหลวในตัว 50 mL volumetric หนาวแล้ว ทั้งหมด 50 mL นำถูกทำให้เจือจางเพื่อปริมาณน้ำ deionized ตัวอย่างทั้งหมดที่ dilute ถูกกรองผ่านเมมเบรนกรอง 0.45-μm ก่อนวิเคราะห์ HPLC.
หลังจากการวิเคราะห์เบื้องต้นโดย HPLC ทั้งหมดของน้ำถูกเติมผสมโอน 10 mL ตัวอย่างครั้งเดียวแตกออกเข้าใหม่ 50 mL volumetric flasks และ diluting เพื่อปริมาณน้ำ deionized ซึ่งมียอดที่จะวิเคราะห์ได้แม่นยำมากขึ้นกว่ายิ่งเข้มข้นตัวอย่างยกเว้นน้ำฉ่ำ ซึ่งถูกเก็บที่ความเข้มข้นสูงกว่าระดับการวิเคราะห์ขั้นสุดท้ายสูง
เตรียมเครื่องมือ
elution isocratic คิดการถูกดำเนินการบนระบบแล้วแต่กำหนด ProStar HPLC กับ 50 mm × 4.6 มม. Kinetex XB C18 คอลัมน์ (Phenomenex) ขนาด 2.6-μm อนุภาคและขนาดรูขุมขน 100 Å เฟสเคลื่อน 100% 50 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ที่ pH 2.80 ระบบ HPLC ดำเนินการที่อัตราการไหล 0.5 mL/นาที ปริมาณฉีดได้ 5 μL และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเตรียมการทดลอง

ช่วงของมือถือที่ 50 มม.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์โซลูชันเพื่อใช้เป็นมือถือที่ขั้นตอนเตรียมไว้โดยบรรจุ 6.82 กรัมของโปแตสเซียม monobasic ฟอสเฟต(ชาวประมง)ใน deionized น้ำ. pH ของบัฟเฟอร์สำหรับที่มีการปรับถึง 2.80 เมตรลดลงโดยการเพิ่ม - ฉลาดในขณะที่การตรวจสอบด้วยค่า pH ปรับเทียบระดับอ้างอิงที่กรดฟอสฟอริคกระจุกตัวอยู่แล้ว โซลูชันที่ได้รับการเจือจาง 1 แล้ว00 L พร้อมด้วยน้ำ deionized . ในการขอรับขั้นตอนแบบพกพา คุณภาพ hplc เป็นโซลูชันที่เป็นที่กรองแล้วผ่านทางเยื่อ 0.22 - μ m ไนลอนด้วยการกรองเครื่องดูดฝุ่น โรงงานเมธานอลเกรด hplc ได้ใช้ก่อนและหลังการทดลองเพื่อป้องกันไม่ให้มาตรฐานการยุบ.

ตามมาตรฐานการเตรียมการของมะนาวน้ำกรด 100200300500 และ 1000 PPM ได้เตรียมความพร้อมจากกรดมะนาวแบบเกล็ด( Granular activated carbon )(ชาวประมง)และน้ำ deionizedเหล่านี้เป็นจากนั้นจะพาท่านไปส่งถึงยัง vials autosampler hplc สำหรับการวิเคราะห์

ซึ่งจะช่วยในการเตรียมตัวอย่างแปดน้ำผลไม้คั้นสีส้มก็ซื้อได้ที่ซุปเปอร์มาร์เก็ตท้องถิ่น สี่สีส้มเป็นน้ำผลไม้ 100% kemps langers แม่บ้านนาทีและ Tropicana อีกสองคนเป็นเครื่องดื่มรสชาติแสนอร่อยมีแสงแดดอันสดใสสีส้ม D และราชวงศ์ Tang และหนึ่งในนั้นเป็นน้ำผลไม้ผสมน้ำผลไม้ 100% มีน้ำมาก สีส้มนา ภ ีจากแคลิฟอร์เนียยังใช้.
จากน้ำผลไม้น้ำดื่มบรรจุขวดละ 1000 - aliquot มล.ก็จะพาท่านไปส่งถึงยัง 50 - กระติกน้ำที่ทางปริมาตรมล. Tang ซึ่งจะต้องถูกยุบเลิกได้ซึ่งได้รับการจัดเตรียมโดย 1.01 G เข้าสู่ 50 - กระติกน้ำที่ทางปริมาตรมล. จำนวนมากแห่งนี้มีมูลค่าเท่ากับตัวอย่าง 10 - มล.แห่งราชวงศ์ Tang ที่เตรียมไว้ตามคำแนะนำบนป้ายที่ ตัวอย่างสีส้มนา ภ ีที่เตรียมไว้โดยเครื่องสกัดน้ำผลไม้จากฟิลิปส์สีส้มที่แล้ว pipetting 10 มล.กระติกน้ำผสมน้ำยาทำความสะอาดลงใน 50 - มล.ที่เกี่ยวกับปริมาตรที่ทั้งหมด 50 มล.ใบลูกปืนหลายคนเจือจางปริมาณน้ำ deionized ทั้งหมดเจือจางตัวอย่างเป็นที่กรองแล้วผ่านทางที่ 0.45 - μ m แผ่นกรองเยื่อ hplc ก่อนการวิเคราะห์.
หลังจากที่ครั้งแรกบทวิเคราะห์โดย hplc ซึ่งทั้งหมดที่น้ำผัก - ผลไม้อีกทั้งเจือจางโดยการถ่ายโอน 10 มล.ของเมื่อเจือจางตัวอย่างใน 50 - มล.ใบลูกปืนหลายทางปริมาตรและ diluting ในระดับเสียงพร้อมด้วย deionized น้ำ.โรงแรมแห่งนี้จัดให้บริการยอดเขาที่จะวิเคราะห์ได้อย่างแม่นยำมากขึ้นกว่านี้มากกว่าโดยมากแล้วอยู่ตัวอย่างยกเว้นมีน้ำสกัดที่ได้รับการดูแลรักษาให้อยู่ในที่สูงกว่าระดับความเข้มข้นสำหรับรอบชิงชนะเลิศการวิเคราะห์.

ซึ่งจะช่วยมอบการเตรียมการที่ isocratic elution ก็ถูกหามออกไปในที่ varian prostar hplc ระบบพร้อมด้วย 50 มม.× 4.6 มม. kinetex xB - C 18 คอลัมน์( phenomenex )พร้อมด้วย 2.6 - μ m ขนาด อนุภาค และ 100 - a รูขนาด.ขั้นตอนที่เป็น 100% 50 - บัฟเฟอร์ฟอสเฟต pH อยู่ 2.80 มม. ระบบ hplc ที่ใช้งานในอัตราการไหลของน้ำที่ 0.5 นาทีมล./ระดับเสียงหัวฉีดที่เป็น 5 μl และ