on the calibration with commercial

on the calibration with commercial azadirachtin (Sigma-
Aldrich) as the standard. Total azadirachtin in the neem leaf
extracts was quantified using a calibration curve generated
from standard azadirachtin solutions in dichloromethane
(0.01–0.10 mg/ml).
Preparation of aqueous extract from neem leaf dust
For the preparation of aqueous extract, neem leave dust was
soaked in distilled water for 24 h at room temperature at dark
as described by Viana and Prates (2003). The preparations of
different concentrations were filtered and stored in amber
glass bottles at 4 °C. Every alternate day, fresh solutions of
Azadirachta leaf extract (ALE) were prepared for use.
Static bioassay for determination of LC50 and LC1
and selection of experimental doses
Forty numbers of adult A. bengalensis (age group 21–24 days)
were treated with different concentrations of ALE. Mortality
of parasites at 24-h exposure was recorded, and the mortality
percentage at each concentration level was transformed to
probits, and then, lethal concentration, 50% (LC50) was determined.
LC1 termed as toxicant threshold concentration is
derived from the probit value of mortality percentage and
linear regression curve of log concentration. Two different
experimental concentrations, 250 and 120 ppm, were selected,
one from below the LC50 level and another from below the
LC1 level.
Counting of oogenic cells
The female parasites from different age groups were induced
to moult by gently rubbing with a fine needle for a period of 1
to 10 min (varies from individual to individual) with full
exposure to intense light under an inverted binocular microscope
(Olympus CKX31). Following moult, posterior 2/3 of
the cephalothorax of the parasite was severed with a sharp
triangular surgical suture without affecting the ovary. For
collection of the oocytes, at first, a small puncture was made
through the new cuticle just above the ovary; it resulted into
release of mature oocytes first, and then, by pulling apart the
common oviduct through this exit, the entire bouquet of the
rest of the oocytes was pulled apart and taken on a glass slide.
The bunch of the oocytes was then put in a solution containing
ethanol, formalin and acetic acid (6:3:1) for clearing. Under an
inverted microscope, different maturity stages of the oocytes,
viz. ootid (Ot), pre-vitollogenic oocyte (Po), vitellogenic oocyte
(Vo) and post-vitellogenic oocyte (Pvo) were identified
according to their size and colour, and their relative abundance
was enumerated (Prime, Dewinter Optical Inc., Italy). Oocyte
count was done from 60 numbers of parasites (n=60), and the

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในการปรับเทียบกับพาณิชย์ azadirachtin (Sigma-Aldrich) เป็นมาตรฐาน รวม azadirachtin ในใบสะเดาสารสกัดถูกวัดโดยใช้สร้างเส้นโค้งการสอบเทียบจากโซลูชั่นมาตรฐาน azadirachtin ใน dichloromethane(0.01 – 0.10 mg/ml)การเตรียมสารละลายสารสกัดจากสะเดาใบฝุ่นสำหรับการเตรียมสารละลายสารสกัด สะเดาฝุ่นออกได้แช่ในน้ำกลั่นสำหรับ 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องที่มืดตามที่อธิบายไว้ โดยเวียและ Prates (2003) การเตรียมการของกรองความเข้มข้นแตกต่างกัน และเก็บไว้เป็นสีเหลืองขวดแก้วที่ 4 องศาเซลเซียส วันเว้นวัน โซลูชั่นใหม่ของสารสกัดจากใบ Azadirachta (ALE) ถูกเตรียมไว้สำหรับการใช้งานคง bioassay สำหรับกำหนด LC50 และ LC1และทดลองปริมาณเลข 40 ของผู้ใหญ่ A. bengalensis (กลุ่มอายุ 21-24 วัน)ก็ถือว่า มีความเข้มข้นแตกต่างกันของ ALE อัตราการตายของปรสิตที่รับแสง 24 ชั่วโมงบันทึก และอัตราตายเปลี่ยนเปอร์เซ็นต์ในแต่ละระดับความเข้มข้นprobits แล้ว ตาย ความเข้มข้น 50% (LC50) ที่ถูกกำหนดเรียกว่า LC1 toxicant ขีดจำกัดความเข้มข้นเป็นมาจากค่า probit ของเปอร์เซ็นต์การตาย และถดถอยเชิงเส้นโค้งของความเข้มข้นของล็อก แตกต่างกันสองทดลองความเข้มข้น 250 และ 120 ppm คัดเลือกหนึ่งจากด้านล่างระดับ LC50 และอื่นจากด้านล่างนี้ระดับ LC1การนับจำนวนของเซลล์ oogenicปรสิตหญิงจากกลุ่มอายุต่าง ๆ นำการ moult โดยถูเบา ๆ กับเข็มเป็นระยะเวลา 1ถึง 10 นาที (จากแต่ละบุคคลแตกต่างกัน) ที่เต็มไปด้วยแสงเข้มภายใต้กล้องจุลทรรศน์ส่องทางไกลที่คว่ำ(Olympus CKX31) ต่อไปนี้ moult หลัง 2 3cephalothorax ของเชื้อมาลาเรียถูกตัดขาดกับคมชัดรอยประสานผ่าตัดสามเหลี่ยมโดยไม่มีผลต่อรังไข่ สำหรับคอลเลกชันของเซลล์ไข่ ตอนแรก เจาะขนาดเล็กทำผ่านหนังใหม่อยู่เหนือรังไข่ จะส่งผลที่เป็นปล่อยเส้นผู้ใหญ่ ก่อน แล้ว โดยการดึงออกจากกันการoviduct ทั่วไปผ่านทางนี้ ทั้งช่อส่วนที่เหลือของเซลล์ไข่ถูกดึงออกจากกัน และถ่ายบนสไลด์แก้วพวงของเซลล์ไข่ถูกวางในที่ประกอบด้วยโซลูชันเอทานอล formalin และกรดอะซิติก (6:3:1) สำหรับการหักบัญชี ภายใต้การกล้องจุลทรรศน์ ขั้นตอนครบกำหนดแตกต่างกันของเซลล์ไข่ คว่ำviz. ootid (Ot), ใช้ไข่ก่อน-vitollogenic (ปอ), ใช้ไข่ vitellogenic(Vo) และระบุใช้ไข่หลัง vitellogenic (Pvo)ตามขนาด และสี และความอุดมสมบูรณ์ของญาติแก้ไขระบุ (นายก Dewinter Optical Inc. อิตาลี) ใช้ไข่ทำจำนวนจากตัวเลข 60 ของปรสิต (n = 60), และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการสอบเทียบกับ azadirachtin พาณิชย์ (Sigma-
ดิช) เป็นมาตรฐาน azadirachtin รวมในใบสะเดา
สารสกัดถูกวัดโดยใช้เส้นโค้งการสอบเทียบที่สร้างขึ้น
จากการแก้ปัญหา azadirachtin มาตรฐานในการไดคลอโรมีเทน
(0.01-0.10 mg / ml).
การเตรียมสารสกัดจากใบสะเดาฝุ่น
สำหรับการเตรียมสารสกัดฝุ่นสะเดาลาถูก
แช่ใน น้ำกลั่นเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องที่มืด
ตามที่อธิบายเวียนาและ Prates (2003) การเตรียมการของ
ความเข้มข้นที่แตกต่างกันถูกกรองและเก็บไว้ในสีเหลืองอำพัน
ขวดแก้วที่ 4 ° C ทุกวันสลับโซลูชั่นใหม่ของ
สารสกัดจากใบสะเดา (เบียร์) ได้จัดทำขึ้นสำหรับการใช้งาน.
ชีวภาพแบบคงที่สำหรับการกำหนด LC50 และ LC1
และการเลือกปริมาณการทดลอง
สี่สิบตัวเลขของผู้ใหญ่ A. bengalensis (กลุ่มอายุ 21-24 วัน)
ได้รับการรักษาที่แตกต่างกันด้วย ความเข้มข้นของเบียร์ การตาย
ของปรสิตที่การเปิดรับตลอด 24 ชั่วโมงได้รับการบันทึกและการตาย
ร้อยละในแต่ละระดับความเข้มข้นที่ได้รับการเปลี่ยน
probits และจากนั้นความเข้มข้นตาย 50% (LC50) ถูกกำหนด.
LC1 เรียกว่าเป็นความเข้มข้นของสารพิษอยู่ในเกณฑ์
ที่ได้มาจากค่า probit เปอร์เซ็นต์การตายและ
เส้นโค้งการถดถอยเชิงเส้นของความเข้มข้นของการเข้าสู่ระบบ แตกต่างกันสอง
ความเข้มข้นของการทดลอง 250 และ 120 ppm, ได้รับการคัดเลือก
จากที่ต่ำกว่าระดับ LC50 และอื่น ๆ จากด้านล่าง
ระดับ LC1.
นับของเซลล์ oogenic
ปรสิตหญิงจากกลุ่มอายุที่แตกต่างกันถูกเหนี่ยวนำให้เกิด
การลอกคราบโดยละม่อมถูด้วยเข็มที่ดีสำหรับ ระยะเวลา 1
ถึง 10 นาที (แตกต่างกันไปจากแต่ละบุคคล) ที่เต็มไปด้วย
การสัมผัสกับแสงที่รุนแรงภายใต้กล้องจุลทรรศน์สองตาฤๅษี
(โอลิมปั CKX31) ต่อไปนี้ลอกคราบ, หลัง 2/3 ของ
cephalothorax ของปรสิตที่ถูกตัดด้วยคม
เย็บแผลผ่าตัดเป็นรูปสามเหลี่ยมโดยไม่มีผลต่อรังไข่ สำหรับ
คอลเลกชันของเซลล์ไข่ในตอนแรก, เจาะขนาดเล็กที่ถูกสร้างขึ้น
ผ่านหนังกำพร้าใหม่เหนือรังไข่; มันผลใน
การเปิดตัวของเซลล์ไข่ผู้ใหญ่ก่อนแล้วโดยดึงออกจากกัน
ท่อนำไข่ที่พบบ่อยผ่านทางออกนี้ช่อทั้งหมดของ
ส่วนที่เหลือของการพัฒนาของไข่ที่ถูกดึงออกจากกันและถูกนำตัวบนสไลด์แก้ว.
พวงของการพัฒนาของไข่ที่ได้รับแล้วใส่ใน สารละลายที่มี
เอทานอลฟอร์มาลินและกรดอะซิติก (6: 3: 1) การเคลีย ภายใต้
กล้องจุลทรรศน์คว่ำขั้นตอนครบกําหนดที่แตกต่างกันของเซลล์ไข่ที่
ได้แก่ ootid (Ot) ก่อน vitollogenic ไข่ (PO), ไข่ vitellogenic
(Vo) และเซลล์โพสต์ vitellogenic (PVO) ถูกระบุ
ตามขนาดและสีของพวกเขาและความอุดมสมบูรณ์ของพวกเขา
ได้รับการแจกแจง (นายก DeWinter ออฟติคอลอิงค์, อิตาลี ) ไข่
นับได้ทำจากหมายเลข 60 ของปรสิต (n = 60) และ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการสอบเทียบกับสารอะซาดิแรคติน ( Sigma - พาณิชย์อัลดริช ) เป็นมาตรฐาน สารทั้งหมดในใบสะเดาคือ ปริมาณสารสกัดที่ใช้เป็นรูปโค้งที่สร้างขึ้นจากโซลูชั่นสารมาตรฐานในไดคลอโรมีเทน( 0.05 และ 0.10 mg / ml )การเตรียมสารสกัดน้ำจากใบสะเดา ฝุ่นสำหรับการเตรียมสารสกัดสะเดา ทิ้งฝุ่นเป็นส่วนประกอบแช่ในน้ำเป็นเวลา 24 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้องที่มืดตามที่อธิบายไว้โดย Viana และ prates ( 2003 ) การเตรียมการของความเข้มข้นต่าง ๆถูกกรองและเก็บไว้ในอำพันขวดแก้วที่อุณหภูมิ 4 องศา สลับกันทุกวัน โซลูชั่นใหม่ของสารสกัดจากใบสะเดา ( เบียร์ ) ถูกเตรียมไว้สำหรับการใช้ไม่คงที่สำหรับการหา LC1 ) และและเลือกขนาดทดลองจำนวนตัวเลขของผู้ใหญ่ . bengalensis ( อายุ 21 – 24 วัน )ได้รับการรักษาที่มีความเข้มข้นต่างกันเลย อัตราการตายของปรสิตที่แสง 24-h บันทึก และอัตราการตายเปอร์เซ็นต์ในแต่ละระดับความเข้มข้น คือเปลี่ยนไปprobits แล้วตาย , ความเข้มข้น 50% ( LC ( , 50 ) ) ได้กำหนดไว้LC1 termed เป็นเกณฑ์ความเข้มข้นของพิษที่ได้มาจากตัวของการตายและค่าร้อยละเส้นการถดถอยเชิงเส้นของระดับปูมบันทึก สองคนที่แตกต่างกันความเข้มข้น 1 , 250 และ 120 ppm มีเลือกหนึ่งจากด้านล่าง ) และอีกระดับจากด้านล่างระดับ LC1 .นับจาก oogenic เซลล์ปรสิตหญิงจากกลุ่มอายุที่แตกต่างกันถูกชักนำจะลอกคราบ โดยค่อย ๆลูบไล้กับเข็มดีเป็นระยะเวลา 1ถึง 10 นาที ( แตกต่างกันจากแต่ละบุคคล ) กับเต็มการเปิดรับแสงที่รุนแรงภายใต้กล้องจุลทรรศน์กล้องส่องทางไกลกลับหัว( Olympus ckx31 ) ต่อไปนี้ลอกคราบด้านหลัง 2 / 3 ของส่วนซีฟาโลโทแรกซ์ของปรสิตกับคมถูกตัดขาดสามเหลี่ยมรอยประสานโดยไม่มีผลต่อรังไข่ สำหรับคอลเลกชันของเซลล์ตอนแรก , เจาะขนาดเล็กถูกสร้างผ่านผิวหนังใหม่เหนือรังไข่ ; มันให้เข้าไปในปล่อยผู้ใหญ่ไข่ก่อน แล้วดึงออกจากกันโดยทั่วไปผ่านท่อนำไข่ออก , ช่อดอกไม้ทั้งหมดของส่วนที่เหลือของไข่ถูกดึงออกจากกันและถ่ายบนสไลด์แก้วพวงของไข่แล้วใส่ในสารละลายที่มีเอทานอล , ฟอร์มาลีน และกรดอะซิติก ( 6:3:1 ) สำหรับล้าง ภายใต้ฤๅษีกล้องจุลทรรศน์ที่แตกต่างกันสำหรับขั้นตอนของเซลล์ได้แก่ โอโอทิด ( OT ) , pre vitollogenic โอพี ( PO ) , vitellogenic โอโอไซต์( โว ) และโพสต์ vitellogenic โอพี ( pvo ) ระบุตามขนาดและสีของพวกเขาและความอุดมสมบูรณ์ของญาติคือระบุ ( นายก วิก ดิวินเทอร์ติค อิงค์ , อิตาลี ) โอโอไซต์นับได้ 60 ตัวเลขของปรสิต ( n = 60 ) , และ