Nuclei were released from 1 cm2 of

Nuclei were released from 1 cm2 of leaf tissue. For FCM analysis, rose (Rosa hybrid a
cv. Akito 2n=4x=28) (khosravi et al., 2008) and untreated Ocimum basilicum nuclei were
used as an internal standard, by chopping with a sharp razor blade simultaneously in the
petri dish in 400 μl of extraction buffer (CyStain-UV precise Partec). For removing the
phenolic impurities, PVP-40 was added to the buffer. Then the suspension was filtered into
small tubes through a 30 μm Celltris disposable nylon filter and were kept on ice for 10
min. For the coloration of these samples, 1.6 ml of DAPI staining solution (4´, 6-diamino-2-
phenylindole) added and samples were put into the flow cytometer and the DNA
histograms were created. The DNA content of each sample was evaluated in 10000 nuclei.
Ten leaf samples of diploid control plants and putative tetraploids were analyzed
alternately.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เผยแพร่การนิวเคลียสจาก cm2 1 ของเนื้อเยื่อใบ สำหรับการวิเคราะห์ FCM กุหลาบ (Rosa hybridAkito พันธุ์ 2n = 4 x = 28) (khosravi et al. 2008) และนิวเคลียส basilicum กะเพราไม่ผ่านใช้เป็นมาตรฐานภายใน โดยสับด้วยคมมีดโกนมีดพร้อมกันในการจานเพาะเชื้อใน μl 400 ของบัฟเฟอร์สกัด (CyStain UV Partec แม่นยำ) สำหรับการลบการสิ่งสกปรกฟีนอ PVP-40 ถูกบัฟเฟอร์ แล้ว ระงับถูกกรองเข้าสู่ขนาดเล็กท่อผ่านตัวกรองไนล่อนทิ้ง Celltris 30 ไมครอน และถูกเก็บไว้บนน้ำแข็ง 10นาที สำหรับตัวอย่างสีเหล่านี้ 1.6 ml ของโซลูชันย้อม DAPI (4´, 6-diamino - 2 -เพิ่ม phenylindole) และตัวอย่างจัดเป็น cytometer ไหลและดีเอ็นเอสร้างฮิสโตแกรม รับการประเมินเนื้อหาของแต่ละตัวอย่างดีเอ็นเอในนิวเคลียส 10000สิบใบตัวอย่างพืชควบคุมฮอโมไซกัสและ putative tetraploids ถูกวิเคราะห์สลับกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

นิวเคลียสรับการปล่อยตัวจาก 1 cm2 ของเนื้อเยื่อใบ สำหรับการวิเคราะห์ FCM กุหลาบ (Rosa ไฮบริด
พันธุ์. Akito 2n = 4x = 28) (Khosravi et al., 2008) และได้รับการรักษา Ocimum นิวเคลียส basilicum ถูก
นำมาใช้เป็นมาตรฐานภายในโดยการตัดด้วยใบมีดโกนที่คมชัดพร้อมกันใน
จานเลี้ยงเชื้อ ใน 400 ไมโครลิตรของ buffer สกัด (CyStain รังสียูวีได้อย่างแม่นยำ Partec) สำหรับการเอา
สิ่งสกปรกฟีนอล, PVP-40 ถูกบันทึกอยู่ในบัฟเฟอร์ จากนั้นระงับถูกกรองลงใน
หลอดขนาดเล็กผ่านตัวกรองไนลอน 30 ไมครอน Celltris ทิ้งและถูกเก็บไว้บนน้ำแข็งเป็นเวลา 10
นาที สำหรับสีของกลุ่มตัวอย่างเหล่านี้ 1.6 มิลลิลิตร DAPI สารละลายสีย้อม (4', 6-diamino-2-
phenylindole) เพิ่มและตัวอย่างที่ถูกใส่ลงไปในการไหล cytometer และดีเอ็นเอ
histograms ถูกสร้างขึ้น เนื้อหาดีเอ็นเอของแต่ละตัวอย่างถูกประเมินใน 10000 นิวเคลียส.
สิบตัวอย่างใบของพืชควบคุมซ้ำและ tetraploids สมมุติถูกนำมาวิเคราะห์
สลับกัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ถูกปล่อยออกมาจากนิวเคลียส 1 ตร. ซม. เนื้อใบ สำหรับการวิเคราะห์ FCM กุหลาบ ( Rosa Hybrid เป็นพันธุ์ คิโตะ 2n = 4x = 28 ) ( khosravi et al . , 2008 ) และดิบ กะเพราโหระพานิวเคลียสคือใช้เป็นมาตรฐานภายใน โดยการตัดด้วยคมมีดพร้อมกันในจานแก้วใน 400 μ L ของบัฟเฟอร์แยก ( cystain ยูวี แม่นยำ พาร์เท็ค ) สำหรับลบฟีโนลิก สิ่งสกปรก pvp-40 ถูกเพิ่มไปยังบัฟเฟอร์ แล้วถูกระงับในกรองหลอดเล็ก ๆผ่าน 30 μ M celltris ผ้าอ้อมกรองไนลอน และเก็บไว้ในที่เย็นสำหรับ 10นาที สำหรับสีของตัวอย่างเหล่านี้ 1.6 ml dapi staining โซลูชั่นใหม่ ( 4 6-diamino-2 - ,phenylindole ) และเพิ่มจำนวนใส่ลงในการใช้โมโนและ ดีเอ็นเอฮิสโตแกรมถูกสร้างขึ้น ดีเอ็นเอ เนื้อหาของแต่ละตัวอย่างทดลองใน 10000 นิวเคลียส .10 ตัวอย่างใบพืชควบคุม และวิเคราะห์การเกิดเส้นใยเทตราพล ด์สลับกัน