The major factors for a successful

The major factors for a successful SSF process are the
selection of micro-organisms, the substrate, process optimization,
product isolation and purification (Gupta et al.,
2002). Therefore, preliminary experiments were conducted
with modification as per Murthy and Naidu (2010) to select
a suitable nitrogen source (either a 10% yeast extract (w/w)
or 10% polypeptone (w/w) or both mixed 1:1) to supplement
the PPP in the SSF. A suitable medium that synergized PPP
was used in further investigations of fermentation with moisture
modulation using mineral solutions containing trace salts
CuSO4·5H2O, ZnSO4·7H2O and FeSO4·7H2O that had been sterilized
at 121 ◦C for 20min. The cooled sterilized solid substrate
(10 g) was placed in a 250ml conical flask, inoculated with 10%
of inoculum containing 2.6 × 106 conidia/ml, mixed uniformly
and incubated at 30 ◦C for 96h. Protease was extracted by suspending
the fermented substrate in distilled water (1:5) using
182 food and bioproducts processing 9 6 ( 2 0 1 5 ) 180–188
an orbital shaker at 30 ◦C, 150 rpm for 60min. The extracts
were filtered through Whatman No. 1 filter paper, centrifuged
at 5000 × g at room temperature for 10min and the supernatant
obtained was used as the acid protease.
The acid protease activity was determined as described by
Rowan and Buttle (1994) with several modifications. The reaction
mixture containing 0.4ml of 0.2% azocasein (dissolved in
20mM NaPO4 buffer, pH 5.7) and 0.5ml of the extracted extracellular
enzyme was heated at 55 ◦C for 60min. The mixture
was cooled in ice for 5min, then 0.5ml 10% trichloroacetic
acid was added to. This was followed by incubation on ice
for 20min and centrifugation at 10,000 × g for 15min. The
control sample had the reaction mixture same as above but
the enzyme was added after TCA. The supernatants were
transferred to fresh tubes, and the absorbance was recorded
at 440nm using a spectrophotometer (UV-2550, Shimadzu,
Kyoto, Japan). One unit of protease activity was defined as
the amount of enzyme needed to produce an increase of one
absorbance unit per 30min at 440nm under defined reaction
conditions and expressed as units/g potato pulp.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ปัจจัยสำคัญสำหรับกระบวนการ SSF ประสบความสำเร็จคือการของจุลินทรีย์ พื้นผิว การปรับ ปรุงกระบวนการแยกผลิตภัณฑ์และทำให้บริสุทธิ์ (คุปตะ et al.,2002) . ดังนั้น ได้ดำเนินการทดลองเบื้องต้นพร้อมปรับเปลี่ยนตาม Murthy และ Naidu (2010) เพื่อเลือกเป็นแหล่งไนโตรเจนที่เหมาะสม (อย่างใดอย่างหนึ่งใน 10% ยีสต์สารสกัด (w/w)หรือ polypeptone 10% (w/w) หรือทั้งสองอย่างผสม 1:1) เพื่อเสริมPPP ใน SSF กลางที่เหมาะสมที่ synergized PPPใช้ในการสืบสวนของการหมักมีความชื้นปรับใช้โซลูชันที่ประกอบด้วยติดตามเกลือแร่CuSO4·5H2O, ZnSO4·7H2O และ FeSO4·7H2O ที่ได้รับการฆ่าเชื้อที่ ◦C 121 20 นาที พื้นผิวไม้ที่ผ่านการฆ่าเชื้อเย็น(10 กรัม) ถูกวางลงในขวดรูปกรวยขนาด 250 มล. inoculated 10%ของ inoculum ที่ประกอบด้วย 2.6 × 106 conidia/ml ผสมอย่างสม่ำเสมอและรับการกกที่ 30 ◦C สำหรับ 96h โปรติเอสที่ถูกแยก ด้วยการหยุดพื้นผิวหมักโดยใช้น้ำกลั่น (1:5)อาหารและประมวลผล 9 6 (2 0 1 5) 180-188 วภัณฑ์ 182การปั่นของวงโคจรที่ 30 ◦C, 150 rpm สำหรับ 60 นาที สารสกัดกรองผ่านกระดาษกรอง Whatman เลข 1 ผลิตภัณฑ์ที่ 5000 × g ที่อุณหภูมิห้อง 10 นาทีและ supernatantรับเป็นโปรติเอสกรดกำหนดกิจกรรมโปรติเอสกรดตามที่อธิบายไว้โดยRowan และ Buttle (1994) มีหลายการปรับเปลี่ยน การเกิดปฏิกิริยาส่วนผสมที่ประกอบด้วย 0.4ml azocasein 0.2% (ละลายใน20 mM NaPO4 บัฟเฟอร์ pH 5.7) และ 0.5 ml ของการสกัดสารเอนไซม์ถูกความร้อนที่ 55 ◦C สำหรับ 60 นาที ส่วนผสมความร้อนในน้ำแข็ง 5 นาที trichloroacetic 10% 0.5ml แล้วกรดถูก แล้วกกไข่บนน้ำแข็งหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 × g สำหรับ 15 นาทีและ 20 นาทีตัวอย่างควบคุมที่มีส่วนผสมของปฏิกิริยาเหมือนข้างต้น แต่เอนไซม์นี้ถูกเพิ่มหลังจาก TCA ได้ supernatantsโอนย้ายไปหลอดที่สด และค่าการบันทึกที่ 440nm ใช้สเปค (UV-2550, Shimadzuเกียวโต ญี่ปุ่น) หนึ่งหน่วยกิจกรรมโปรติเอสถูกกำหนดเป็นปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการผลิตเพิ่มขึ้นหนึ่งหน่วยค่าต่อที่ 440nm ภายใต้ปฏิกิริยาที่กำหนด 30 นาทีเงื่อนไข และแสดงเป็นหน่วย/กรัมกากมันฝรั่ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปัจจัยที่สำคัญสำหรับกระบวนการ SSF ที่ประสบความสำเร็จคือ
การเลือกของจุลินทรีย์สารตั้งต้น, การเพิ่มประสิทธิภาพกระบวนการ
แยกสินค้าและการทำให้บริสุทธิ์ (Gupta et al.,
2002) ดังนั้นการทดลองเบื้องต้นได้ดำเนินการ
กับการปรับเปลี่ยนตามความ Murthy และไน (2010) เพื่อเลือก
แหล่งไนโตรเจนที่เหมาะสม (ทั้งสารสกัด 10% ยีสต์ (w / w)
หรือ% polypeptone 10 (w / w) หรือทั้งสองอย่างผสม 1: 1) เพื่อเสริม
พรรคพลังประชาชนใน SSF กลางที่เหมาะสมที่ synergized PPP
ถูกนำมาใช้ในการสืบสวนต่อไปของการหมักมีความชื้น
เอฟเอ็มโดยใช้โซลูชั่นที่มีเกลือแร่ร่องรอย
CuSO 4 · 5H2O, ZnSO4 · 7H2O และ FeSO4 · 7H2O ที่ได้รับการฆ่าเชื้อ
ที่อุณหภูมิ 121 ◦Cสำหรับ 20min ระบายความร้อนฆ่าเชื้อพื้นผิวที่เป็นของแข็ง
(10 กรัม) ถูกวางไว้ในขวดรูปกรวยขนาด 250ml เชื้อ 10%
ของเชื้อที่มี 2.6 × 106 conidia / ml ผสมสม่ำเสมอ
และบ่มวันที่ 30 ◦Cสำหรับ 96h โปรติเอสถูกสกัดโดยการระงับ
พื้นผิวหมักในน้ำกลั่น (1: 5) โดยใช้
อาหารและชีวภาพ 182 ประมวลผล 6 9 (2 0 1 5) 180-188
ปั่นโคจรวันที่ 30 ◦C 150 รอบต่อนาทีสำหรับ 60 นาที สารสกัด
ถูกกรองผ่าน Whatman ฉบับที่ 1 กระดาษกรองหมุนเหวี่ยง
ที่ 5000 ×กรัมที่อุณหภูมิห้องนาน 10 นาทีและใส
ได้ถูกใช้เป็นน้ำย่อยกรด.
กิจกรรมน้ำย่อยกรดถูกกำหนดตามที่อธิบายไว้โดย
Rowan และ Buttle (1994) ที่มีหลาย การปรับเปลี่ยน ปฏิกิริยา
ส่วนผสมที่มี 0.4ml 0.2% azocasein (ละลายใน
20mm NaPO4 บัฟเฟอร์ค่า pH 5.7) และ 0.5ml ของสารสกัด
เอนไซม์ที่ถูกความร้อนที่ 55 ◦Cสำหรับ 60 นาที ส่วนผสมที่
ถูกระบายความร้อนในน้ำแข็ง 5 นาทีแล้ว 0.5ml 10% ไตรคลอโร
กรดถูกเพิ่มเข้ามา นี้ตามด้วยการบ่มบนน้ำแข็ง
สำหรับ 20min และหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 ×กรัมสำหรับ 15 นาที
ควบคุมตัวอย่างมีผสมปฏิกิริยาเหมือนข้างบน แต่
เอนไซม์ที่ถูกเพิ่มเข้ามาหลังจาก TCA supernatants ถูก
โอนไปยังหลอดสดและการดูดกลืนแสงที่ถูกบันทึกไว้
ที่ 440nm ใช้สเปก (UV-2550, Shimadzu,
เกียวโตญี่ปุ่น) หนึ่งหน่วยของกิจกรรมโปรติเอสถูกกำหนดเป็น
ปริมาณของเอนไซม์ที่จำเป็นในการผลิตเพิ่มขึ้นของหนึ่ง
หน่วยการดูดกลืนแสงต่อ 30 นาทีที่ 440nm ภายใต้ปฏิกิริยากำหนด
เงื่อนไขและแสดงเป็นหน่วย / เยื่อกรัมมันฝรั่ง