Garlic and sample preparationFresh

Garlic and sample preparation
Fresh garlic was purchased from the local market in Pingtung (Taiwan, ROC). Peeled fresh garlic was freeze dried in a partial vacuum using the Labconco (Missouri, USA) freeze dry system. The freeze-dried garlic was ground to a ne texture in a mechanical grinder and sieved. The powder obtained was stored in an airtight container until use.
Garlic powder was soaked thoroughly in sterile distilled water and vortexed using a vortex mixer at room temperature before the ex- periments. An aliquot (aqueous extract of garlic powder, AEGP) was centrifuged and ltered through a 0.2- m pore size lter for in vitro antibacterial experiments. A mixture of garlic powder suspended in water (GPSW) was used for in vivo experiments on growth and disease resistance. The concentration of allicin in each preparation was deter- mined and quanti ed with reversed-phase high-performance liquid chromatography (HPLC) and a diode-array UV detector described by Arnault et al. (2003).
2.2. HPLC analysis
Allicin standard solution and 1-heptanesulfonic acid sodium salt (HSA) were purchased from ChromaDex (California, USA) and J.T. Baker (New Jersey, USA), respectively. Acetonitrile, methanol, and other reagents were obtained from Merck (Darmstadt, Germany). Water was puri ed with a Milli-Q water-puri cation system (Merck Millipore, Massachusetts).
Routine analysis of garlic extracts was performed with a Waters (Massachusetts, USA) 616 pump and a Waters 996 diode-array detector (DAD). Compounds were separated on a 150×3.9 mm I.D. 4- m parti- cle Waters Nova-Pak C18 column at 26 °C and a UV detector operated at 208 nm. The column ow-rate was 0.4 ml/min. The mobile phase consisted of (A) 20 mM sodium dihydrogen phosphate+10 mM HSA, pH 2.1 (adjusted with orthophosphoric acid 85%) and (B) acetonitrile 20 mM sodium dihydrogen phosphate+10 mM HSA, pH 2.1 (50:50, v/v). The gradient program used is shown in Table 1.TheDADdetection was performed in the range of 190 400 nm. The sample volume injected was 10 l. Data acquisition was performed with Millennium software from Waters.
2.3. Pathogenic bacteria
Field isolates of S. iniae were provided by Dr. Chin-I Chang of the Fisheries Research Institute under the Council of Agriculture (Keelung, Taiwan, ROC) and were maintained on tryptic soy agar (Difco, supplemented with 1.5% NaCl; TSA) blood agar (supplemented with 5% sheep blood) at 28 °C. The subcultures were grown under

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กระเทียมและเตรียมตัวอย่าง
กระเทียมสดที่ซื้อมาจากตลาดในประเทศในผิงตง (ไต้หวัน) ปอกเปลือกกระเทียมสดแช่แข็งแห้งในบางส่วนสูญญากาศใช้ Labconco (Missouri, USA) ระบบแช่แข็งแห้ง กระเทียมแห้งถูกบดเนื้อตะวันออกเฉียงเหนือในเครื่องบดกลและร่อน ผงที่ได้ถูกเก็บไว้ในภาชนะที่ใช้จน.
ผงกระเทียมให้ละเอียดแช่ในน้ำกลั่นผ่านการฆ่าเชื้อและการ vortex ใช้ผสมน้ำวนที่อุณหภูมิห้องก่อนที่จะ periments อดีต aliquot (สารสกัดผงกระเทียม AEGP) ได้รับการหมุนเหวี่ยงและ ltered ผ่าน 0.2- เมตรกรองขนาดรูขุมขนสำหรับการทดลองในหลอดทดลองต้านเชื้อแบคทีเรีย ส่วนผสมของกระเทียมผงที่ลอยอยู่ในน้ำ (GPSW) ที่ใช้สำหรับการทดลองในร่างกายต่อการเจริญเติบโตและความต้านทานโรค ความเข้มข้นของอัลลิซิในการเตรียมการแต่ละคนถูกยับยั้งการทำเหมืองแร่และเอ็ดกับ quanti กลับเฟสที่มีประสิทธิภาพสูงของเหลว chromatography (HPLC) และไดโอดอาร์เรย์เครื่องตรวจจับรังสียูวีอธิบายโดย Arnault et al, (2003).
2.2 การวิเคราะห์ HPLC
อัลลิซิสารละลายมาตรฐานและ 1 heptanesulfonic เกลือโซเดียมกรด (HSA) ซื้อจาก ChromaDex (แคลิฟอร์เนียสหรัฐอเมริกา) และ JT เบเกอร์ (นิวเจอร์ซีย์สหรัฐอเมริกา) ตามลำดับ acetonitrile, เมทานอลและสารเคมีอื่น ๆ ที่ได้รับจากเมอร์ค (ดาร์มสตัด, เยอรมนี) น้ำเป็นเอ็ดกับ Puri Milli-Q ระบบไอออนบวกน้ำปูรี (เมอร์ค, แมสซาชูเซต).
การวิเคราะห์ประจำของสารสกัดกระเทียมได้ดำเนินการกับน้ำ (แมสซาชูเซต, สหรัฐอเมริกา) 616 เครื่องสูบน้ำและน้ำ 996 เครื่องตรวจจับไดโอดอาร์เรย์ (DAD) สารประกอบถูกแยกออกบน 150 × 3.9 มม ID 4 มพาร์ทิชัน CLE น้ำโนวาปากคอลัมน์ C18 ที่ 26 องศาเซลเซียสและเครื่องตรวจจับรังสียูวีที่ดำเนินการใน 208 นาโนเมตร คอลัมน์โอ๊ยอัตรา 0.4 มล. / นาที เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย (A) 20 มิลลิโซเดียมไดไฮโดรเจนฟอสเฟต + 10 มิลลิ HSA พีเอช 2.1 (ปรับด้วยกรด orthophosphoric 85%) และ (ข) acetonitrile 20 มิลลิโซเดียมฟอสเฟต dihydrogen + 10 มิลลิ HSA พีเอช 2.1 (50:50 v / v) โปรแกรมการไล่ระดับสีที่ใช้แสดงในตารางที่ 1.TheDADdetection ได้ดำเนินการในช่วง 190 400 นาโนเมตร ปริมาณตัวอย่างฉีดเป็น 10 ลิตร เก็บข้อมูลได้ดำเนินการกับซอฟแวร์มิลเลนเนียมจากน้ำ.
2.3 เชื้อแบคทีเรียที่ทำให้เกิดโรค
ที่แยกสาขาเอส iniae มีให้โดยดร. ชินฉันช้างวิจัยสถาบันประมงภายใต้สภาเกษตร (Keelung, ไต้หวัน, ROC) และได้รับการดูแลในถั่วเหลือง tryptic วุ้น (Difco, เสริมด้วย 1.5% โซเดียมคลอไรด์; ทีเอสเอ) วุ้นเลือด (เสริมด้วย 5% เลือดแกะ) วันที่ 28 ° C วัฒนธรรมปลูกภายใต้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กระเทียมสดกระเทียมตัวอย่างการเตรียม
ซื้อจากตลาดท้องถิ่นใน Pingtung ( ROC , ไต้หวัน ) กระเทียมสดปอกเปลือกถูกตรึงแห้งในสูญญากาศบางส่วนใช้แล็บคอนโก้ ( USA Missouri ) ตรึงระบบแห้ง กระเทียมแห้งแช่แข็งเป็นเนื้อดินความเร็วในเครื่องบดทางกลและขนาด . ผงที่ได้มาเก็บไว้ในคอนเทนเนอร์ที่ airtight
จนใช้กระเทียมผงเปียกชุ่มทั่วเป็นหมันน้ำกลั่นและ vortexed ใช้ Vortex Mixer ที่อุณหภูมิห้องก่อน อดีต periments . เป็นส่วนลงตัว ( สารสกัดน้ำผงกระเทียม , aegp ) และระดับ ltered ผ่าน 0.2 M ขนาดรูพรุน lter ในแบคทีเรีย ผลการทดลองที่มีส่วนผสมของกระเทียมผงแขวนลอยในน้ำ ( gpsw ) ใช้ในสัตว์ทดลองต่อการเจริญเติบโตและภูมิต้านทานโรค ความเข้มข้นของแต่ละสารในการเตรียมการห้ามปราม - mined และการไฟฟ้าเอ็ดกับ reversed-phase high-performance liquid chromatography ( HPLC ) และไดโอดเรย์ UV เครื่องไว้โดย อาร์นัลท์ et al . ( 2546 ) .
2.2 .
การวิเคราะห์ HPLCสารมาตรฐานกรดและสารละลายเกลือโซเดียม 1-heptanesulfonic ( HSA ) ซื้อจาก chromadex ( อเมริกา ) และจอห์น เทลเลอร์ เบเกอร์ ( สหรัฐอเมริกานิวเจอร์ซีย์ ) ตามลำดับ ไน เมทานอลและสารเคมีอื่น ๆที่ได้รับจากเมอร์ค ( ดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) น้ำคือ ปุริมด้วย milli-q น้ในระบบ ( เมอร์คมิลลิพอร์
, แมสซาชูเซตส์ )การวิเคราะห์สารสกัดกระเทียมได้ตามปกติด้วยน้ำ ( Massachusetts , USA ) แต่ปั๊มและน้ำว่าไดโอดเรย์ตรวจจับ ( พ่อ ) สารประกอบที่แยกจากกันบน 150 × 3.9 มม. บัตร 4 - ม. พรรคเล็กน้ำ c18 โนวาปาร์คคอลัมน์ที่ 26 °องศาเซลเซียสและ UV เครื่องดำเนินการ 208 nm . คอลัมน์ โอ๊ย ร้อยละ 0.4 มิลลิลิตรต่อนาที เฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วย ( ก ) โซเดียมฟอสเฟต dihydrogen 20 มม. 10 มม. HSA , pH 21 ( ปรับด้วยออร์โธฟอสฟอริกแอซิด 85% ) และ ( ข ) โซเดียมฟอสเฟต dihydrogen ไน 20 มม. 10 มม. HSA , pH 2.1 ( 50 , V / V ) การไล่ระดับสี โปรแกรมที่ใช้แสดงดังตารางที่ 1.thedaddetection แสดงในช่วง 190 400 นาโนเมตร ตัวอย่างปริมาณการฉีดได้ 10 ลิตร ข้อมูลแสดงกับสหัสวรรษซอฟต์แวร์จากน้ำ .
2.3 แบคทีเรีย เชื้อโรค เชื้อ S .
ฟิลด์iniae มีให้โดย ดร. chin-i ช้างของสถาบันวิจัยประมงภายใต้สภาการเกษตร ( Keelung , ไต้หวัน , ROC ) และถูกเก็บรักษาไว้บนอาหารวุ้นถั่วเหลือง ( difco เสริมด้วย 1.5% เกลือ ; เลือด ( TSA ) เสริมด้วย 5 % แกะเลือด 28 ° C ) ที่พัฒนาจนเติบโตภายใต้