There remains a need for rapid, spe

There remains a need for rapid, specific and sensitive assays for the detection of bacterial indicatorsfor water quality monitoring. In this study, a strategy for rapid detection of Escherichia coli in drinkingwater has been developed. This strategy is based on the use of the substrate 4-methylumbelliferyl- _-d-glucuronide (MUG), which is hydrolyzed rapidly by the action of E. coli _-d-glucuronidase (GUD)enzyme to yield a fluorogenic 4-methylumbelliferone (4-MU) product that can be quantified and relatedto the number of E. coli cells present in water samples. In this study, the detection time requiredfor the biosensor response ranged between 20 and 120 min, depending on the number of bacteria inthe sample. This approach does not need extensive sample processing with a rapid detection capabil-ity. The specificity of the MUG substrate was examined in both, pure cultures of non-target bacterialgenera such as Klebsiella, Salmonella, Enterobacter and Bacillus. Non-target substrates that included 4-methylumbelliferyl- _-d-galactopyranoside (MUGal) and l-leucine _-naphthylamide aminopeptidase(LL _-N) were also investigated to identify nonspecific patterns of enzymatic activities in
E. coli. GUDactivity was found to be specific for E. coli and no further enzymatic activity was detected by otherspecies.
In addition, fluorescence assays were performed for the detection of E. coli to generate standardcurves; and the sensitivity of the GUD enzymatic response was measured and repeatedly determinedto be less than 10 E. coli cells in a reaction vial. The applicability of the method was tested by perform-ing multiple fluorescence assays under pure and mixed bacterial flora in environmental samples. Theresults of this study showed that the fluorescence signals generated in samples using specific substratemolecules can be utilized to develop a bio-sensing platform for the detection of E. coli in drinking water.Furthermore, this system can be applied independently or in conjunction with other methods as a partof an array of biochemical assays in order to reliably detect E. coli in water.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มียังคงต้องการอย่างรวดเร็ว เฉพาะ และสำคัญ assays ตรวจการตรวจสอบคุณภาพน้ำเชื้อแบคทีเรีย indicatorsfor ในการศึกษานี้ กลยุทธ์การตรวจอย่างรวดเร็วของ Escherichia coli ใน drinkingwater ได้รับการพัฒนา กลยุทธ์นี้จะขึ้นอยู่กับการใช้พื้นผิว 4-methylumbelliferyl-_-d-glucuronide (MUG), ซึ่งเป็น hydrolyzed อย่างรวดเร็ว โดยการกระทำของเอนไซม์ (GUD) _-d-glucuronidase E. coli ให้ผลิตภัณฑ์ (หมู่ 4) 4-methylumbelliferone fluorogenic ที่สามารถ quantified และ relatedto จำนวนเซลล์ E. coli ในน้ำตัวอย่าง ในการศึกษานี้ requiredfor เวลาตรวจสอบการตอบสนอง biosensor อยู่ในช่วงระหว่าง 20 และ 120 นาที ขึ้นอยู่กับจำนวนแบคทีเรียในตัวอย่าง วิธีการนี้ไม่จำเป็นต้องประมวลผล ด้วยการตรวจสอบอย่างรวดเร็ว capabil-ity อย่างกว้างขวาง Specificity ของพื้นผิว MUG ถูกตรวจสอบในวัฒนธรรมทั้ง บริสุทธิ์ของ bacterialgenera ไม่ใช่เป้าหมายเช่น Klebsiella ระดับ Enterobacter และคัด พื้นผิวไม่ใช่เป้าหมายที่ 4-methylumbelliferyl-_-d-galactopyranoside (MUGal) และ aminopeptidase _ naphthylamide l leucine (LL _ N) ยังถูกสอบสวนเพื่อระบุเจาะจงรูปแบบของกิจกรรมเอนไซม์ในระบบ E. coli GUDactivity พบได้เฉพาะใน E. coli และไป มีกิจกรรมของเอนไซม์ในระบบพบ โดย otherspecies นอกจากนี้ ดำเนิน fluorescence assays สำหรับการตรวจพบ E. coli สร้าง standardcurves และมีวัดความไวของการตอบสนองต่อเอนไซม์ในระบบของ GUD และซ้ำ ๆ determinedto มีน้อยกว่า 10 เซลล์ E. coli ในคอนแทคปฏิกิริยา ความเกี่ยวข้องของวิธีทดสอบ โดยใช้-ing fluorescence หลาย assays ภายใต้พืชแบคทีเรียบริสุทธิ์ และผสมในตัวอย่างสิ่งแวดล้อม Theresults การศึกษานี้แสดงให้เห็นว่า สามารถใช้สัญญาณ fluorescence ที่สร้างในตัวอย่างใช้ substratemolecules การพัฒนาแพลตฟอร์มตรวจวัดทางชีวภาพสำหรับการตรวจพบ E. coli ในน้ำดื่ม นอกจากนี้ ระบบนี้สามารถใช้อย่างอิสระ หรือร่วมกับวิธีอื่น ๆ เป็นส่วนหนึ่งของอาร์เรย์ของชีวเคมี assays เพื่อได้ตรวจพบ E. coli ในน้ำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ยังคงมีความจำเป็นในการอย่างรวดเร็วการตรวจที่เฉพาะเจาะจงและมีความสำคัญในการตรวจหาแบคทีเรียน้ำ indicatorsfor การตรวจสอบคุณภาพ ในการศึกษานี้กลยุทธ์สำหรับการตรวจสอบอย่างรวดเร็วของเชื้อ Escherichia coli ใน DrinkingWater ได้รับการพัฒนา กลยุทธ์นี้จะขึ้นอยู่กับการใช้งานของสารตั้งต้นที่ 4 methylumbelliferyl- _-D-glucuronide (แก้ว) ซึ่งเป็นไฮโดรไลซ์อย่างรวดเร็วโดยการกระทำของเชื้อ E. coli _-D-glucuronidase (GUD) เอนไซม์ที่จะให้ผลการแจง 4 methylumbelliferone (4-MU) ผลิตภัณฑ์ที่สามารถวัดและ relatedto จำนวนของเชื้อ E. coli เซลล์อยู่ในตัวอย่างน้ำ ในการศึกษานี้การตรวจสอบเวลาการตอบสนอง requiredfor ไบโอเซนเซอร์ที่อยู่ในช่วงระหว่าง 20 และ 120 นาทีขึ้นอยู่กับจำนวนของแบคทีเรีย inthe ตัวอย่าง วิธีการนี้ไม่จำเป็นต้องมีการประมวลผลตัวอย่างกว้างขวางด้วยการตรวจสอบอย่างรวดเร็ว capabil-ity ความจำเพาะของพื้นผิวแก้วที่ถูกตรวจสอบทั้งในวัฒนธรรมอันบริสุทธิ์ของ bacterialgenera ไม่ใช่เป้าหมายเช่น Klebsiella, Salmonella, Enterobacter และ Bacillus พื้นผิวที่ไม่ใช่เป้าหมายที่รวม 4 methylumbelliferyl- _-D-galactopyranoside (MUGal) และ l-leucine _-naphthylamide aminopeptidase (LL _-N)
ถูกตรวจสอบยังระบุรูปแบบเชิญชมกิจกรรมของเอนไซม์ในอี coli GUDactivity ถูกพบว่าเป็นที่เฉพาะเจาะจงสำหรับเชื้อ E. coli และไม่มีเอนไซม์ต่อไปได้รับการตรวจพบโดย otherspecies.
นอกจากนี้ยังมีการตรวจการเรืองแสงได้ดำเนินการในการตรวจหาเชื้อ E. coli ในการสร้าง standardcurves; และความไวของการตอบสนองของเอนไซม์ GUD วัดซ้ำแล้วซ้ำอีก determinedto น้อยกว่า 10 เซล E.coli ในขวดปฏิกิริยา การบังคับใช้ของวิธีการที่ได้รับการทดสอบโดยการดำเนินการตรวจไอเอ็นจีเรืองแสงภายใต้หลายแบคทีเรียบริสุทธิ์และผสมในตัวอย่างด้านสิ่งแวดล้อม theresults การศึกษาครั้งนี้แสดงให้เห็นว่าสัญญาณการเรืองแสงที่สร้างขึ้นในตัวอย่างใช้ substratemolecules เฉพาะสามารถนำไปใช้ในการพัฒนาแพลตฟอร์มชีวภาพสำหรับการตรวจสอบตรวจจับของเชื้อ E. coli ดื่ม water.Furthermore ระบบนี้สามารถนำมาใช้เป็นอิสระหรือใช้ร่วมกับวิธีการอื่น ๆ เป็น partof อาร์เรย์ของการตรวจทางชีวเคมีเพื่อตรวจสอบความน่าเชื่อถือเชื้อ E. coli ในน้ำ