DREB1/CBF genes, known as major reg

DREB1/CBF genes, known as major regulators of plant stress responses, are rapidly and transiently induced by low temperatures. Using a yeast one-hybrid screening, we identified a putative Phytochrome-Interacting bHLH Factor (OsPIF14), as binding to the OsDREB1B promoter. bHLH proteins are able to bind to hexameric E-box (CANNTG) or N-box (CACG(A/C)G) motifs, depending on transcriptional activity. We have shown that OsPIF14 binds to the OsDREB1B promoter through two N-boxes and that the flanking regions of the hexameric core are essential for protein–DNA interaction and stability. We also showed that OsPIF14 down-regulates OsDREB1B gene expression in rice protoplasts, corroborating the OsPIF14 repressor activity observed in the transactivation assays using Arabidopsis protoplasts. In addition, we showed that OsPIF14 is indeed a phytochrome interacting factor, which preferentially binds to the active form (Pfr) of rice phytochrome B. This raises the possibility that OsPIF14 activity might be modulated by light. However, we did not observe any regulation of the OsDREB1B gene expression by light under control conditions. Moreover, OsPIF14 gene expression was shown to be modulated by different treatments, such as drought, salt, cold and ABA. Interestingly, OsPIF14 showed also a specific cold-induced alternative splicing. All together, these results suggest the possibility that OsPIF14 is involved in cross-talk between light and stress signaling through interaction with the OsDREB1B promoter. Although in the absence of stress, OsDREB1B gene expression was not regulated by light, given previous reports, it remains possible that OsPIF14 has a role in light modulation of stress responses.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

DREB1/CBF ยีน เป็นอุปกรณ์สำคัญของการตอบสนองความเครียดของพืช ได้อย่างรวดเร็ว และ transiently เกิดจากอุณหภูมิต่ำ เราใช้การคัดกรองหนึ่งผสมยีสต์ ระบุว่าการอ้างว่าฝา Phytochrome โต้ตอบ bHLH ปัจจัย (OsPIF14), เป็นผูกกับโปรโมเตอร์ OsDREB1B bHLH โปรตีนจะสามารถผูก hexameric E-กล่อง (CANNTG) หรือ N-กล่อง (ลวดลาย CACG(A/C)G) ขึ้นอยู่กับกิจกรรม transcriptional เราได้แสดงว่า OsPIF14 binds ไปยังโปรโมเตอร์ OsDREB1B ผ่าน N สองกล่อง และภูมิภาค flanking แกน hexameric สำคัญโปรตีนดีเอ็นเอโต้และเสถียรภาพ เรายังพบว่า OsPIF14 ลงควบคุมการแสดงออกของยีน OsDREB1B ข้าวพลาสต์ corroborating กิจกรรม repressor OsPIF14 ใน assays transactivation ที่ใช้ Arabidopsis พลาสต์ นอกจากนี้ เราพบว่า OsPIF14 แน่นอนจะ phytochrome interacting ตัว ซึ่งผูกเป็นไปแบบใช้งานอยู่ (Pfr) ของข้าว phytochrome b ทำให้ความเป็นไปได้ที่ OsPIF14 กิจกรรมอาจมีการสร้างเสถียรภาพ โดยแสง อย่างไรก็ตาม เราไม่ได้สังเกตการควบคุมของยีน OsDREB1B แสงภายใต้สภาวะควบคุม นอกจากนี้ ที่แสดงยีน OsPIF14 ให้สันทัด โดยรักษาที่แตกต่างกัน เช่นภัยแล้ง เกลือ เย็น และ ABA น่าสนใจ OsPIF14 พบว่ายัง มีเฉพาะเกิดเย็นอื่นประกบ ด้วยกัน ผลลัพธ์เหล่านี้แนะนำได้ที่ OsPIF14 มีส่วนในการพูดคุยข้ามระหว่างแสงและความเครียดที่ส่งสัญญาณผ่านการโต้ตอบกับผู้ OsDREB1B แม้ว่าในการขาดของความเครียด OsDREB1B ยีนไม่ได้ควบคุม โดยแสง รายงานก่อนหน้าระบุ มันยังคงเป็นไปได้ว่า OsPIF14 มีบทบาทในการปรับแสงของการตอบสนองความเครียด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ยีน DREB1 / CBF ที่รู้จักในฐานะหน่วยงานกำกับดูแลที่สำคัญของการตอบสนองความเครียดของพืชอย่างรวดเร็วและ transiently เกิดจากอุณหภูมิต่ำ โดยใช้ยีสต์คัดกรองหนึ่งไฮบริดที่เราระบุสมมุติ phytochrome โต้ตอบ bHLH ปัจจัย (OsPIF14) เช่นการผูกกับโปรโมเตอร์ OsDREB1B โปรตีน bHLH สามารถที่จะผูกกับ hexameric E-กล่อง (CANNTG) หรือ N-Box (กล่อง CACG (A / C) G) ลวดลายขึ้นอยู่กับกิจกรรมการถอดรหัส เราได้แสดงให้เห็นว่า OsPIF14 ผูกกับโปรโมเตอร์ OsDREB1B ผ่านสอง N-กล่องและว่าภูมิภาคขนาบข้างของแกน hexameric มีความจำเป็นสำหรับการปฏิสัมพันธ์โปรตีนดีเอ็นเอและความมั่นคง นอกจากนี้เรายังพบว่า OsPIF14 ลงควบคุมการแสดงออกของยีนใน OsDREB1B โปรโตพลาข้าวยืนยันกิจกรรมอดกลั้น OsPIF14 ข้อสังเกตในการตรวจ transactivati​​on โดยใช้โปรโตพลา Arabidopsis นอกจากนี้เราแสดงให้เห็นว่า OsPIF14 ย่อมเป็นปัจจัย phytochrome มีปฏิสัมพันธ์ซึ่งชอบผูกกับรูปแบบที่ใช้งาน (PFR) ของ phytochrome ข้าวบีนี้ทำให้เกิดความเป็นไปได้ว่ากิจกรรม OsPIF14 อาจจะ modulated ด้วยแสง อย่างไรก็ตามเราไม่ได้สังเกตควบคุมการแสดงออกของยีน OsDREB1B ใด ๆ โดยแสงภายใต้เงื่อนไขการควบคุม นอกจากนี้การแสดงออกของยีน OsPIF14 ถูกนำมาแสดงจะได้รับการรักษาโดยการปรับความแตกต่างกันเช่นภัยแล้ง, เกลือ, อากาศหนาวเย็นและ ABA ที่น่าสนใจ OsPIF14 แสดงให้เห็นว่ายังมีความเฉพาะเจาะจงเย็นที่เกิดขึ้นประกบทางเลือก ทั้งหมดเข้าด้วยกันผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นความเป็นไปได้ที่ OsPIF14 มีส่วนร่วมในการพูดคุยข้ามระหว่างแสงและความเครียดที่ส่งสัญญาณผ่านการมีปฏิสัมพันธ์กับผู้ก่อการ OsDREB1B แม้ว่าในกรณีที่ไม่มีความเครียด OsDREB1B การแสดงออกของยีนไม่ได้ถูกควบคุมโดยแสงรายงานก่อนหน้านี้ได้รับก็ยังคงเป็นไปได้ว่า OsPIF14 มีบทบาทในการมอดูเลตแสงของการตอบสนองความเครียด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

dreb1 / มูลนิธิสายธารพระพรยีน รู้จักควบคุมหลักของการตอบสนองความเครียดของพืช เป็นอย่างรวดเร็ว และบุคคลหรือสิ่งที่อยู่ชั่วคราวที่ชักนำด้วยอุณหภูมิต่ำ การใช้ยีสต์หนึ่งไฮบริด การคัดกรอง เราระบุซึ่งมีปัจจัย bhlh ไฟโตโครม ( ospif14 ) เป็น osdreb1b ผูกกับโปรโมเตอร์ โปรตีน bhlh สามารถผูกกับ hexameric e-box ( canntg ) หรือ n-box ( cacg ( A / C ) g ) ลวดลายขึ้นอยู่กับกิจกรรมลอง . เราได้แสดงให้เห็นว่า ospif14 ที่ผูกกับโปรโมเตอร์ osdreb1b ผ่านสอง n-boxes และที่ flanking ภูมิภาคหลักของ hexameric จำเป็นสำหรับโปรตีนและดีเอ็นเอปฏิสัมพันธ์ และความมั่นคง นอกจากนี้เรายังพบว่า ospif14 ลงควบคุมการแสดงออกของยีนในเซลล์ osdreb1b ข้าว , corroborating ospif14 ผู้ควบคุมกิจกรรมการตรวจสอบใน transactivation Arabidopsis ) โดยใช้เอนไซม์ . นอกจากนี้ เราพบว่า ospif14 คือแท้ ไฟโตโครมมีปัจจัยซึ่ง preferentially ที่ผูกกับรูปแบบการใช้งาน ( PFR ) ข้าวไฟโตโครม บี ทำให้เกิดความเป็นไปได้ว่า กิจกรรม ospif14 อาจจะปรับโดยแสง อย่างไรก็ตาม เราไม่ได้สังเกตใด ๆ กฎระเบียบของ osdreb1b การแสดงออกของยีนด้วยแสงภายใต้สภาวะควบคุม นอกจากนี้ ospif14 การแสดงออกของยีนได้แสดงให้ปรับโดยการรักษาที่แตกต่างกัน เช่น ภัยแล้ง เกลือ และเย็น 2 . น่าสนใจ ospif14 พบเฉพาะเย็นและ splicing ทางเลือก . ทั้งหมดเข้าด้วยกัน ผลลัพธ์เหล่านี้ชี้ให้เห็นถึงความเป็นไปได้ที่ ospif14 มีส่วนร่วมใน cross-talk ระหว่างแสงและความเครียดการส่งสัญญาณผ่านปฏิสัมพันธ์กับ osdreb1b โปรโมเตอร์ แม้ว่าในการขาดงานของความเครียด osdreb1b ยีน ไม่ได้ถูกควบคุมโดยแสงจากรายงานก่อนหน้านี้ มันยังคงเป็นไปได้ที่จะ ospif14 มีบทบาท ในการปรับแสงของการตอบสนองความเครียด