purity of the standards was at leas

purity of the standards was at least 98%, and 1 mg/ml stock solution
was prepared from all of them in methanol.
2.2. Extraction and sample preparation
0.100 g lyophilized, pulverized and homogenized bark and leaf
samples were suspended in 10 ml methanol. Suspensions were
stirred at 200 rpm for 4 h at room temperature. The extraction was
repeated three times. The extracts were filtered and evaporated to
dryness at a temperature not exceeding 40 ◦C. The residues were
redissolved in HPLC grade Merck methanol and filtered through a
0.45 m syringe filters.
2.3. Analyses by HPLC with electrospray ionization MS
For chromatographic separation, an Agilent 1260 Infinity HPLC
system was used. Samples were separated on a Zorbax SB-C18 column
(3.0 × 150 mm, 3.5 m) maintained at 25 ◦C. The following
gradient elution program was applied at a flow rate of 0.3 ml/min.
A was 0.2% (v/v) acetic acid and B was methanol: 0 min 5% B, 2 min
5% B, 22 min 95% B, 24 min 95% B, 25 min 5% B, 30 min 5% B. Tandem
mass spectrometric (MS/MS) analyses were performed on an
Agilent 6460 triple quadrupole system equipped with a Jet Stream
(ESI) ion source. The ESI was operated in negative ion mode. High
purity nitrogen was used as collision gas. Full scan mass spectra
were recorded over a range of 50–1000 m/z. Accurate mass data
were acquired on an Agilent 6230 time-of-flight (TOF) mass spectrometer
equipped with a Jet Stream (ESI) source in negative ion
mode. Reference masses of m/z 112.9855 and 1033.9881 were used
to calibrate the mass axis during analysis. Fragmentor voltage and
skimmer potential was set at 170 V and 120 V, respectively. Ion
source parameters: flow and temperature of the drying gas (N2):
7 l/min and 300 ◦C, pressure of the nebulizer gas (N2): 45 psi, capillary
voltage: 3500 V, sheath gas flow and temperature: 11 l/min
and 300 ◦C, respectively. Mass spectra were processed by Agilent
MassHunter B.03.01 software.
2.4. Quantitative analysis and method validation
Quantitation was performed by the external standard method.
Quantities of seven phenolic compounds of olive bark were determined
by LC–ESI/MS/MS in multiple reaction monitoring (MRM)
mode. MRM transitions for the target analytes and associated
fragmentor voltages and collision energies were automatically
determined in negative ion mode using MassHunter Optimizer
Software by injection without column mode. Qualifier ions were
also selected for each analyte to avoid the quantitation of an ion
providing the same fragment. The quantifier/qualifier ion ratio

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ความบริสุทธิ์มาตรฐานมีน้อย 98% โซลูชั่นหุ้น 1 mg/mlถูกเตรียมจากทั้งหมดในเมทานอล2.2 การสกัดและตัวอย่างเตรียม0.100 g lyophilized คลุก และ homogenized เป็นกลุ่มเปลือกและใบตัวอย่างที่ถูกระงับในเมทานอล 10 มิลลิลิตร บริการได้กวนที่ 200 rpm สำหรับ h 4 ที่อุณหภูมิห้อง ถูกสกัดทำซ้ำ 3 ครั้ง สารสกัดจากการกรอง และการที่หายไปความแห้งกร้านที่อุณหภูมิไม่เกิน 40 ◦C ตกค้างได้redissolved ในเมอร์ค HPLC เกรดเมทานอล และกรองผ่านการตัวกรอง 0.45 m เข็ม2.3 การวิเคราะห์ ด้วย HPLC ด้วยวิธีพ่นละอองไฟฟ้า ionization MSสำหรับแยก chromatographic, HPLC การว่าย Agilent 1260มีใช้ระบบ ตัวอย่างแยกจากกันในคอลัมน์ Zorbax SB-C18(3.0 × 150 มม. 3.5 เมตร) เก็บรักษาที่ 25 ◦C ต่อไปนี้ใช้โปรแกรม elution ไล่ระดับที่อัตราการไหลของ 0.3 ml/minกรดอะซิติก 0.2% (v/v) มี A และ B มีเมทานอล: 0 นาที 5% B, 2 นาที5% B, B 22 นาที 95%, 24 min 95% B, B 5% 25 นาที 30 นาที 5% เกิดตัวตามกันไปโดยรวม spectrometric (MS/MS) วิเคราะห์ได้ดำเนินการในการระบบทริ quadrupole Agilent 6460 พร้อมกระแส Jetแหล่งไอออน (ESI) ESI ถูกดำเนินการในโหมดไอออนลบ สูงมีใช้ไนโตรเจนบริสุทธิ์เป็นแก๊สชน สมบูรณ์โดยรวมแรมสเป็คตราบันทึกช่วง 50 – 1000 m/z.ข้อมูลโดยรวมที่ถูกต้องได้รับมาในการ Agilent 6230 เวลาของเที่ยวบิน (TOF) โดยรวมสเปกโตรมิเตอร์มีแหล่งที่มาของกระแส Jet (ESI) ในไอออนลบโหมดการ ใช้แหล่งอ้างอิง m/z 112.9855 และ 1033.9881การปรับเทียบแกนโดยรวมระหว่างการวิเคราะห์ แรงดันไฟฟ้า fragmentor และแหล่งที่มีศักยภาพได้ตั้ง 170 V และ V, 120 ตามลำดับ ไอออนแหล่งพารามิเตอร์: ไหลและอุณหภูมิของก๊าซแห้ง (N2):7 l/min และ 300 ◦C ความดันของก๊าซฝอยละออง (N2): 45 psi เส้นเลือดฝอยแรงดันไฟฟ้า: sheath 3500 V กระแสก๊าซและอุณหภูมิ: 11 l/minและ 300 ◦C ตามลำดับ แรมสเป็คตรามวลถูกประมวลผล โดย Agilentซอฟต์แวร์ MassHunter B.03.012.4 การวิเคราะห์เชิงปริมาณและวิธีการตรวจสอบทำการวิเคราะห์หาปริมาณ ด้วยวิธีมาตรฐานภายนอกมีกำหนดปริมาณสารฟีนอเจ็ดของเปลือกมะกอกโดย LC – ESI/MS/MS ในปฏิกิริยาหลายที่ตรวจสอบ (MRM)โหมดการ เปลี่ยน analytes เป้าหมาย MRM และเชื่อมโยงfragmentor แรงดันและพลังงานการชนได้โดยอัตโนมัติกำหนดในโหมดไอออนลบที่ใช้เพิ่มประสิทธิภาพของ MassHunterซอฟต์แวร์ โดยฉีดโดยโหมดคอลัมน์ ประจุตัวบ่งคุณลักษณะอยู่ถูกเลือกสำหรับแต่ละ analyte เพื่อหลีกเลี่ยงการวิเคราะห์หาปริมาณของไอออนให้ส่วนเดียวกัน อัตราส่วนของไอออน quantifier/ตัว บ่งคุณลักษณะ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความบริสุทธิ์ของมาตรฐานอย่างน้อย 98% และ 1 มิลลิกรัม /
มิลลิลิตรสารละลายที่เตรียมจากทั้งหมดของพวกเขาในเมทานอล.
2.2 การสกัดและการเตรียมตัว
0.100 กรัมแห้ง,
ผงและเปลือกไม้ปั่นและใบตัวอย่างที่ถูกระงับใน10 มล. เมทานอล แขวนลอยถูกกวนที่ 200 รอบต่อนาทีสำหรับ 4 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง
การสกัดได้ซ้ำแล้วซ้ำอีกสามครั้ง
สารสกัดถูกกรองและระเหยแห้งที่อุณหภูมิไม่เกิน 40 ◦C
ตกค้างถูก
redissolved ในเมทานอลเมอร์ค HPLC เกรดและกรองผ่าน
0.45 เมตรกรองเข็มฉีดยา.
2.3 การวิเคราะห์โดยวิธี HPLC electrospray ไอออนไนซ์กับ MS
สำหรับการแยกสารที่ Agilent 1260 อินฟินิตี้ HPLC
ระบบถูกนำมาใช้ ตัวอย่างถูกแยกออกจากกันในคอลัมน์ Zorbax SB-C18
(3.0 × 150 มิลลิเมตร 3.5 เมตร) ไว้ที่ 25 ◦C ต่อไปนี้. โปรแกรมชะลาดถูกนำมาใช้ในอัตราการไหล 0.3 มล. / นาทีเป็น0.2% (v / v) กรดอะซิติกและ B คือเมทานอล: 0 นาที 5% B, 2 นาที5% B, 22 นาที 95% B 24 นาที 95% B, 25 นาที 5% B, 30 นาที 5% บี Tandem มวล spectrometric (MS / MS) ได้ดำเนินการวิเคราะห์ในAgilent 6460 ระบบ quadrupole สามพร้อมกับเจ็ทสตรีม(ESI) แหล่งกำเนิดไอออน ESI เป็นผู้ดำเนินการในโหมดไอออนลบ สูงไนโตรเจนความบริสุทธิ์ที่ใช้เป็นก๊าซชน การสแกนแบบเต็มสเปกตรัมมวลที่ถูกบันทึกไว้ในช่วงของ 50-1,000 เมตร / z ข้อมูลจำนวนมากที่ถูกต้องได้มาบน Agilent 6230 เวลาของเที่ยวบิน (TOF) สเปกโตรมิเตอร์มวลพร้อมกับเจ็ทสตรีม(ESI) แหล่งที่มาในไอออนลบโหมด ฝูงอ้างอิงเมตร / z 112.9855 1033.9881 และถูกนำมาใช้ในการสอบเทียบแกนมวลระหว่างการวิเคราะห์ แรงดันไฟฟ้า Fragmentor และศักยภาพพายตั้งอยู่ที่170 V และ 120 V ตามลำดับ ไอออนพารามิเตอร์ที่มา: การไหลและอุณหภูมิของก๊าซอบแห้ง (N2): 7 ลิตร / นาทีและ 300 ◦Cความดันของก๊าซ nebulizer นี้ (N2): 45 ปอนด์ต่อตารางนิ้วของเส้นเลือดฝอยแรงดันไฟฟ้า: 3500 V, การไหลของก๊าซปลอกและอุณหภูมิ: 11 ลิตร / นาทีและ300 ◦Cตามลำดับ สเปกตรัมมวลที่ถูกประมวลผลโดย Agilent ซอฟต์แวร์ MassHunter B.03.01. 2.4 การวิเคราะห์เชิงปริมาณและการตรวจสอบวิธีการวิเคราะห์เชิงปริมาณได้ดำเนินการโดยวิธีการมาตรฐานภายนอก. ปริมาณสารประกอบฟีนอเจ็ดเปลือกมะกอกได้รับการพิจารณาโดย LC-ESI / MS / MS ในการตอบสนองการตรวจสอบหลาย (MRM) โหมด MRM เปลี่ยนสำหรับวิเคราะห์เป้าหมายและเกี่ยวข้องแรงดันไฟฟ้าและพลังงานfragmentor ถูกชนโดยอัตโนมัติกำหนดในโหมดไอออนลบใช้เครื่องมือเพิ่มประสิทธิภาพMassHunter ซอฟแวร์โดยการฉีดโดยไม่ต้องโหมดคอลัมน์ ไอออนคัดเลือกถูกยังเลือกสำหรับการวิเคราะห์แต่ละที่จะหลีกเลี่ยงปริมาณของไอออนให้ส่วนเดียวกัน ปริมาณ / อัตราส่วนไอออนรอบคัดเลือก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความบริสุทธิ์ของมาตรฐานอย่างน้อย 98% 1 มก. / มล. และโซลูชั่นหุ้น
เตรียมได้จากทั้งหมดของพวกเขาในเมทานอล
2.2 . การสกัดและการเตรียมตัว
ไลโอ 0.100 กรัม บดบดและเปลือก และตัวอย่างใบ
หยุดชั่วคราวใน 10 มล เมทานอล สารแขวนลอยคือ
กวนที่ความเร็วรอบ 200 รอบต่อนาที สำหรับ 4 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง การสกัดคือ
ซ้ำ 3 ครั้งสารสกัดถูกกรองและระเหย
แห้งที่อุณหภูมิไม่เกิน 40 องศาเซลเซียส◦ดิน
redissolved ใน HPLC เกรดเมอร์ค เมทานอล และกรองผ่าน
0.45 เมตร เข็มตัวกรอง
2.3 การวิเคราะห์โดย HPLC ด้วยวิธีพ่นละอองไฟฟ้าไอ MS
สำหรับดิ้นรน , Agilent 1260 Infinity HPLC
ระบบที่ใช้ จำนวนคอลัมน์แยกบน
zorbax sb-c18 ( 3.0 × 150 มม. , 3 .5 M ) ไว้ที่ 25 องศาเซลเซียส ◦ต่อไปนี้
ลาด ( โปรแกรมใช้ที่อัตรา 0.3 มิลลิลิตร / นาที
เป็น 0.2% ( v / v ) กรด B เมทานอล : 0 Min 5 % B , 2 นาที
5 % B , 22 นาที 95 % B , 24 นาที 95 % B , 25 นาที 5 % B , 30 นาที 5 % B . ตีคู่
มวลความ ( MS / MS ) และมีการปฏิบัติในด้าน 6460
สามคำระบบติดตั้งและเจ็ทสตรีม
( ESI ) แหล่งกำเนิดไอออนในการพัฒนา ดำเนินการในโหมดไอออนลบ ก๊าซไนโตรเจนความบริสุทธิ์สูง
ถูกใช้เป็นแก๊สชน มวลสเปกตรัมเต็มสแกน
ที่ถูกบันทึกไว้ในช่วง 50 - 1 , 000 M / Z . ข้อมูลมวลที่ถูกต้อง
ได้มาในเวลา - การบิน Agilent 6230 ( tof ) แมสสเปกโตรมิเตอร์
พร้อมกับเจ็ทสตรีม ( ESI ) ที่มาในโหมดไอออน
ลบ อ้างอิงและมวลของ M / Z 112.9855 1033.9881 ใช้
การสอบเทียบมวลแกนในระหว่างการวิเคราะห์ และแรงดัน fragmentor
ศักยภาพ Skimmer ไว้ที่ 170 V และ 120 V ตามลำดับ แหล่งกำเนิดไอออน
: พารามิเตอร์การไหลและอุณหภูมิของการอบแก๊ส ( 2 ) :
7 L / min และ 300 ◦ C ความดันของ nebulizer ก๊าซ ( N2 ) : 45 psi หลอดเลือดฝอย
แรงดัน : 3500 V , อัตราการไหลของแก๊สปลอกและอุณหภูมิ : 11 ลิตร / นาที และ◦
300 องศาเซลเซียส ตามลำดับ มวลสเปกตรัมที่ถูกประมวลผลโดย Agilent
masshunter b.03.01 ซอฟต์แวร์ .
2.4 . การวิเคราะห์เชิงปริมาณและวิธีการตรวจสอบ
เซลล์โดยใช้วิธีมาตรฐานภายนอก ปริมาณของสารประกอบฟีนอล
7 เปลือกมะกอกถูกกำหนดโดย LC / MS ( ESI
/ MS ในปฏิกิริยาหลายการตรวจสอบ ( mrm )
โหมด การเปลี่ยน mrm สำหรับเป้าหมายและกรณีเกี่ยวข้อง
fragmentor แรงดันไฟฟ้าและการชนพลังงานได้โดยอัตโนมัติ
มุ่งมั่นในโหมดไอออนลบ โดยใช้ซอฟต์แวร์เพิ่มประสิทธิภาพ
masshunter โดยการฉีดโดยไม่ต้องโหมดคอลัมน์ รอบคัดเลือกไอออนถูก
ยังเลือกสำหรับแต่ละครูเพื่อหลีกเลี่ยงเซลล์ของไอออน
ให้ชิ้นเดียวกัน ที่ตัวขั้วต่อไอออน / รอบคัดเลือก