An Au disk electrode (4 mm diameter) was firstly polished toobtain mirror surface with 0.05 m alumina powder, followed by sonication in ethanol and ultrapure water for 3 min, respectively.The Au disk electrode was then pretreated electrochemically in0.5 M H2SO4aqueous solution by potential cycling in the potentialrange of −0.3 to 1.5 V at a scan rate of 100 mV s−1until the CV char-acteristic for the clean Au electrode was obtained [38]. Then, the Auelectrode was washed thoroughly with copious amounts of ultra-pure water and dried under nitrogen gas. Prior to immobilizationonto the Au electrode surface, the PA was dissolved in 10 mM pH 8.0TE buffer containing 100 mM NaCl and 10 mM TCEP, and incubatedin the dark for 1 h to reduce disulfide bonds. Then, 25 L of 1 MPA solution was dropped onto the cleaned Au electrode surface at37◦C for 5 h to obtain the PA/Au electrode. Next, this electrode wasimmersed in 25 L of 2 mM MCH at 37◦C for 2 h to remove thenonspecific PA adsorption and optimize the orientation of the cap-ture probes to make hybridization easier. The obtained electrodewas labeled as the MCH/PA/Au electrode. The MCH/PA/Au electrodewas further incubated in 25 L of hybridization solution contain-ing 0.1 M probe B and Hg2+with various concentrations at 45◦Cfor 2 h. After hybridization, the electrode was thoroughly rinsedwith washing buffer and dried under a stream of nitrogen gas. Theelectrode was then incubated in 25 L solution of NEase (Nt.AlWI,0.2 U L−1) in NE buffer 2 at 50◦C (such temperature could facili-tate faster hybridization and subsequent dissociation of DNA in anicking reaction). After a specific period of 2 h, the electrode wasrinsed with the washing buffer and used for electrochemical mea-surements.
มีขั้วดิสก์ AU ( 4 มม. เส้นผ่าศูนย์กลาง ) เป็นครั้งแรก เพื่อขัดพื้นผิวกระจก ) M ผงอลูมินา , ตามด้วย sonication ในเอทานอลและบริสุทธิ์มากน้ำ 3 นาที ตามลำดับ หรือขั้วไฟฟ้าผ่านดิสก์แล้ว electrochemically in0.5 M h2so4aqueous แก้ไขศักยภาพจักรยานใน potentialrange ของ− 0.3 ถึง 15 v ที่สแกนอัตรา 100 MV s − 1until ที่ acteristic char CV ไฟฟ้าสะอาด AU ได้ [ 38 ] แล้ว auelectrode ก็ล้างให้สะอาดด้วยปริมาณมากของน้ำบริสุทธิ์สูงและแห้งภายใต้ แก๊สไนโตรเจน ก่อนที่จะ immobilizationonto Au ขั้วพื้นผิว , PA ละลายใน 10 มม. 8.0te บัฟเฟอร์ที่มีพีเอช 10 และ 100 mM NaCl เกี่ยวกับ อืมและ incubatedin มืดเป็นเวลา 1 ชั่วโมง เพื่อลดพันธะไดซัลไฟด์ . งั้น , 25 L 1 MPA สารละลายทำความสะอาดขั้วไฟฟ้าลงบนพื้นผิว◦ AU 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 ชั่วโมง เพื่อให้ได้ PA / Au ขั้วไฟฟ้า หน้านี้ wasimmersed ไฟฟ้า 25 l MCH 2 มิลลิเมตรที่อุณหภูมิ 37 ◦ C 2 H เอา thenonspecific โดยการดูดซับ และปรับทิศทางของ ture หมวกจึงให้ทำง่ายขึ้นได้ electrodewas ป้ายเป็น PA MCH / / Au ขั้วไฟฟ้า The Urban / PA / AU electrodewas เพิ่มเติม ) 25 ลิตร ( โซลูชั่นประกอบด้วยไอเอ็นจี 0.1 M Probe B และ hg2 ที่มีความเข้มข้นต่าง ๆ ที่ 45 C เป็นเวลา 2 ชั่วโมง หลังจาก◦ hybridization , ขั้วไฟฟ้า rinsedwith ล้างบัฟเฟอร์และแห้งอย่างทั่วถึงภายใต้กระแสของแก๊สไนโตรเจนtheelectrode ถูกบ่มใน 25 ฉันโซลูชั่นนีส ( NT . Alwi , 0.2 U L − 1 ) Ne บัฟเฟอร์ 2 50 ◦ C ( อุณหภูมิดังกล่าวอาจ facili เททเบสเร็วขึ้น และการตามมาของดีเอ็นเอในปฏิกิริยา anicking ) หลังจากระยะเวลาที่เฉพาะเจาะจงของ 2 H , ขั้วไฟฟ้า wasrinsed กับล้างบัฟเฟอร์ และใช้ไฟฟ้า MEA surements .
การแปล กรุณารอสักครู่..