Tolerance to artificial gastric jui

Tolerance to artificial gastric juice and artificial bile acid was determined by the modified method of Clark, Cotton, and Martin (1993) and Gilliland, Staley, and Bush (1984), respectively. The LAB cells, grown in MRS broth for overnight at 37 °C, were harvested by centrifugation at 1811 × g for 5 min, suspended in artificial gastric juice and incubated at 37 °C for 3 h. MRS broth supplemented with pepsin (1.0% w/v) and NaCl (0.5% w/v), adjusted to pH 2.5 with 1.0 N HCl, was used as artificial gastric juice. After treatment with artificial gastric juice, the cells were harvested (1811 × g, 5 min, 4 °C) and washed twice with 0.1 M phosphate buffer (pH 7.2) to neutralize the medium acidity. The harvested cells were inoculated into MRS broth with 1.0% oxgall (Sigma Chemical Co., St Louis, MO, USA) and incubated at 37 °C for 6 and 24 h with shaking at 100 rpm. Viable cells were enumerated by dilution and plate counting on MRS agar after incubation for 48 h at 37 °C.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กำหนดค่าเผื่อน้ำ gastric ประดิษฐ์และกรดน้ำดีเทียม โดยวิธีการปรับเปลี่ยนของคลาร์ก ฝ้าย และมาร์ติน (1993) และ Gilliland, Staley และบุช (1984), ตามลำดับ ห้องปฏิบัติการเซลล์ ปลูกนางซุปสำหรับ 37 ° C เก็บเกี่ยว โดย centrifugation ที่ 1811 × g สำหรับ 5 นาที หยุดชั่วคราวในน้ำ gastric เทียม และ incubated ที่ 37 ° C สำหรับซุป 3 h. นางเสริม ด้วยเพพซิน (1.0% w/v) และ NaCl (0.5% w/v), ปรับค่า pH 2.5 กับ 1.0 N HCl ถูกใช้เป็นน้ำ gastric ประดิษฐ์ หลังการรักษาด้วยน้ำ gastric ประดิษฐ์ เซลล์ถูกเก็บเกี่ยว (1811 × g, 5 นาที 4 ° C) และล้าง ด้วย 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.2) การมีกลางสอง เซลล์ harvested ถูก inoculated เป็นนางซุปกับ 1.0% oxgall (ซิกเคมี Co., St Louis, MO สหรัฐอเมริกา) และ incubated ด้วยการสั่นที่ 100 รอบต่อนาทีที่ 37 ° C สำหรับ h 6 และ 24 เซลล์ทำงานได้ถูกนำเจือจางและจาน MRS agar นับหลังจากฟักตัวใน h 48 ที่ 37 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ความทนทานต่อน้ำย่อยเทียมและกรดน้ำดีเทียมถูกกำหนดโดยวิธีการแก้ไขของคลาร์กผ้าฝ้ายและมาร์ติน (1993) และกิลลิแลนด์, สเตลีย์และบุช (1984) ตามลำดับ เซลล์ LAB ที่ปลูกในน้ำซุป MRS สำหรับค้างคืนที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 1811 ×กรัมเป็นเวลา 5 นาที, ที่ลอยอยู่ในน้ำย่อยเทียมและบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 ชั่วโมง น้ำซุป MRS เสริมด้วยน้ำย่อย (1.0% w / v) และโซเดียมคลอไรด์ (0.5% w / v) ปรับค่าพีเอช 2.5 กับ 1.0 N HCl ใช้เป็นน้ำย่อยเทียม หลังการรักษาด้วยน้ำย่อยเทียมเซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยว (1811 ×กรัม 5 นาที, 4 ° C) และล้างครั้งที่สอง 0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (pH 7.2) เพื่อแก้ความเป็นกรดกลาง เซลล์เก็บเกี่ยวถูกเชื้อลงในน้ำซุป MRS 1.0% oxgall (ซิกม่า Chemical Co. , St Louis, MO, USA) และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 6 และ 24 ชั่วโมงด้วยการเขย่า 100 รอบต่อนาทีที่ เซลล์ทำงานได้ถูกระบุโดยการลดสัดส่วนและแผ่นนับในอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS หลังจากบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ความทนทานต่อน้ำและกรดในกระเพาะอาหาร น้ำดี เทียม เทียม ถูกกำหนดโดยดัดแปลงมาจากวิธีของคลาร์ก ฝ้าย และ มาร์ติน ( 1993 ) และกิลีแลนด์ Staley , และบุช ( 1984 ) , ตามลำดับ เซลล์ทดลองปลูกใน MRS broth เพื่อค้างคืนที่ 37 ° C ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 1811 ×กรัมเป็นเวลา 5 นาที , พักในน้ำย่อยเทียมและบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 3 ชั่วโมงMRS broth เติมเอนไซม์เปปซิน ( 1.0 % w / v ) และ NaCl ( 0.5% ( w / v ) , ค่า pH 2.5 1.0 N HCl , ใช้ไฟธาตุเทียม หลังจากการรักษาด้วยน้ำย่อยเทียมเซลล์เก็บ ( 1811 × G , 5 นาที , 4 ° C ) และ 0.1 M phosphate buffer ล้างสองครั้ง ( pH 7.2 ) เพื่อแก้กลางเม . โดยใช้เซลล์เป็นเชื้อ MRS broth กับ 10 % oxgall ( Sigma Chemical Co . , เซนต์ หลุยส์ , มิสซูรี , สหรัฐอเมริกา ) และบ่มที่ 37 ° C 6 และ 24 ชั่วโมงกับสั่นที่ 100 รอบต่อนาที ได้เซลล์ก็ระบุโดยการเจือจางและจานพึ่งนางวุ้นหลังจากบ่ม 48 ชั่วโมง ที่ 37 องศา