The astringency types of fruit-bear

The astringency types of fruit-bearing offspring were identified by a sensory test and observations of flesh color. The astringency type/non-astringency types of offspring were distinguished by determining whether the fruit’s flesh could or could not bekept in the mouth. For pollination-variant cultivars, fruits with many seeds were determined to be non-astringent, and fruits with only a few seeds were astringent and had many brown specks around the seeds. PCNA flesh was determined to be astringent irrespective of the number of seeds, with or without brown specks.
Total DNA was extracted from ca. 1 cm2of young leaves sampled from each 1-year-old seedling or grafted scion from offspring plants using the Nucleon Phytopure plant DNA extraction kit (GEHealthcare Biosciences, USA).Two PCR primer combinations (i.e., E4/A2r and 7H9F/AST-R; Table 1) were used to distinguish between PCNA and non-PCNA offspring derived from progeny A. Primer A2r was designed based on the right-end sequences of the A2region (Kanzaki et al., 2009;GenBank accession number AB428738; see Fig. 2), and the E4/A2rcombination detects A2specifically (Fig. 3). The 7H9F/AST-R combination detects both A2and A3(Kanzaki et al., 2010, seeFigs. 2 and 3). PCR was performed on a total volume of 10 L containing 0.2 mM of each dNTP, 0.25 U of Ex Taq (Takara Bio), 0.5 M of each primer, 1× reaction buffer, and 50 ng of the total DNA sample. The PCR conditions were as follows: initial denaturation at 94◦C for 30 s; 35 cycles for E4/A2r or 40 cycles for 7H9F/AST-Rat 94◦C for 20 s; 56◦C for 20 s; and 72◦C for 30 s for 7H9F/AST-Rand 2 min for E4/A2r; and a final additional extension at 72◦C for 5 min. The amplified PCR products were separated on a 2% agarose gel and visualized by staining with ethidium bromide.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มีระบุชนิดความฝาดของผลไม้แบกลูกหลาน โดยการทดสอบทางประสาทสัมผัสและสังเกตของเนื้อสี ชนิดชนิด/ปลอดฝาดฝาดของลูกหลานได้โดดเด่น โดยกำหนดว่าเนื้อผลไม้อาจ หรืออาจไม่ bekept ในปาก สำหรับตัวแปรผสมเกสรพันธุ์ ผลไม้ที่ มีเมล็ดหลายตัวถูกจะไม่ใช่ยาสมานแผล และผลไม้ที่ มีเพียงไม่กี่เมล็ดฝาด และจุดสีน้ำตาลหลายรอบเมล็ด พิจารณาเนื้อ PCNA จะฝาดโดยไม่คำนึงถึงจำนวนของเมล็ด มี หรือไม่ มีจุดสีน้ำตาล รวมดีเอ็นเอที่ถูกแยกจาก ca. 1 cm2of หนุ่มออกตัวอย่างจากแต่ละต้นกล้าอายุ 1 ปีหรือไซออนทาบจากลูกหลานที่พืชใช้พืชนิวคลีออน Phytopure ชุดสกัดดีเอ็นเอ (ออก GEHealthcare สหรัฐอเมริกา) สองชุดไพรเมอร์ PCR (เช่น E4/A2r และ 7H9F/AST-R ตารางที่ 1) ใช้ในการแยกระหว่างลูกหลานที่มาจากลูกหลาน A2r เอไพรเมอร์ออกแบบมาตามลำดับส่วนขวาของ A2region PCNA และปลอด PCNA (Kanzaki et al. 2009 เลขทะเบียน GenBank AB428738 ดูรูปที่ 2), และตรวจ E4/A2rcombination A2specifically (3 รูป) ชุด 7H9F/AST-R ที่ตรวจพบทั้งสอง A3(Kanzaki et al., 2010, seeFigs. 2 and 3) A2and ทำ PCR บนไดรฟ์ข้อมูลทั้งหมด 10 l ที่ประกอบด้วยความละ dNTP, 0.2 มม. 0.25 U ของ Ex Taq (Takara Bio), 0.5 ม.แต่ละพื้น บัฟเฟอร์ปฏิกิริยา 1 × และ 50 ฉบับตัวอย่างดีเอ็นเอทั้งหมด เงื่อนไข PCR มีดังนี้: แปรสภาพเริ่มต้นที่ 94◦C สำหรับ 30 s รอบ 35 E4/A2r หรือ 40 รอบสำหรับ 7H9F/AST-Rat 94◦C 20 s 56◦C 20 s และ 72◦C 30 s สำหรับ 2 นาที 7H9F/AST-แรนด์สำหรับ E4/A2r และส่วนขยายเพิ่มเติมเป็นขั้นสุดท้ายที่ 72◦C 5 นาที ผลิตภัณฑ์ PCR ขยายแยกบนเจล 2% agarose และโดยย้อมด้วยโบรไมด์ ethidium

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ฝาดประเภทผลไม้ลูกแบริ่งโดยระบุว่าการทดสอบทางประสาทสัมผัสและการสังเกตของเนื้อสี ประเภทฝาด / ไม่ใช่ฝาดประเภทลูกหลานโดดเด่นด้วยการพิจารณาว่าเนื้อผลไม้ที่สามารถหรือไม่สามารถ bekept ในปาก สำหรับการผสมเกสรตัวแปรพันธุ์ผลไม้ที่มีเมล็ดหลายคนมุ่งมั่นที่จะไม่เป็นยาสมานแผลและผลไม้ที่มีเพียงไม่กี่เมล็ดเป็นยาสมานแผลและมีจุดสีน้ำตาลหลายรอบเมล็ด เนื้อ PCNA มุ่งมั่นจะเป็นโดยไม่คำนึงถึงฝาดของจำนวนเมล็ดที่มีหรือไม่มีจุดสีน้ำตาล.
รวมดีเอ็นเอที่สกัดจากแคลิฟอร์เนีย 1 cm2of ใบอ่อนตัวอย่างจากแต่ละต้นกล้า 1 ปีหรือการปลูกถ่ายอวัยวะทาบจากพืชลูกหลานใช้ Nucleon Phytopure ชุดสกัดดีเอ็นเอของพืช (GEHealthcare ชีววิทยาศาสตร์, สหรัฐอเมริกา) .Two PCR รวมกันไพรเมอร์ (เช่น E4 / A2r และ 7H9F / AST-R ตารางที่ 1) ถูกนำมาใช้ในการแยกแยะความแตกต่างระหว่าง PCNA และไม่ PCNA ลูกหลานได้มาจากลูกหลานเอรองพื้น A2r ได้รับการออกแบบขึ้นอยู่กับลำดับขวาท้ายของ A2region (คันซากิ et al, 2009;. GenBank ภาคยานุวัติจำนวน AB428738; ดูรูป 2) และ E4 / A2rcombination ตรวจพบ A2specifically (รูปที่. 3) การรวมกัน 7H9F / AST-R ตรวจพบทั้ง A2and A3 (คันซากิ et al., 2010 seeFigs. 2 และ 3) PCR ที่ได้ดำเนินการในปริมาณรวมของ 10 ลิตรมี 0.2 มิลลิเมตรแต่ละ dNTP, 0.25 U ของอดีต Taq (Takara Bio), 0.5 M ของแต่ละไพรเมอร์ 1 บัฟเฟอร์×ปฏิกิริยาและ 50 นาโนกรัมของตัวอย่างดีเอ็นเอทั้งหมด เงื่อนไข PCR มีดังนี้ denaturation เริ่มต้นที่94◦Cเป็นเวลา 30 วินาที; 35 รอบสำหรับ E4 / A2r หรือ 40 รอบสำหรับ 7H9F / AST-หนู94◦C 20 s; 56◦C 20 s; และ72◦Cเป็นเวลา 30 วินาทีสำหรับ 7H9F / AST-Rand 2 นาทีสำหรับ E4 / A2r; และส่วนขยายเพิ่มเติมสุดท้าย72◦Cเป็นเวลา 5 นาที ผลิตภัณฑ์ PCR ขยายถูกแยกบน agarose gel ที่ 2% และมองเห็นโดยการย้อมสีด้วย ethidium bromide

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่ตาลชนิดของแบริ่งลูกผลไม้ที่ถูกระบุโดยผู้ทดสอบและสังเกตสีเนื้อ ที่ตาลประเภท / โนนตาลประเภทของลูกหลานเป็นอย่างดี ระบุว่า เนื้อของผลไม้อาจหรืออาจไม่ bekept ในปาก สำหรับการผสมเกสรแปรพันธุ์ผลไม้มีเมล็ดมาก มีความตั้งใจจะไม่ฝาด และผลไม้ที่มีรสฝาด และมีเพียงไม่กี่เมล็ดมี specks สีน้ำตาลหลายรอบเมล็ด PCNA เนื้อตัดสินใจว่าฝาดโดยไม่คำนึงถึงจำนวนของเมล็ดที่มีหรือไม่มี specks สีน้ำตาลดีเอ็นเอทั้งหมดสกัดจากใบอ่อนประมาณ 1 cm2of ตัวอย่างจากแต่ละต้นกล้าอายุ 1 ปีหรือโดยไซออนจากลูกพืชที่ใช้นิวคลีออน phytopure พืชสกัดดีเอ็นเอ Kit ( gehealthcare ชีววิทยาศาสตร์ , USA ) สองผสมรองพื้น PCR ( เช่น e4 / a2r และ 7h9f / ast-r ตาราง 1 ) ถูกใช้เพื่อแยกแยะระหว่าง PCNA และไม่ใช่ PCNA ลูกหลาน ได้มาจากลูกหลาน อ. ไพร a2r ถูกออกแบบบนพื้นฐานที่ถูกต้อง ลำดับสุดท้ายของ a2region ( คันซากิ et al . , 2009 ; ขนาดการหมายเลข ab428738 ดูรูปที่ 2 ) และ e4 / a2rcombination ตรวจจับ a2specifically ( รูปที่ 3 ) การ 7h9f / ast-r รวมกันที่ตรวจพบทั้ง a2and A3 ( คันซากิ et al . , 2010 , seefigs . 2 และ 3 ) เทคนิคคือใช้ปริมาณรวมของ 10 ลิตรที่มี 0.2 มม. ของแต่ละ dntp 0.25 U ของแฟนเก่าแท็ค ( ทาคาระไบโอ ) , 0.5 เมตร ของแต่ละแนวทาง บัฟเฟอร์ ปฏิกิริยา 1 ×และ 50 นาโนกรัมในตัวอย่างดีเอ็นเอทั้งหมด โดยเงื่อนไขดังนี้ ( เริ่มต้นที่ 94 ◦ C 30 s ; 35 รอบสำหรับ e4 / a2r หรือ 40 รอบสำหรับ 7h9f / AST หนู 94 ◦ C 20 s ; 56 ◦ C 20 s ; และ 72 ◦เป็นเวลา 30 วินาที 7h9f / AST แรนด์ 2 นาที e4 / a2r ; และสุดท้ายเพิ่มเติมส่วนขยายที่ 72 ◦องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที โดยทำการแยกบนผลิตภัณฑ์เจล ( 2 ) และการมองเห็นโดยการย้อมด้วยทิเดียมโบรไมด์ .