In this study, a highly sensitive a

In this study, a highly sensitive and reliable diagnostic
PCR method was developed to detect MBV in
shrimp tissues. This primer pair, 261F/R, detected all
known MBV positive samples from 4 geographic
locations including Thailand, Taiwan, Hawaii (P.
monodon introduced from the Philippines), and
Malaysia collected over a 13-year period. This is the
first report that demonstrates PCR amplification of
MBV isolates from different geographic locations.
Previous reports showed the amplification of PCR
with isolates from single location such as Australian
MBV (Belcher and Young, 1998) and Taiwan MBV
(Chang et al., 1993; Lu et al., 1993; Hsu et al., 2000).
The genetic variation of shrimp viruses isolated from
different geographic locations has been reported for
several other viruses including HPV (Phromjai et al.,
2001) and WSSV (Wang et al., 2000). Genetic variations
can affect the amplification of PCR as demonstrated
when specific primers designed for Korean
HPV were unable to detect Thai HPV. Since no
complete MBV sequence information has been deposited
in the GenBank database, therefore, it is essential
for possible strain difference to be tested when diagnostic
primers are used for MBV detection. If strain
differences exist, a specific PCR primer set may not
be able to amplify all MBV positive samples leading
to a false negative result.
Although MBV has been effectively controlled by
several quarantine programs and by egg treatment
methods, there are several reports of continued high
prevalence of this virus in shrimp hatcheries (Flegel et
al., 2001; Umesha et al., 2003). The negative impact
of this virus on shrimp post larvae (PL) may be
reduced by the screening of broodstock and their
progeny before stocking PLs into culture ponds. A
method that is capable of detecting all isolates of
MBV where PLs are exported is essential for effective
elimination of MBV-infected stocks. The PCR procedure
described here will provide a reliable diagnostic
tool for MBV detection of isolates from several geographic
locations.
There are three major enteric viruses that infect
penaeid shrimp, BP, MBV and HPV. Both BP and
MBV are occluded-baculoviruses whereas HPV is a
parvovirus (Pantoja and Lightner, 2000). To demonstrate
specificity of a PCR primer set for MBV, tissues
infected with BP and HPV were chosen for testing.
BP was chosen because it is an occluded baculovirus

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ในการศึกษานี้ การวินิจฉัยสำคัญสูง และเชื่อถือได้วิธี PCR ได้รับการพัฒนาสืบ MBV ในเนื้อเยื่อของกุ้ง คู่รองพื้น 261F/R นี้พบทั้งหมดรู้จัก MBV บวกตัวอย่างจาก 4 ภูมิภาคสถานรวมทั้งประเทศไทย ไต้หวัน ฮาวาย (P.ดำนำจากฟิลิปปินส์), และมาเลเซียรวบรวมระยะเวลา 13 ปี นี่คือการรายงานแรกที่แสดงให้เห็นถึงการขยาย PCR ของMBV ที่แยกได้จากตำแหน่งที่ตั้งทางภูมิศาสตร์ที่แตกต่างกันรายงานก่อนหน้านี้แสดงให้เห็นว่าการขยายของ PCRกับที่แยกได้จากตำแหน่งเดียวเช่นออสเตรเลียMBV (Belcher และหนุ่ม 1998) และไต้หวัน MBV(ช้างร้อยเอ็ด al., 1993 Lu et al., 1993 ซูและ al., 2000)ความผันแปรทางพันธุกรรมของไวรัสกุ้งแยกต่างหากจากมีการรายงานที่ตั้งทางภูมิศาสตร์แตกต่างกันหลายไวรัสอื่น ๆ รวมถึงมะเร็งปากมดลูก (Phromjai et al.,ปี 2001) และการตรวจ (Wang et al., 2000) ความแตกต่างทางพันธุกรรมมีผลต่อการขยายของ PCR ดังเมื่อการออกแบบไพรเมอร์เฉพาะสำหรับภาษาเกาหลีมะเร็งปากมดลูกสามารถตรวจพบมะเร็งปากมดลูกที่ไทยได้ เนื่องจากไม่มีข้อมูลลำดับ MBV สมบูรณ์ได้รับฝากไว้ในฐานข้อมูลของ GenBank ดังนั้น มันเป็นสิ่งสำคัญสำหรับความแตกต่างต้องใช้สามารถที่จะทดสอบเมื่อวินิจฉัยไพรเมอร์ใช้ตรวจ MBV ถ้าต้องใช้มีความแตกต่าง สีรองพื้น PCR เฉพาะการตั้งค่าอาจไม่สามารถขยายทั้งหมด MBV บวกตัวอย่างผู้นำให้ผลลบปลอมแม้ว่า MBV ได้รับการควบคุมอย่างมีประสิทธิภาพโดยต่าง ๆ ตรวจสอบโปรแกรม และรักษาไข่วิธี มีรายงานหลายสูงอย่างต่อเนื่องชุกของไวรัสนี้ใน hatcheries กุ้ง (Flegel ร้อยเอ็ดal., 2001 Umesha และ al., 2003) ผลกระทบเชิงลบอาจจะลงตัวอ่อน (PL) ของไวรัสนี้ในกุ้งลดลง โดยการคัดพันธุ์ของพ่อแม่ และของพวกเขาลูกหลานก่อนสร้างกรุณาลงในบ่อวัฒนธรรม Aวิธีการที่มีความสามารถในการตรวจแยกทั้งหมดของที่การส่งออกกรุณา MBV เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการมีผลบังคับใช้กำจัดการติดเชื้อ MBV หุ้น กระบวนการ PCRอธิบายไว้ที่นี่จะให้วินิจฉัยความน่าเชื่อถือเครื่องมือตรวจ MBV แยกจากหลายภูมิภาคสถานมีสามหลัก enteric ไวรัสที่ติดเชื้อpenaeid กุ้ง BP, MBV และมะเร็งปากมดลูก ทั้ง BP และMBV จะ occluded baculoviruses ในขณะที่มะเร็งปากมดลูกเป็นการparvovirus (Pantoja และ Lightner, 2000) แสดงให้เห็นถึงspecificity พื้น PCR ที่ตั้งสำหรับ MBV เนื้อเยื่อติดไวรัสกับ BP และมะเร็งปากมดลูกที่ถูกเลือกสำหรับการทดสอบBP ถูกเลือกเนื่องจากเป็นการ baculovirus occluded

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ในการศึกษานี้มีความไวสูงและเชื่อถือได้วินิจฉัย
วิธี PCR ได้รับการพัฒนาในการตรวจสอบ MBV ใน
เนื้อเยื่อกุ้ง คู่ไพรเมอร์นี้ 261F / R ตรวจพบทุก
ตัวอย่างที่รู้จักกันในเชิงบวก MBV จาก 4 ทางภูมิศาสตร์
สถานที่รวมทั้งประเทศไทย, ไต้หวัน, ฮาวาย (พี
monodon แนะนำจากฟิลิปปินส์) และ
มาเลเซียที่เก็บรวบรวมได้ในช่วงระยะเวลา 13 ปี นี่คือการ
รายงานครั้งแรกที่แสดงให้เห็นถึงการขยาย PCR ของ
MBV แยกจากสถานที่ทางภูมิศาสตร์ที่แตกต่างกัน.
รายงานก่อนหน้าแสดงให้เห็นว่าการขยายของ PCR
กับไอโซเลทจากตำแหน่งเดียวเช่นออสเตรเลีย
MBV (Belcher และหนุ่ม 1998) และไต้หวัน MBV
(ช้าง et al., 1993 ; Lu et al, 1993;... Hsu, et al, 2000)
การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมของไวรัสกุ้งที่แยกได้จาก
สถานที่ทางภูมิศาสตร์ที่แตกต่างกันได้รับรายงาน
. ไวรัสอื่น ๆ หลายอย่างรวมทั้งการติดเชื้อ HPV (Phromjai, et al,
2001) และ WSSV (Wang et al, ., 2000) การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรม
จะมีผลต่อการขยายของ PCR ที่แสดงให้เห็น
เมื่อไพรเมอร์เฉพาะที่ออกแบบมาสำหรับเกาหลี
HPV ไม่สามารถที่จะตรวจสอบการติดเชื้อ HPV ไทย เนื่องจากไม่มี
ข้อมูลที่สมบูรณ์ลำดับ MBV ได้รับฝากไว้
ในฐานข้อมูล GenBank จึงเป็นสิ่งจำเป็น
สำหรับความแตกต่างสายพันธุ์ไปได้ที่จะได้รับการทดสอบเมื่อวินิจฉัย
ไพรเมอร์ที่ใช้สำหรับการตรวจสอบ MBV ถ้าสายพันธุ์ที่
แตกต่างที่มีอยู่ชุดไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจง PCR อาจจะไม่
สามารถที่จะขยายตัวอย่างบวก MBV ชั้นนำทั้งหมด
จะเป็นผลลบเท็จ.
แม้ว่า MBV ได้รับการควบคุมอย่างมีประสิทธิภาพโดย
โปรแกรมกักกันหลายแห่งและโดยการรักษาไข่
วิธีมีรายงานหลายอย่างต่อเนื่องสูง
ความชุกของเชื้อไวรัสนี้ในโรงเพาะฟักกุ้ง (Flegel et
al, 2001;.. Umesha et al, 2003) ผลกระทบ
ของเชื้อไวรัสนี้ตัวอ่อนกุ้งโพสต์ (PL) อาจจะ
ลดลงโดยการคัดกรองจากพ่อแม่พันธุ์ของพวกเขาและ
ลูกหลานก่อนที่จะปล่อยลงในบ่อ PLs วัฒนธรรม
วิธีการที่จะสามารถตรวจสอบสายพันธุ์ทั้งหมดของ
MBV PLs ที่จะถูกส่งออกเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับประสิทธิภาพ
การกำจัดของหุ้นที่ติดเชื้อ MBV ขั้นตอนวิธี PCR
อธิบายไว้ที่นี่จะให้การวินิจฉัยที่เชื่อถือได้
เครื่องมือสำหรับการตรวจสอบของเชื้อ MBV ทางภูมิศาสตร์จากหลาย
สถานที่.
มีสามไวรัสลำไส้ติดเชื้อที่สำคัญที่มี
กุ้ง, BP, MBV และการติดเชื้อ HPV ทั้งความดันโลหิตและ
MBV-มีเกิดการอุดตันในขณะที่การติดเชื้อ HPV ผลึกเป็น
parvovirus (Pantoja และ Lightner, 2000) แสดงให้เห็นถึง
ความจำเพาะของไพรเมอร์พีซีอาร์ที่กำหนดไว้สำหรับ MBV เนื้อเยื่อ
ที่ติดเชื้อความดันโลหิตและการติดเชื้อ HPV ได้รับเลือกสำหรับการทดสอบ.
BP ได้รับเลือกเพราะมันเป็นไวรัสที่เกิดการอุดตัน

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ในการศึกษานี้ มีความไวสูงและเชื่อถือได้โดยวิธี PCR ซึ่งถูกพัฒนาขึ้นเพื่อตรวจวินิจฉัย

MBV ในเนื้อเยื่อกุ้ง คู่หลักนี้ 261f / R ที่ตรวจพบทั้งหมด
รู้จัก MBV บวกตัวอย่างจาก 4 ภูมิศาสตร์
สถานที่ ได้แก่ ไทย , ไต้หวัน , ฮาวาย ( P .
1 แนะนำจากฟิลิปปินส์และมาเลเซีย )
เก็บเป็นระยะเวลากว่า 13 ปี นี่คือ
รายงานแรกที่แสดงให้เห็นถึงเทคนิคการสื่อสารจากที่ตั้งทางภูมิศาสตร์ที่แตกต่างกันเชื้อ MBV
.
รายงานก่อนหน้านี้พบว่าเชื้อที่แยกได้จากการนำมาใช้กับเดียว

( MBV สถานที่เช่นออสเตรเลีย เบลเชอร์ และหนุ่ม , 1998 ) และไต้หวัน MBV
( ชาง et al . , 1993 ; Lu et al . , 1993 ; Hsu et al . , 2000 )
ความผันแปรทางพันธุกรรมของไวรัสที่แยกได้จากกุ้ง
สถานที่ทางภูมิศาสตร์ที่แตกต่างกันได้รับรายงานไวรัสหลาย ๆรวมถึง HPV (

phromjai et al . , 2001 ) และี ( Wang et al . , 2000 ) การเปลี่ยนแปลงทางพันธุกรรมอาจมีผลต่อการเพิ่ม

) แสดงให้เห็นเฉพาะไพรเมอร์ที่ออกแบบมาสำหรับ HPV เมื่อเกาหลี
ไม่สามารถตรวจหา HPV ไทย . เนื่องจากไม่สมบูรณ์ MBV ลำดับข้อมูลได้

ขนาดไว้ในฐานข้อมูล ดังนั้นมันเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับความแตกต่าง
เป็นไปได้สายพันธุ์ถูกทดสอบ เมื่อทำการวินิจฉัย
ใช้สำหรับการตรวจจับ MBV . ถ้าความแตกต่างของสายพันธุ์
อยู่เฉพาะ PCR ไพรเมอร์ชุดอาจ
สามารถขยายทั้งหมด MBV ตัวอย่างบวกลบปลอมผลเพื่อนำ
.
ถึงแม้ว่า MBV ได้รับมีประสิทธิภาพควบคุมโดย
โปรแกรมกักกันและหลายโดยวิธีการรักษา
ไข่มีหลายรายงานอย่างต่อเนื่องสูง
ความชุกของไวรัสนี้ในโรงเพาะฟักกุ้ง ( ชัยณรงค์ วงศ์ธีรทรัพย์ ร้อยเอ็ด
al . , 2001 ; umesha et al . , 2003 ) ผลกระทบเชิงลบของไวรัสในกุ้ง
Post larvae ( PL ) อาจจะลดลง โดยการคัดกรองของแม่

และลูกหลานของพวกเขาก่อนที่จะปล่อยกรุณาลงในบ่อเพาะเลี้ยง เป็นวิธีการที่มีความสามารถในการตรวจจับ

ทุกไอโซเลทMBV ที่กรุณาจะส่งออกเป็นสิ่งจำเป็นสำหรับการขจัดผลของการติดเชื้อ MBV
หุ้น ร่วมกระบวนการ
อธิบายไว้ที่นี่จะให้เครื่องมือการวินิจฉัย
ที่เชื่อถือได้สำหรับ MBV การตรวจหาเชื้อจากหลายสถานที่ทางภูมิศาสตร์
.
มีสามสาขา ที่มีไวรัสที่ติดเชื้อ
กุ้งตาม BP , และ MBV HPV . ทั้ง BP และ
MBV จะ occluded ขนาดส่วน HPV เป็น
พาร์โวไวรัส ( pantoja และดวงไฟ , 2000 ) เพื่อแสดงให้เห็นถึง
ของ PCR ไพรเมอร์ชุดสำหรับ MBV เพาะเนื้อเยื่อที่ติดเชื้อ HPV
BP และได้รับเลือกสำหรับการทดสอบ .
BP ได้รับเลือกเพราะมันเป็น occluded baculovirus