3. Results3.1. Biosynthesis of silk

3. Results
3.1. Biosynthesis of silk protein and chimeras
The strategy for biosynthesis of silk protein and the chimeras
was adopted as described previously [10,22]. The constructs of
the 6mer or the chimeras (6mer-A1, A3 or R5) are illustrated in
Fig. 1A. NheI-SpeI digestion and DNA sequencing confirmed the
inserts. SDS-PAGE indicated both expression and purification of
the 6mer and the chimeras were successful, and no obvious impurities
were detected on the gels (Fig. 1B). The MW of each protein
identified by mass spectroscopy matched the target calculation
(Fig. 1C), indicating the expressed and the purified proteins were
correctly generated. In the case of the 6mer, the molecular weight
was above 28 kDa on the gels, but was identified at 21–23 kDa by
mass spectroscopy. This discrepancy has been reported previously
for repetitive silk-based copolymers and likely reflects the hydrophobic
nature and repetitive features in the proteins [10,27,28].

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3. ผลลัพธ์3.1. การสังเคราะห์ของโปรตีนไหมและ chimerasกลยุทธ์สำหรับการสังเคราะห์ของโปรตีนไหม chimerasถูกนำมาใช้ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [10,22] โครงสร้างของดังรายละเอียด 6mer หรือ chimeras (6mer-A1, A3 หรือ R5) ในFig. 1A ย่อยอาหาร NheI-SpeI และยืนยันลำดับดีเอ็นเอแทรก SDS-หน้าระบุนิพจน์และฟอก6mer และ chimeras ประสบความสำเร็จ ไม่ชัดเจน และสิ่งสกปรกได้พบบน (Fig. 1B) MW ของโปรตีนแต่ละระบุมวลคำนวณเป้าหมายจับคู่ก(Fig. 1C), ระบุการแสดงและโปรตีนบริสุทธิ์ได้สร้างขึ้นอย่างถูกต้อง ในกรณีที่น้ำหนักโมเลกุลที่ 6merถูกข้าง kDa 28 บน แต่ระบุที่ 21 – 23 kDa ตามกมวล ความขัดแย้งนี้มีการรายงานก่อนหน้านี้copolymers ไหมใช้ซ้ำ และมีแนวโน้มสะท้อน hydrophobicธรรมชาติและลักษณะการทำงานซ้ำในโปรตีน [10,27,28]

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

3. ผล
3.1 การสังเคราะห์โปรตีนไหมและไคมีร่ากลยุทธ์สำหรับการสังเคราะห์โปรตีนไหมและไคมีร่าถูกนำมาใช้ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้[10,22] เป็นผู้ก่อสร้างของ6mer หรือไคมีร่า (ที่ 6mer-A1, A3 หรือ R5) จะแสดงในรูปที่ 1A การย่อยอาหาร NheI-Spei และลำดับดีเอ็นเอยืนยันแทรก SDS-PAGE ระบุทั้งการแสดงออกและการทำให้บริสุทธิ์ของ6mer chimeras และประสบความสำเร็จและไม่มีสิ่งสกปรกที่ชัดเจนถูกตรวจพบในเจล(รูป. 1B) เมกะวัตต์ของแต่ละโปรตีนระบุสเปกโทรสโกที่ตรงกับการคำนวณมวลเป้าหมาย(รูป. 1C) แสดงให้เห็นแสดงความบริสุทธิ์และโปรตีนที่ถูกสร้างขึ้นอย่างถูกต้อง ในกรณีที่ 6mer ที่น้ำหนักโมเลกุลสูงกว่า28 กิโลดาลตันในเจล แต่ถูกระบุว่าในวันที่ 21-23 กิโลดาลตันโดยสเปกโทรสโกมวล ความแตกต่างนี้ได้รับการรายงานก่อนหน้านี้สำหรับ copolymers ผ้าไหมที่ใช้ซ้ำและมีแนวโน้มที่สะท้อนให้เห็นถึงน้ำธรรมชาติและคุณสมบัติซ้ำในโปรตีน[10,27,28]

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3 . ผลลัพธ์
3.1 . การสังเคราะห์โปรตีนไหมและคิเมร่า
กลยุทธ์สำหรับการสังเคราะห์โปรตีนไหมและคิเมร่า
เป็นบุตรบุญธรรมตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ [ 10,22 ] ส่วนโครงสร้างของ
6mer หรือคิเมร่า ( 6mer-a1 A3 หรือ R5
) แสดงในรูปที่ 1A nhei spei การย่อยอาหารและดีเอ็นเอยืนยัน
แทรก เอนไซม์ที่พบทั้งการแสดงออกและการทำให้บริสุทธิ์ของ
การ 6mer และคิเมร่าสำเร็จ และไม่ชัด ปลอม
ถูกตรวจพบในเจล ( รูปที่ 1A ) mw ของโปรตีนแต่ละ
ระบุมวล SPECTROSCOPY ตรงกับเป้าหมายการคำนวณ
( ภาพที่ 1c ) แสดงแสดง และทำให้โปรตีนถูก
สร้างขึ้นอย่างถูกต้อง ในกรณีของ 6mer ,
น้ำหนักโมเลกุลสูงกว่า 28 กิโลดาลตันบนเจล แต่ถูกระบุที่ 21 – 23 กิโลดาลตันโดย
เมทานอล ความขัดแย้งนี้มีรายงานก่อนหน้านี้
สำหรับ ) ซ้ำไหมตาม และอาจสะท้อนให้เห็นถึงลักษณะและคุณสมบัติ Hydrophobic
ซ้ำในโปรตีน [ 10,27,28 ]